GW4064

GW 4064 is a full agonist with EC50 values of 80 and 90 nM, respectively, in CV-1 cells transfected with mouse and human FXR expression vectors and an established reporter gene. There is no activity of this compound on other nuclear receptors, including the retinoic acid receptor, at concentrations up to 1 μM. Thus, this chemical is a potent and selective nonsteroidal FXR agonist. [2]

Pharmacokinetic analysis in rats shows that GW 4064 possesses an oral bioavailability of 10% with a t_1/2 = 3.5 h. Fisher rats are dosed with this compound by oral gavage. After 7 days, a dose-dependent lowering of serum triglycerides is observed in the rats receiving this chemical, with an ED50 = 20 mg/kg. [2]

• FXR Transiente Transfektionsstudie

  CV1-Zellen werden in DMEM-Medium mit hohem Glukosegehalt kultiviert. Die CV1-Zellen werden 72 Stunden vor der Transfektion geerntet und in DMEM-F12 Phenolrot-freiem Medium, das 5 % Kohle/Dextran-behandeltes fötales Rinderserum und 2 mM Glutamin enthält, ausplattiert. Am Tag der Transfektion werden die CV1-Zellen in DMEM-F12 Phenolrot-freiem Medium, das 5 % Kohle/Dextran-behandeltes fötales Rinderserum und 2 mM Glutamin enthält, geerntet, gezählt und in eine T-175 cm²-Flasche mit einer Dichte von 14 Millionen Zellen pro Flasche ausgesät, bevor die Transfektionsmischung hinzugefügt wird. Die FuGENE® 6-Transfektionsmischung, die 0,55 μg pFA-CMV-GAL4-human FXR LBD-Expressionsplasmid, 10,92 μg des (UAS)-tk-Luciferase-Reporterplasmids, 20,75 μg pBluescript II KS+ und 3,82 μg eines humanen Steroidrezeptor-Coaktivator-Konstrukts (SRC-1) enthält, wird inkubiert und dann den CV1-Zellen für eine Inkubation über Nacht im Inkubator hinzugefügt. Die transfizierten CV1-Zellen werden in DMEM-F12 Phenolrot-freiem Medium geerntet, das 5 % Kohle/Dextran-behandeltes fötales Rinderserum und 2 mM Glutamin enthält. Transfizierte Zellen werden in einer Konzentration von 3750 Zellen/Well zu 384-Well-Platten, die Liganden enthalten, hinzugefügt. Die Luciferase-Expression wird mit dem Steady-Glo™Luciferase Assay System 24 Stunden nach Inkubation mit dem Liganden gemessen. Diese Verbindung wird als Kontrolle verwendet, und die Daten werden auf diese Verbindung als % Kontrolle normalisiert.

• Zelllinien

  HepG2 cells

• Konzentrationen

  10 µM

• Inkubationszeit

  2 h

• Methode

  Cells were treated with indicated concentration of GW4064 for 2 h.

• Tiermodelle

  Fisher rats

• Dosierungen

  0-100 mg/kg

• Verabreichung

  Orally, b.i.d.