In vivo (Lösungsmittel einzeln und der Reihe nach zum Produkt hinzufügen.)
Homogeneous suspension
CMC-NA
≥5mg/ml
Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
* <1 mg/ml bedeutet schwer löslich oder unlöslich. * Bitte beachten Sie, dass Selleck die Löslichkeit aller Verbindungen intern testet und die tatsächliche Löslichkeit geringfügig von veröffentlichten Werten abweichen kann. Dies ist normal und ist auf geringfügige Batch-zu-Batch-Variationen zurückzuführen. * Versand bei Raumtemperatur (Stabilitätstests zeigen, dass dieses Produkt ohne Kühlmaßnahmen versendet werden kann.)
Vorbereitung von Stammlösungen
Biologische Aktivität
Beschreibung
G-749 ist ein neuartiger und potenter FLT3-Inhibitor mit einer IC50 von 0,4 nM, 0,6 nM und 1 nM für FLT3 (WT), FLT3 (D835Y) bzw. Mer, der eine geringere Potenz gegenüber anderen Tyrosinkinasen zeigt.
In FLT3-WT-tragenden RS4-11-Zellen und FLT3-ITD-tragenden MV4-11- und Molm-14-Zellen hemmt G-749 die Autophosphorylierung von FLT3 mit einer IC50 von
≤8 nM. In Leukämiezellen zeigt diese Verbindung eine antiproliferative Aktivität durch Induktion der Apoptose. In BaF3-Zelllinien, die FLT3-ITD/N676D, FLT3-ITD/F691L, FLT3-D835Y oder FLT3-D835Y/N676D stabil exprimieren, zeigt es eine starke Hemmaktivität mit einer IC50 von <10 nM und überwindet somit die Arzneimittelresistenz. In Blasten von AML-Patienten zeigt diese Chemikalie auch eine potente antileukämische Aktivität.
In vivo
In MV4-11-Xenograft-Mäusen hemmt G-749 (30 mg/kg p.o.) den FLT3-Signalweg effektiv und hemmt das Tumorwachstum signifikant. In einem orthogonalen Modell der Knochenmarktransplantation unter Verwendung von Molm-14-Zellen hemmt diese Verbindung (20 mg/kg p.o.) ebenfalls das Tumorwachstum und erhöht die Überlebensrate.
Aktivitätstests werden unter Verwendung der Lance Ultra-zeitaufgelösten Fluoreszenzresonanzenergietransfer (TR-FRET)-Technologie von Perkin-Elmer durchgeführt. Kurz gesagt, 10 ng/mL FLT3-Enzym, ein seriell verdünntes G-749, 80 nM Substrat des ULight-Poly-GT-Peptids und variable Mengen an ATP (8,5 µM bis 1088 μM) werden in Kinase-Assay-Puffer (50 mM HEPES pH 7,5, 10 mM MgCl2, 1 mM EGTA, 2 mM DTT und 0,01 % Tween-20) gemischt und in einem Volumen von 10 μL in eine 384-Well-OptiPlate-384 gegeben. Kinase-Reaktionen werden bei Raumtemperatur bis zu 1 Stunde inkubiert und dann durch Zugabe von 5 μL 10 mM EDTA gestoppt. Ein Volumen von 5 μL des spezifischen Eu-markierten Anti-Phosphopeptid-Antikörpers, verdünnt in LANCE Detection Buffer, wird dann zu einer Endkonzentration von 2 nM hinzugefügt. Nach 30-minütiger Inkubation werden die Assay-Platten bei 23 °C inkubiert und das LANCE-Signal auf einem EnVision Multilabel Reader gemessen. Die Anregungswellenlänge wird auf 320 nm eingestellt und die Emission bei 615 nm (Donor) und 665 nm (Akzeptor) überwacht. Die IC50 wird mittels nichtlinearer Regressionsanalyse mit GradPad Prism 5 berechnet.
Cells are seeded at a density of 2 ×104 cells per well and treated with the indicated concentrations of this compound for 72 hours at 37℃. The conditioned medium (CM) is prepared from HS-5 cell culture for 5 days under routine culture conditions, clarified by centrifugation, and used immediately. The CM is added to complete medium at a final concentration of 35%. In coculture experiments, 5 ×104 AML blast cells are plated in 24-well plates containing 1 ×104 HS-5 monolayers and then cultured for at least 48 hours before the exposure of inhibitors. Cell viability is determined by an ATPLite assay.
MV4-11 xenograft mouse model and Molm-14 orthogonal mouse model
Dosierungen
~30 mg/kg
Verabreichung
p.o.
Referenzen
https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/24532805/
Sellecks G-749 Wurde zitiert von 1 Publikation
G-749 Promotes Receptor Tyrosine Kinase TYRO3 Degradation and Induces Apoptosis in Both Colon Cancer Cell Lines and Xenograft Mouse Models
[ Front Pharmacol, 2021, 12:730241]
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