Geldanamycin (NSC 122750)

Katalog-Nr.S2713 Charge:S271306

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Technische Daten

Formel

C29H40N2O9
Molekulargewicht 560.64 CAS-Nr. 30562-34-6
Löslichkeit (25°C)* In vitro DMSO 100 mg/mL (178.36 mM)
Water Insoluble
Ethanol Insoluble
In vivo (Lösungsmittel einzeln und der Reihe nach zum Produkt hinzufügen.)
Homogeneous suspension
CMC-NA
≥5mg/ml Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
* <1 mg/ml bedeutet schwer löslich oder unlöslich.
* Bitte beachten Sie, dass Selleck die Löslichkeit aller Verbindungen intern testet und die tatsächliche Löslichkeit geringfügig von veröffentlichten Werten abweichen kann. Dies ist normal und ist auf geringfügige Batch-zu-Batch-Variationen zurückzuführen.
* Versand bei Raumtemperatur (Stabilitätstests zeigen, dass dieses Produkt ohne Kühlmaßnahmen versendet werden kann.)

Vorbereitung von Stammlösungen

Biologische Aktivität

Beschreibung Geldanamycin ist ein natürlich vorkommender HSP90-Inhibitor mit einem Kd von 1,2 μM, der die Assoziation von Glucocorticoidrezeptor (GR)/HSP spezifisch stört. Geldanamycin lindert virusinfektionsbedingte ALI (akute Lungenverletzung)/ARDS (akutes Atemnotsyndrom), indem es die Entzündungsreaktionen des Wirts reduziert.
Ziele
p185
(SKBr3 cells)		 HSP90 (N-terminal domain)
(Cell-free assay)		 HSP90
(Cell-free assay)
70 nM 0.78 μM(Kd) 1.2 μM(Kd)
In vitro Geldanamycin bindet in der ATP-Bindungsstelle in der N-terminalen Domäne von Hsp90 (Reste 1-220). Diese Verbindung hemmt die ATPase-Aktivität von Hsp90 dosisabhängig. Sie verursacht einen dosisabhängigen G2-Arrest und eine reversible Hemmung des Eintritts in die S-Phase in der menschlichen Ovarialzelllinie A2780. Diese Hemmung geht mit einem p53-Anstieg einher und ist schließlich als p53-abhängig nachgewiesen. Diese Chemikalie verursacht eine Polyubiquitinierung und proteasomale Degradation des p185-Rezeptor-Protein-Tyrosin-Kinase und zeigt eine IC50 von 70 nM. Es ist ein typisches Antitumor-Reagenz und zeigt eine mittlere GI50 von 0,18 μM gegen das Panel von 60 menschlichen Tumorzelllinien.
In vivo Geldanamycin (50 mg/kg) zeigt eine 30%ige Hemmung der p185-assoziierten Phosphotyrosinspiegel bei FRE/erbB-2-Mäusen.

Protokoll (aus Referenz)

Kinase-Assay:

[1]
  • Isotherme Titrationskalorimetrie (ITC) der Nukleotidbindung

    Die Titrationsexperimente werden mit dem MSC-System durchgeführt. In jedem Experiment werden 16 Aliquots von 15 μL Geldanamycin (300 μM in 1% DMSO) in 1,3 mL Protein (31 μM in 20 mM Tris-HCl, pH 7,5, 1 mM EDTA) bei 25 °C injiziert, und die resultierenden Daten werden nach Subtraktion der Verdünnungswärmen angepasst. Die Verdünnungswärmen werden in separaten Experimenten durch Zugabe dieser Verbindung zu Puffer und Puffer zu Protein bestimmt. Es gibt keinen Hinweis auf eine Bindung von DMSO in der Nukleotidbindungsstelle. Die Titrationsdaten werden mit einem nichtlinearen Kleinste-Quadrate-Kurvenanpassungsalgorithmus mit drei gleitenden Variablen angepasst: Stöchiometrie, Bindungskonstante (Kb) 1/Kd) und Enthalpieänderung der Wechselwirkung (ΔH°). Die geschätzten Dissoziationskonstanten für die Bindung dieser Verbindung an intaktes Hsp90 aus Hefe betragen 1,22 μM und für die Bindung an die N-terminale Domäne von Hsp90 0,78 μM. Bei der Bindung an das C-terminale Fragment wird keine signifikante Wärme beobachtet.
Zell-Assay:

[2]
  • Zelllinien

    A2780 human ovarian cell line

  • Konzentrationen

    0.001-10 μM

  • Inkubationszeit

    3 hours

  • Methode

    Exponentially growing cells are treated with Geldanamycin and at various times DNA synthesis is assessed by incorporation of bromodeoxyuridine (BrdUrd) and flow cytometric analysis. No marked difference in total cell number is noted during this time course for treated and untreated cultures. BrdUrd (10 μM) is incorporated over a 4-h incubation period at 37 °C and cells are harvested and fixed in 70% ethanol. After denaturation of the DNA with 2 N HC1, cells are incubated with an anti-BrdUrd mouse monoclonal antibody followed by a fluorescein isothiocyanate (FITC)-linked goat anti-mouse IgG. Cells are stained for 30 minutes at room temperature with propidium iodide and analysed by flow cytometry using a Coulter EPICS Profile Analyzer.
Tierstudie:

[6]
  • Tiermodelle

    FRE/erbB-2 tumors in nu/nu mice

  • Dosierungen

    50 mg/kg

  • Verabreichung

    Administered via i.p.

Referenzen

  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/9925731/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/8599864/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/8798456/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/7909494/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/7628050/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/7562911/

Kundenproduktvalidierung

Phenotypic effect of Genetic or Pharmacologic Compromise of the 477 Hsp70-StiA-Hsp90 Complex. The impact of each genetic modification on radial growth, conidiation, and response to various stress conditions was assessed after inoculation of a suspension of 104 conidia on glucose minimal medium (GMM) agar plates and incubation at 37ºC for 5 days.

Daten von [ , , Antimicrob Agents Chemother, 2015, 10.1128/AAC.00946-15 ]

C2C12 myoblasts were transfected with HA-tagged A17-PABPN1 constructs. Twenty-four hours post-transfection, cells were treated with CHX (10 μg/ml) alone or together with geldanamycin (2.5 μM) for the indicated times at 37°C. Lysates were blotted to show the expression of the proteins of interest. Band density was quantified and is shown in the line graph (right panels). Data are shown as the mean ± SEM (n = 5); **, P < 0.01.

Daten von [ , , PLoS One, 2015, 10(9):e0138936. ]

RT-qPCR analysis of eNOS mRNA and representative Western blot images of eNOS expression, respectively, in irradiated BAECs pretreated of geldanamycin (GA; 500 nM). At 12 h after 10 Gy irradiation, BAECs were harvested. The results suggest that both HSP90 is involved in the upregulation of eNOS in irradiated BAECs.

Daten von [ , , Radiat Res, 2018, 189(5):519-528 ]

Sellecks Geldanamycin (NSC 122750) Wurde zitiert von 36 Publikationen

The deubiquitinase inhibitor WP1130 drives nuclear aggregation and reactivation of mutant p53 for selective cancer cell targeting [ FEBS J, 2025, 292(11):2823-2842] PubMed: 40070163
Targeting HSP90 with Ganetespib to Induce CDK1 Degradation and Promote Cell Death in Hepatoblastoma [ Cancers (Basel), 2025, 17(8)1341] PubMed: 40282517
Viral proteins resolve the virus-vector conundrum during hemipteran-mediated transmission by subverting salicylic acid signaling pathway [ Nat Commun, 2024, 15(1):9448] PubMed: 39487136
Polo-like kinase 2 promotes microglial activation via regulation of the HSP90α/IKKβ pathway [ Cell Rep, 2024, 43(10):114827] PubMed: 39383034
Inhibition of HSP90 in Driver Oncogene-Defined Lung Adenocarcinoma Cell Lines: Key Proteins Underpinning Therapeutic Efficacy [ Int J Mol Sci, 2023, 24(18)13830] PubMed: 37762133
Development of a First-in-Class Small-Molecule Inhibitor of the C-Terminal Hsp90 Dimerization [ ACS Cent Sci, 2022, 8(5):636-655] PubMed: 35647282
Local Elimination of Senescent Cells Promotes Bone Defect Repair during Aging [ ACS Appl Mater Interfaces, 2022, 10.1021/acsami.1c22138] PubMed: 35014784
Proteome-Wide Deconvolution of Drug Targets and Binding Sites by Lysine Reactivity Profiling [ Anal Chem, 2022, 10.1021/acs.analchem.1c05455] PubMed: 35147412
Hsp90 Regulates GCRV-II Proliferation by Interacting with VP35 as Its Receptor and Chaperone [ J Virol, 2022, 96(19):e0117522] PubMed: 36102647
Hsp90 Regulates GCRV-II Proliferation by Interacting with VP35 as Its Receptor and Chaperone [ Journal of Virology, 2022, Vol. 96, No. 19] PubMed: None

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