GSK1070916

Katalog-Nr.S2740 Charge:S274001

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Technische Daten

Formel

C30H33N7O
Molekulargewicht 507.63 CAS-Nr. 942918-07-2
Löslichkeit (25°C)* In vitro DMSO 102 mg/mL (200.93 mM)
Ethanol 46 mg/mL (90.61 mM)
Water Insoluble
In vivo (Lösungsmittel einzeln und der Reihe nach zum Produkt hinzufügen.)
Homogeneous suspension
CMC-NA
≥5mg/ml Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
* <1 mg/ml bedeutet schwer löslich oder unlöslich.
* Bitte beachten Sie, dass Selleck die Löslichkeit aller Verbindungen intern testet und die tatsächliche Löslichkeit geringfügig von veröffentlichten Werten abweichen kann. Dies ist normal und ist auf geringfügige Batch-zu-Batch-Variationen zurückzuführen.
* Versand bei Raumtemperatur (Stabilitätstests zeigen, dass dieses Produkt ohne Kühlmaßnahmen versendet werden kann.)

Vorbereitung von Stammlösungen

Biologische Aktivität

Beschreibung GSK1070916 ist ein reversibler und ATP-kompetitiver Inhibitor von Aurora B/C mit einem IC50 von 3,5 nM/6,5 nM. Er zeigt eine >100-fache Selektivität gegenüber dem eng verwandten Aurora A-TPX2-Komplex. Phase 1.
Ziele
Aurora B-INCENP
(Cell-free assay)		 Aurora C-INCENP
(Cell-free assay)		 FLT1
(Cell-free assay)		 Tie-2
(Cell-free assay)		 SIK
(Cell-free assay)		 Mehr anzeigen
3.5 nM 6.5 nM 42 nM 59 nM 70 nM
In vitro GSK1070916 hemmt selektiv Aurora B und Aurora C mit Ki von 0,38 nM bzw. 1,5 nM gegenüber Aurora A mit Ki von 490 nM. Die Hemmung von Aurora B und Aurora C durch diese Verbindung ist zeitabhängig, mit einer Dissoziationshalbwertszeit des Enzym-Inhibitor-Komplexes von >480 min bzw. 270 min. Darüber hinaus ist es auch ein kompetitiver Inhibitor in Bezug auf ATP. Menschliche Tumorzellen, die mit diesem Inhibitor behandelt wurden, zeigen eine dosisabhängige Hemmung der Phosphorylierung an Serin 10 von Histon H3, einem Substrat, das spezifisch für Aurora B ist. Darüber hinaus hemmt es die Proliferation von Tumorzellen mit EC50-Werten von <10 nM in über 100 Zelllinien, die ein breites Spektrum von Tumortypen umfassen, mit einem medianen EC50 von 8 nM. Obwohl diese Verbindung eine potente Aktivität gegen proliferierende Zellen aufweist, wird eine dramatische Verschiebung der Potenz in primären, nicht-teilenden, normalen menschlichen Venenendothelzellen beobachtet. Darüber hinaus arretieren mit diesem Mittel behandelte Zellen nicht in der Mitose, sondern teilen sich stattdessen nicht und werden polyploid, was letztendlich zur Apoptose führt. In einer anderen Studie wird auch berichtet, dass eine hohe Chromosomenzahl, die mit der Resistenz gegenüber der Hemmung von Aurora B und C verbunden ist, darauf hindeutet, dass Zellen mit einem Mechanismus zur Umgehung des Hochploidie-Checkpoints resistent gegen diese Chemikalie sind.
In vivo GSK1070916 (25, 50 oder 100 mg/kg) zeigt eine dosisabhängige Hemmung der Phosphorylierung eines Aurora B-spezifischen Substrats bei Mäusen und, im Einklang mit seiner breiten zellulären Aktivität, hat diese Verbindung Antitumorwirkungen in 10 humanen Tumor-Xenograft-Modellen, einschließlich Brust-, Darm-, Lungen- und zwei Leukämiemodellen.

Protokoll (aus Referenz)

Kinase-Assay:[1]
  • Kinase-Assay

    Die Fähigkeit von GSK1070916, die Aurora-Enzyme zu hemmen, wird mittels in vivo Kinase-Assays gemessen. Die Assays messen die Fähigkeit von Aurora A, Aurora B und Aurora C, ein synthetisches Peptidsubstrat zu phosphorylieren. Biotin-Ahx-RARRRLSFFFFAKKK-NH2 wird für den Aurora A–TPX2 LEADseekerTM-Assay verwendet und 5FAM-PKAtide wird für den IMAPTM-Assay für alle drei Aurora Kinasen verwendet. Um die zeitabhängige Hemmung von Aurora-Enzymen zu berücksichtigen, werden Aurora A–TPX2, Aurora B–INCENP und Aurora C–INCENP mit dieser Verbindung in verschiedenen Konzentrationen 30 min lang inkubiert, bevor die Reaktionen durch Zugabe der Substrate initiiert werden. Für den Aurora A LEADseekerTM-Assay sind die endgültigen Assay-Bedingungen 0,5 nM Aurora A–TPX2, 1 μM Peptidsubstrat, 6 mM MgCl2, 1,5 μM ATP, 0,003 μCi/μL [γ-33P] ATP in 50 mM Hepes, pH 7,2, 0,15 mg/mL BSA, 0,01 % Tween-20, 5 mM DTT und 25 mM KCl. Die Reaktionen werden bei Raumtemperatur (25 °C) 120 min lang inkubiert und durch Zugabe von LEADseekerTM-Beads in PBS mit EDTA (Endkonzentration 2 mg/mL Beads und 25 mM EDTA) beendet. Die Platten werden dann versiegelt und die Beads über Nacht absetzen lassen. Die Produktbildung wird mit einem Viewlux Imager quantifiziert. Für die IMAPTM-Assays werden Aurora A–TPX2 (Endkonzentration 1 nM), Aurora B–INCENP (Endkonzentration 2 nM) oder Aurora C–INCENP (Endkonzentration 2,5 nM) zu den Verbindung-enthaltenden Platten in 5 μL Puffer (25 mM Hepes, pH 7,2, für Aurora A, 25 mM Hepes, pH 7,5, für Aurora B und 20 mM Hepes, pH 7,2, für Aurora C) gegeben, der 0,15 mg/mL BSA, 0,01 % Tween 20 und 25 mM NaCl enthält. Diese Mischung wird 30 min lang bei Raumtemperatur inkubiert. Um die Reaktion zu starten, werden 5 μL einer Substratlösung zugegeben, die den gleichen Hepes-Puffer wie für die Vorinkubation, 25 mM NaCl, MgCl2 (2, 4 und 4 mM für Aurora A, B bzw. C), DTT (4, 4 und 2 mM für Aurora A, B bzw. C), ATP (4, 4 und 10 μM für Aurora A, B bzw. C), 200 nM 5FAM-PKAtide, 0,01 % Tween 20 und 0,15 mg/mL BSA enthält. Die Reaktionen werden für Aurora A und B 120 min und für Aurora C 60 min bei Raumtemperatur inkubiert. Diese Reaktionen werden dann durch Zugabe von 10 μL 1:500 (1:600 für Aurora C) Progressive Binding Reagent in 95 % Progressive Binding Buffer A und 5 % Progressive Binding Buffer B beendet. Die Platten werden bei Raumtemperatur für ca. 90–120 min inkubiert (Zeit, die zum Erreichen des Gleichgewichts erforderlich ist). Die Platten werden in einem Molecular Devices Analyst Plattenleser im Fluoreszenzpolarisationsmodus abgelesen.
Zell-Assay:[2]
  • Zelllinien

    SW48, Colo 201, SW480, WiDr, Colo205, RKO E6, RKO, LoVo, HCT-116, SW620, HT29, W1417, DLD-1, HCT-8, Colo 320HSR, Hep-3B, OVCAR-3, MEC-1 cells

  • Konzentrationen

    0-15 mM

  • Inkubationszeit

    6-7 days

  • Methode

    Cells are plated in 96-well plates in the recommended growth media and incubated at 37 °C in 5% CO2 overnight. The following day, the cells are treated with serial dilutions of GSK1070916. At this time, one set of cells is treated with CellTiter-Glo for a time equal to 0 (T = 0) measurement. Following a 6- to 7-d incubation with this compound, cell proliferation is measured using the CellTiter-Glo reagent according to the manufacture's recommended protocol. As inhibition of Aurora B induces endomitosis, the degree of which differs depending on the cell type, an extended compound treatment time is required to accurately reflect the effects on cell viability across a large panel of cell lines. For analysis of cell viability, values from wells with no cells are subtracted for background correction and the data plotted as a percent of the DMSO-treated control samples using Microsoft Excel XLfit4 software. The EC50 values represent the concentration of this compound where 50% maximal effect is observed
Tierstudie:[2]
  • Tiermodelle

    Mice tumor xenograft models (A549, SW620, HCT116, H460, MCF-7, HL60, K562, Colo205)

  • Dosierungen

    25, 50, or 100 mg/kg

  • Verabreichung

    Administered via i.p. once daily

Referenzen

  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/19284385/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/19567821/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/21762492/

Kundenproduktvalidierung

, , Antonino Maria Spart from University of Bologn

, , Antonino Maria Spart from University of Bologn

, , Antonino Maria Spart from University of Bologn

(C) T-ALL cell lines were treated with BI6727, GSK1070916, and MK-5108 at their respective IC50s for 48 h, then they were collected, lysed, and analyzed by western blot. Molecular weights are indicated on the left. CTRL, untreated cells.

Daten von [ , , Cell Cycle, 2014, 13(14):2237-47 ]

Sellecks GSK1070916 Wurde zitiert von 12 Publikationen

Identification of chemical inhibitors targeting long noncoding RNA through gene signature-based high throughput screening [ Int J Biol Macromol, 2025, 292:139119] PubMed: 39722392
Integrated drug response prediction models pinpoint repurposed drugs with effectiveness against rhabdomyosarcoma [ PLoS One, 2024, 19(1):e0295629] PubMed: 38277404
DELs enable the development of BRET probes for target engagement studies in cells [ Cell Chem Biol, 2023, 30(8):987-998.e24] PubMed: 37490918
Targeting Aurora B kinase prevents and overcomes resistance to EGFR inhibitors in lung cancer by enhancing BIM- and PUMA-mediated apoptosis [ Cancer Cell, 2021, S1535-6108(21)00383-4] PubMed: 34388376
Loss of Aurora kinase signaling allows lung cancer cells to adopt endoreplication and form polyploid giant cancer cells that resist antimitotic drugs [ Cancer Res, 2020, canres.1693.2020] PubMed: 33172929
Tie2-FGFR1 Interaction Induces Adaptive PI3K Inhibitor Resistance by Upregulating Aurora A/PLK1/CDK1 Signaling in Glioblastoma. [ Cancer Res, 2019, 79(19):5088-5101] PubMed: 31416846
Network pharmacology modeling identifies synergistic Aurora B and ZAK interaction in triple-negative breast cancer [ NPJ Syst Biol Appl, 2019, 5:20] PubMed: 31312514
High-Throughput Screening Identifies Kinase Inhibitors That Increase Dual Adeno-Associated Viral Vector Transduction In Vitro and in Mouse Retina. [ Hum Gene Ther, 2018, 29(8):886-901] PubMed: 29641320
A small-molecule inhibitor targeting the AURKC-IκBα interaction decreases transformed growth of MDA-MB-231 breast cancer cells [ Oncotarget, 2017, 8(41):69691-69708] PubMed: 29050234
Leishmania donovani Aurora kinase: A promising therapeutic target against visceral leishmaniasis. [Chhajer R, et al. Biochim Biophys Acta, 2016, 1860(9):1973-88] PubMed: 27288586

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