GNF-2

Katalog-Nr.S2899 Charge:S289902

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Technische Daten

Formel

C18H13F3N4O2
Molekulargewicht 374.32 CAS-Nr. 778270-11-4
Löslichkeit (25°C)* In vitro DMSO 74 mg/mL (197.69 mM)
Water Insoluble
Ethanol Insoluble
In vivo (Lösungsmittel einzeln und der Reihe nach zum Produkt hinzufügen.)
Homogeneous suspension
CMC-NA
≥5mg/ml Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
* <1 mg/ml bedeutet schwer löslich oder unlöslich.
* Bitte beachten Sie, dass Selleck die Löslichkeit aller Verbindungen intern testet und die tatsächliche Löslichkeit geringfügig von veröffentlichten Werten abweichen kann. Dies ist normal und ist auf geringfügige Batch-zu-Batch-Variationen zurückzuführen.
* Versand bei Raumtemperatur (Stabilitätstests zeigen, dass dieses Produkt ohne Kühlmaßnahmen versendet werden kann.)

Vorbereitung von Stammlösungen

Biologische Aktivität

Beschreibung GNF-2 ist ein hochselektiver, nicht-ATP-kompetitiver Inhibitor von Bcr-Abl, der keine Aktivität gegenüber Flt3-ITD-, Tel-PDGFR-, TPR-MET- und Tel-JAK1-transformierten Tumorzellen zeigt.
Ziele
Bcr-Abl (SUP-B15 cell line) Bcr-Abl (K562 cell line)
268 nM 273 nM
In vitro GNF-2 verursacht eine dosisabhängige Wachstumshemmung der Bcr-abl-positiven Zelllinien mit IC50-Werten von 273 nM (K562) und 268 nM (SUP-B15). Diese Verbindung hemmt das Wachstum von Ba/F3.p210E255V und Ba/F3.p185Y253H Zellen mit IC50-Werten von 268 nM bzw. 194 nM. Diese Chemikalie (1 μM) induziert Apoptose von Ba/F3.p210-Zellen sowie Ba/F3.p210E255V-Zellen. Sie hemmt die zelluläre Tyrosinphosphorylierung von Bcr-abl dosisabhängig mit einer IC50 von 267 nM. Diese Verbindung (1 μM) induziert einen signifikanten Rückgang der Phospho-Stat5-Spiegel in Ba/F3.p210-Zellen. Sie bindet an die Myristat-Bindetasche von Bcr-abl. Dieser Inhibitor hemmt die Kinaseaktivität von nicht-myristoyliertem c-Abl potenter als die von myristoyliertem c-Abl, indem er an die Myristat-Bindetasche in der C-Lobe der Kinasedomäne bindet. Dieses Mittel (10 μM) benötigt BCR und/oder die c-Abl SH3- und/oder SH2-Domänen, um die BCR-Abl-abhängige Zellproliferation zu hemmen. Es, aber kein methyliertes GNF-2-Analogon, bindet c-Abl in zellulären Extrakten, die aus 3T3-Fibroblasten gewonnen wurden. Diese Verbindung (10 μM) hemmt dosisabhängig die Tyrosinphosphorylierung von CrkII. Es hemmt die Phosphorylierung von CrkII in c-AblG2A-exprimierenden Zellen mit einer IC50 von 0,051 μM. Diese Chemikalie bindet in einer ausgedehnten Konformation in der Myristat-Tasche, wobei die CF3-Gruppe in der gleichen Tiefe wie die letzten beiden Kohlenstoffe des Myristat-Liganden vergraben ist. Diese Verbindung (10 µM) in Kombination mit Imatinib (1 µM) reduziert die Anzahl resistenter Klone gegen 1 µM Imatinib um mindestens 90 %. Es hemmt die Autophosphorylierung und Proliferation von BafF3-Zellen, die p210Bcr-Abl und p210Bcr-Abl-Mutanten exprimieren. Dieses Mittel (8 nM) in Kombination mit GNF-5 (20 nM) führt zu additiven Effekten hinsichtlich der Hemmung der Abl64-515-Kinaseaktivität.

Protokoll (aus Referenz)

Kinase-Assay:[2]
  • Bindungsassay

    Rekombinante Proteine (100 nM für jedes Konstrukt) oder immunpräzipitierte Proteine werden in Kinasepuffer (20 mM HEPES (pH 7,4), 50 mM KCl, 0,1 % CHAPS, 30 mM MgCl2, 2 mM MnCl2, 1 mM DTT und 1 % Glycerin) verdünnt. Aliquots der verdünnten Proteine werden 30 Minuten lang bei Raumtemperatur entweder mit DMSO oder dieser Verbindung vorinkubiert und dann zu K-LISA PTK EAY Reaktionsplatten gegeben. Die Kinase-Reaktion wird durch Zugabe von 0,1 mM ATP initiiert und läuft 30 Minuten lang bei Raumtemperatur ab. Die Phosphorylierung von GST-Abltide wird mittels SDS-PAGE und Phosphorimaging-Analyse oder Autoradiographie überwacht.
Zell-Assay:[1]
  • Zelllinien

    Ba/F3.p210, Ba/F3.p210E255V and Ba/F3.p185Y253H cells

  • Konzentrationen

    ~10 μM

  • Inkubationszeit

    48 hours

  • Methode

    Cells (0.3-0.6 × 106 per mL) are plated in duplicate or triplicate in 96-well plates containing increasing GNF-2 concentrations (5 nM–10 μM). After incubation at 37 ℃ in 5% CO2 for 48 hours, the effect of this compound on cell viability is determined by the MTT colorimetric dye reduction method. Inhibition of cell proliferation is calculated as a percentage of growth of DMSO-treated cells, and IC50 values are determined with Microsoft Excel XLfit3.

Referenzen

  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/16415863/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/19679652/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/20072125/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/20152788/

Kundenproduktvalidierung

Cell viability of K562/IR cells and their parental cell lines after exposure to different concentrations of GNF-2 for 72 h.

Daten von [ , , Oncotarget, 2017, 8(24):38717-38730 ]

Sellecks GNF-2 Wurde zitiert von 8 Publikationen

A multiplexed siRNA screen identifies key kinase signaling networks of brain glia [ Life Sci Alliance, 2023, 6(5)e202201605] PubMed: 36878638
Imatinib protects against human beta-cell death via inhibition of mitochondrial respiration and activation of AMPK [ Clin Sci (Lond), 2021, 135(19):2243-2263] PubMed: 34569605
Quantitative, Wide-Spectrum Kinase Profiling in Live Cells for Assessing the Effect of Cellular ATP on Target Engagement [Vasta JD Cell Chem Biol, 2018, 25(2):206-214] PubMed: 29174542
Abl and Arg mediate cysteine cathepsin secretion to facilitate melanoma invasion and metastasis [ Sci Signal, 2018, 11(518)eaao0422] PubMed: 29463776
Coronavirus S protein-induced fusion is blocked prior to hemifusion by Abl kinase inhibitors. [ J Gen Virol, 2018, 99(5):619-630] PubMed: 29557770
Comparative Characterization of Osteoclasts Derived From Murine Bone Marrow Macrophages and RAW 264.7 Cells Using Quantitative Proteomics. [ JBMR Plus, 2018, 2(6):328-340] PubMed: 30460336
Abl kinase regulation by BRAF/ERK and cooperation with Akt in melanoma. [ Oncogene, 2017, 36(32):4585-4596] PubMed: 28368422
Contributions of MET activation to BCR-ABL1 tyrosine kinase inhibitor resistance in chronic myeloid leukemia cells. [Tsubaki M, et al. Oncotarget, 2017, 8(24):38717-38730] PubMed: 28418880

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