GW4064

GW 4064 ist ein vollständiger Agonist mit EC50-Werten von 80 bzw. 90 nM in CV-1-Zellen, die mit Expressionsvektoren für Maus- und Human-FXR und einem etablierten Reportergen transfiziert wurden. Bei Konzentrationen bis zu 1 μM zeigt diese Verbindung keine Aktivität an anderen nukleären Rezeptoren, einschließlich des Retinsäure-Rezeptors. Somit ist diese Chemikalie ein potenter und selektiver nichtsteroidaler FXR-Agonist. [2]

Die pharmakokinetische Analyse an Ratten zeigt, dass GW 4064 eine orale Bioverfügbarkeit von 10 % mit einer t_1/2 = 3,5 h besitzt. Fischer-Ratten werden mit dieser Verbindung per Magensonde behandelt. Nach 7 Tagen wird eine dosisabhängige Senkung der Serumtriglyceride bei den Ratten beobachtet, die diese Chemikalie erhalten, mit einer ED50 = 20 mg/kg. [2]

• FXR Transiente Transfektionsstudie

  CV1-Zellen werden in DMEM-Medium mit hohem Glukosegehalt kultiviert. Die CV1-Zellen werden 72 Stunden vor der Transfektion geerntet und in DMEM-F12 Phenolrot-freiem Medium, das 5 % Kohle/Dextran-behandeltes fötales Rinderserum und 2 mM Glutamin enthält, ausplattiert. Am Tag der Transfektion werden die CV1-Zellen in DMEM-F12 Phenolrot-freiem Medium, das 5 % Kohle/Dextran-behandeltes fötales Rinderserum und 2 mM Glutamin enthält, geerntet, gezählt und in eine T-175 cm²-Flasche mit einer Dichte von 14 Millionen Zellen pro Flasche ausgesät, bevor die Transfektionsmischung hinzugefügt wird. Die FuGENE® 6-Transfektionsmischung, die 0,55 μg pFA-CMV-GAL4-human FXR LBD-Expressionsplasmid, 10,92 μg des (UAS)-tk-Luciferase-Reporterplasmids, 20,75 μg pBluescript II KS+ und 3,82 μg eines humanen Steroidrezeptor-Coaktivator-Konstrukts (SRC-1) enthält, wird inkubiert und dann den CV1-Zellen für eine Inkubation über Nacht im Inkubator hinzugefügt. Die transfizierten CV1-Zellen werden in DMEM-F12 Phenolrot-freiem Medium geerntet, das 5 % Kohle/Dextran-behandeltes fötales Rinderserum und 2 mM Glutamin enthält. Transfizierte Zellen werden in einer Konzentration von 3750 Zellen/Well zu 384-Well-Platten, die Liganden enthalten, hinzugefügt. Die Luciferase-Expression wird mit dem Steady-Glo™Luciferase Assay System 24 Stunden nach Inkubation mit dem Liganden gemessen. Diese Verbindung wird als Kontrolle verwendet, und die Daten werden auf diese Verbindung als % Kontrolle normalisiert.

• Zelllinien

  HepG2 cells

• Konzentrationen

  10 µM

• Inkubationszeit

  2 h

• Methode

  Cells were treated with indicated concentration of GW4064 for 2 h.

• Tiermodelle

  Fisher rats

• Dosierungen

  0-100 mg/kg

• Verabreichung

  Orally, b.i.d.