GSK126

Katalog-Nr.S7061 Charge:S706109

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Technische Daten

Formel

C31H38N6O2
Molekulargewicht 526.67 CAS-Nr. 1346574-57-9
Löslichkeit (25°C)* In vitro DMSO 5 mg/mL (9.49 mM)
Ethanol 4 mg/mL (7.59 mM)
Water Insoluble
In vivo (Lösungsmittel einzeln und der Reihe nach zum Produkt hinzufügen.)
Homogeneous suspension
CMC-NA
≥5mg/ml Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
* <1 mg/ml bedeutet schwer löslich oder unlöslich.
* Bitte beachten Sie, dass Selleck die Löslichkeit aller Verbindungen intern testet und die tatsächliche Löslichkeit geringfügig von veröffentlichten Werten abweichen kann. Dies ist normal und ist auf geringfügige Batch-zu-Batch-Variationen zurückzuführen.
* Versand bei Raumtemperatur (Stabilitätstests zeigen, dass dieses Produkt ohne Kühlmaßnahmen versendet werden kann.)

Vorbereitung von Stammlösungen

Biologische Aktivität

Beschreibung GSK126 (GSK2816126A, GSK2816126) ist ein potenter, hochselektiver EZH2 methyltransferase Inhibitor mit einer IC50 von 9,9 nM, >1000-fach selektiver für EZH2 gegenüber 20 anderen menschlichen Methyltransferasen.
Ziele
EZH2
(Cell-free assay)
9.9 nM
In vitro In vitro hemmt GSK126 am stärksten H3K27me3, gefolgt von H3K27me2 in sowohl EZH2-Wildtyp- als auch mutierten DLBCL-Zelllinien. Diese Verbindung hemmt auch effektiv die Proliferation von EZH2-mutierten DLBCL-Zelllinien und induziert die Transkriptionsaktivierung von EZH2-Zielgenen in sensitiven Zelllinien. In A687V EZH2-mutanten Zellen führt diese Behandlung zu einer globalen Abnahme von H3K27me3, einer robusten Genaktivierung, Caspase-Aktivierung und einer verminderten Proliferation. In den Eltern-H2087-Zellen hemmt es die Expression von VEGF-A und phosphoryliertem Ser(473)-AKT und bewirkt somit die Hemmung der Zellproliferation, Migration und Metastasierung.
In vivo Bei Mäusen mit KARPAS-422- und Pfeiffer-Xenografts senkt GSK126 (150 mg/kg/d, i.p.) das globale H3K27me3, erhöht die Genexpression und führt somit zu einer deutlichen Tumorrückbildung.

Protokoll (aus Referenz)

Kinase-Assay:

[1]
  • EZH2-Assay

    Der fünfköpfige PRC2-Komplex (Flag–EZH2, EED, SUZ12, AEBP2, RbAp48), der entweder Wildtyp- oder mutiertes EZH2 enthält, wird hergestellt. GSK126 wird in DMSO gelöst und in Konzentrationen von 0,6 nM bis 300 nM mit einer finalen DMSO-Konzentration von 2,5 % getestet. Im Gegensatz zum Wildtyp-EZH2, das in vitro H3K27me0 als Substrat bevorzugt, bevorzugen EZH2 Y641-Mutanten H3K27me2 und zeigen wenig Aktivität mit H3K27me0 oder H3K27me1. Der A677G-Mutant unterscheidet sich sowohl von der Wildtyp- als auch von den Y641-Mutantenformen von EZH2 dadurch, dass er H3K27me0, H3K27me1 und H3K27me2 effizient methyliert; daher werden Histon-H3-Peptide (Reste 21–44; 10 μM final) mit entweder K27me0 (Wildtyp, A677G EZH2), K27me1 (A677G EZH2) oder K27me2 (A677G, Y641N, Y641C, Y641H, Y641S und Y641F EZH2) als methyltransferase-Substrate verwendet. Diese Verbindung wird zu den Platten gegeben, gefolgt von der Zugabe von 6 nM EZH2-Komplex und Peptid. Da die Potenz dieser Chemikalie an oder nahe der engen Bindungsgrenze eines Assays liegt, der bei [SAM] = Km durchgeführt wird, werden IC50-Werte bei einer hohen Konzentration des kompetitiven Substrats SAM relativ zu seinem Km (7,5 μM SAM, wobei der SAM Km 0,3 μM beträgt) gemessen. Unter diesen Bedingungen wird der Beitrag der Enzymkonzentration relativ gering, und genaue Schätzungen von Ki können berechnet werden. Reaktionen werden mit [3H]-SAM initiiert, 30 Minuten inkubiert, durch Zugabe eines 500-fachen Überschusses an unmarkiertem SAM gequencht und das methylierte Produktpeptid wird auf Phosphozellulosefiltern gemäß dem vom Hersteller gelieferten Protokoll für MSPH Multiscreen-Platten eingefangen. Die Platten werden auf einem TopCount ausgelesen, nachdem 20 μL Microscint-20-Cocktail hinzugefügt wurden. Apparente Ki-Werte werden unter Verwendung der Cheng–Prusoff-Beziehung für einen kompetitiven Inhibitor berechnet. IC50=Ki (1+[S]/Km)+[E]/2, wobei E das Enzym und S das Substrat ist.
Zell-Assay:

[1]
  • Zelllinien

    46 lymphoma cell lines

  • Konzentrationen

    0~10 μM

  • Inkubationszeit

    6 days

  • Methode

    The optimal cell seeding is determined empirically for all cell lines by examining the growth of a wide range of seeding densities in a 384-well format to identify conditions that permitted proliferation for 6 days. Cells are then plated at the optimal seeding density 24 h before treatment (in duplicate) with a 20-point two fold dilution series of GSK126 or 0.15% DMSO. Plates are incubated for 6 days at 37°C in 5% CO2. Cells are then lysed with CellTiter-Glo (CTG) and chemiluminescent signal is detected with a TECAN Safire2 microplate reader. In addition, an untreated plate of cells is harvested at the time of compound addition (T0) to quantify the starting number of cells. CTG values obtained after the 6 day treatment are expressed as a percent of the T0 value and plotted against this compound concentration. Data are fit with a four-parameter equation to generate a concentration response curve and the concentration of this chemical required to inhibit 50% of growth (growth IC50) is determined.
Tierstudie:

[1]
  • Tiermodelle

    Female beige SCID mice bearing Pfeiffer or KARPAS-422 tumors

  • Dosierungen

    150 mg/kg/day

  • Verabreichung

    i.p.

Referenzen

  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/23051747/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/25253781/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/25477340/

Kundenproduktvalidierung

<p>(C) Four GCBDLBCL cells lines [1 wild-type (wt), 3 mutated (mut) EZH2] were treated with 500 nmol/l BAY 1238097 or with an EZH2 inhibitor (DZNep and GSK126, both used at the concentration of 500 nmol/l) as single agents and in combination for 72 h. The arrow indicates the EZH2 correct band. Dimethyl sulphoxide (DMSO) alone was added as negative control cells. Membranes were hybridized with antibodies against EZH2, H3K27me3, histone H3 and GAPDH.</p>

, , Br J Haematol, 2017, 178(6):936-948

HeLa cells were transfected with NS (nonspecific) or EZH2-specific siRNA for 48 h with protease inhibitors (10 μM E64 and 10 μM pepstatin-A). Cells were stained with LC3B antibody (green) and DAPI, and observed under confocal microscopy for LC3B puncta. Scale bars: 10 μm

Daten von [ , , Autophagy, 2015, 11(12):2309-22. ]

Concentration-dependent cytotoxic effect of candidate therapeutics. a. KMBC (blue circles) and HuCCT1 (purple squares) cells and b: haploid BAP1 knockout (HAP1 BAP1 KO) (green circles) or parental haploid HAP1 cells (WT) (orange squares) were plated in 384-well plates (1,000 cells/well), and incubated with varying concentrations of the indicated drug. Cell viability was assessed after 72 h using Cell Titer GloR 2.0 assay. Data represents the average percent cell viability plotted against concentration of drug in nM from 4 replicates for each condition. The table indicates the inhibitory concentration at 50% effect (IC50) values for each drug for each of the cell lines

Daten von [ , , Mol Cancer, 2017, 16(1):22 ]

immunostaining (D) show reduced levels of H3K27me3 with increasing levels of GSK126.

Daten von [ , , Mol Cancer Res, 2018, 16(3):417-427 ]

Sellecks GSK126 Wurde zitiert von 181 Publikationen

FAK signaling suppression by OCT4-ITGA6 mediates the effectively removal of residual pluripotent stem cells and enhances application safety [ Theranostics, 2025, 15(14):7127-7153] PubMed: 40585989
Crosstalk between chromatin state and ATM signalling in DNA damage-induced transcription stress [ EMBO J, 2025, 10.1038/s44318-025-00537-7] PubMed: 40859031
Differential regulation of FADS2 by EZH2 reveals a metabolic vulnerability in ovarian cancer treatment [ EBioMedicine, 2025, 119:105879] PubMed: 40818202
Chromatin modification abnormalities by CHD7 and KMT2C loss promote medulloblastoma progression [ Cell Rep, 2025, 44(5):115673] PubMed: 40393452
EZH2 inhibition sensitizes MYC-high medulloblastoma cancers to PARP inhibition by regulating NUPR1-mediated DNA repair [ Oncogene, 2025, 44(6):391-405] PubMed: 39562655
Epigenetic reprogramming via EZH2 inhibition rescues fibroadipose pathogenesis in secondary lymphedema through activating PPARγ signaling [ J Orthop Translat, 2025, 55:309-322] PubMed: 41079990
BRAFV600E maintains the CpG island methylator phenotype, and DNA methylation of PRC2 targets genes in colon cancer [ iScience, 2025, 28(7):112905] PubMed: 40678543
Inhibiting EZH2 complements steroid effects in Duchenne muscular dystrophy [ Sci Adv, 2025, 11(11):eadr4443] PubMed: 40085707
Suppressed macrophage response to quorum-sensing-active Streptococcus pyogenes occurs at the level of the nucleus [ bioRxiv, 2025, 2025.02.07.637189] PubMed: 39975246
Protocol for differentiating cardiomyocytes and generating engineered heart tissues from human feeder-free extended pluripotent stem cells [ STAR Protoc, 2025, 6(1):103576] PubMed: 39893639

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