Gefitinib (ZD1839)

Gefitinib hemmt effektiv alle Tyrosinphosphorylierungsstellen an EGFR in sowohl hoch- als auch niedrig-EGFR-exprimierenden Zelllinien, einschließlich der NR6-, NR6M- und NR6W-Zelllinien. Die Phosphorylierungsstellen Tyr1173 und Tyr992 sind weniger empfindlich und erfordern höhere Konzentrationen dieser Verbindung zur Hemmung. Es blockiert effektiv die Phosphorylierung von PLC-γ mit einer IC50 von 27 nM in NR6W-Zellen. Die NR6wtEGFR- und NR6M-Zelllinien weisen niedrige PLC-γ-Phosphorylierungsspiegel auf, aber der Spiegel in der NR6M-Zelllinie ist resistenter gegenüber der Hemmung durch diese Chemikalie mit einer IC50 von 43 nM bzw. 369 nM. Diese Verbindung hemmt Akt-Phosphorylierungen mit einer IC50 von 220 und 263 nM in den niedrig-EGFR- bzw. -EGFRvIII-exprimierenden Zelllinien. Es fördert im Dosisbereich von 0,1 bis 0,5 μM signifikant, anstatt abzuschwächen, die Koloniebildung von NR6M-Zellen. Bei einer Konzentration von 2 μM blockiert diese Chemikalie jedoch vollständig die NR6M-Koloniebildung. Es hemmt schnell und dosisabhängig die EGFR- und ERK-Phosphorylierung bis zu 72 Stunden nach EGF-Stimulation in sowohl den hoch- als auch niedrig-EGFR-exprimierenden Zelllinien. [1] Diese Verbindung ist das Monolayer-Wachstum dieser EGF-gesteuerten untransformierten MCF10A-Zellen mit einer IC50 von 20 nM. [2] Die Kombination dieser Chemikalie (0,2 μM und 0,5 μM) mit Bestrahlung führte zu einer signifikanten Wachstumshemmung in LoVo-Zellen im Vergleich zur alleinigen Bestrahlung. [3]

Gefitinib (100 mg/kg) verbessert die Antitumorwirkung der Strahlentherapie bei LoVo-Tumor-Xenotransplantaten. [3] Die Behandlung von Nacktmäusen mit etablierten menschlichen GEO-Kolonkarzinom-Xenotransplantaten mit dieser Verbindung zeigt eine reversible dosisabhängige Hemmung des Tumorwachstums, da GEO-Tumoren am Ende der Behandlung die Wachstumsrate der Kontrollen wieder aufnehmen. [4]

• Zelllinien

  NR6, NR6M and NR6W cells

• Konzentrationen

  0-2 μM

• Inkubationszeit

  72 hours

• Methode

  Exponentially growing cells including NR6, NR6M, NR6M and NR6W cells are seeded in sextuple in 96-well plates at a concentration of 2000 cells/well, allowed to adhere and subsequently washed in PBS and incubated overnight in medium containing 0.5% FCS. Cells are then treated with varying concentrations (0-2 μM) of Gefitinib or the solute control DMSO and EGF. The optimal EGF concentration for inducing proliferation of NR6wtEGFR and NR6W cells has previously been determined and hence NR6wtEGFR and NR6W cells are supplemented with 10 nM and 0.1 nM this compound, respectively. EGF is not added to NR6 and NR6M cells. After 72 hours the amount of cells are measured by performing a MTT proliferation assay.

• Tiermodelle

  Female nude mice (cba nu/nu) aged 8–10 weeks are intra-dermal injected with LoVo cells.

• Dosierungen

  100 mg/kg

• Verabreichung

  Once daily by oral administration (0.1 mL/10 g body weight) for 14 days