H2DCFDA (DCFH-DA)

Katalog-Nr.S9687 Charge:S968702

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Technische Daten

Formel

C₂₄H₁₆Cl₂O₇

Molekulargewicht

487.29

CAS-Nr.

4091-99-0

Löslichkeit (25°C)*

In vitro

DMSO

97 mg/mL (199.06 mM)

Ethanol

15 mg/mL (30.78 mM)

Water

Insoluble

In vivo (Lösungsmittel einzeln und der Reihe nach zum Produkt hinzufügen.)

Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Clear solution	5%DMSO 1 40%PEG300 2 5%Tween80 3 50%ddH2O Validiert von Selleck Labs. Sollten Sie Anpassungen an dieser Formulierung benötigen, wenden Sie sich an unser Vertriebsteam für kundenspezifische Tests.	4.850mg/ml (9.95mM)	Taking the 1 mL working solution as an example, add 50 μL of 97 mg/ml clarified DMSO stock solution to 400 μL of PEG300, mix evenly to clarify it; add 50 μL of Tween80 to the above system, mix evenly to clarify; then continue to add 500 μL of ddH2O to adjust the volume to 1 mL. The mixed solution should be used immediately for optimal results.
Clear solution	5% DMSO 1 95% Corn oil Validiert von Selleck Labs. Sollten Sie Anpassungen an dieser Formulierung benötigen, wenden Sie sich an unser Vertriebsteam für kundenspezifische Tests.	0.800mg/ml (1.64mM)	Taking the 1 mL working solution as an example, add 50 μL of 16 mg/ml clear DMSO stock solution to 950 μL of corn oil and mix evenly. The mixed solution should be used immediately for optimal results.

* <1 mg/ml bedeutet schwer löslich oder unlöslich.
* Bitte beachten Sie, dass Selleck die Löslichkeit aller Verbindungen intern testet und die tatsächliche Löslichkeit geringfügig von veröffentlichten Werten abweichen kann. Dies ist normal und ist auf geringfügige Batch-zu-Batch-Variationen zurückzuführen.
* Versand bei Raumtemperatur (Stabilitätstests zeigen, dass dieses Produkt ohne Kühlmaßnahmen versendet werden kann.)

Vorbereitung von Stammlösungen

Biologische Aktivität

Beschreibung

H2DCFDA (DCFH-DA) ist eine zellgängige Sonde, die zur Detektion der intrazellulären reaktiven Sauerstoffspezies (ROS)-Produktion verwendet wird. Sie wird intrazellulär de-esterifiziert und wandelt sich bei Oxidation in hochfluoreszierendes 2′,7′-Dichlorfluorescein um. Diese Verbindung wird zur empfindlichen und schnellen Quantifizierung von sauerstoffreaktiven Spezies als Reaktion auf oxidativen Metabolismus, für Microplatten-Assays zum Nachweis oxidativer Produkte in phagozytischen Zellen und für quantitative Multiwell-Assays zur myeloischen Differenzierung eingesetzt (Ex/Em=488/525 nm).

Ziele

ROS

In vitro

1. H2DCFDA (DCFH-DA) wird in DMSO gelöst, um 10 mM Stammlösungen zu erhalten und vor Gebrauch weiter verdünnt.
2. Zellen werden 30 Minuten lang bei 37 °C im Dunkeln mit 5 μM dieser Verbindung in PBS inkubiert, dann mit 0,05%iger Trypsin-EDTA-Lösung geerntet, in einem frischen Medium suspendiert und sofort mit einem Durchflusszytometer analysiert.
3. Falls angegeben, verwenden Sie ROS-unempfindliche Modifikationen des Fluorescein-Farbstoffs DCFDA als positive Kontrolle. Das Färbeverfahren ist dasselbe wie für die H2DCFDA.
Emission (Em)=517 Anregung (Ex)=492 517

Protokoll (aus Referenz)

Zell-Assay:^{^[2]}	Zelllinien hCECs Konzentrationen 10 μM Inkubationszeit 30 min Methode Intracellular ROS levels in hCECs are measured by incubating the cells with the redox-sensitive fluorescent dye H2DCFDA (DCFH-DA) (10 μM) at 37℃ for 30 minutes in the dark. The cells are then detached from the culture wells using 0.25% trypsin-EDTA and washed twice using ice-cold PBS. Flow cytometry measurements are performed three times for each treatment. Mean fluorescence intensity is quantified using software. Cells that had been incubated without this compound are used as negative control. The distribution of fluorescent dichlorofluorescein (DCF) on the cell monolayer is visualized and photographed using a fluorescence microscope.

Zell-Assay:^{^[2]}

Zelllinien
hCECs
Konzentrationen
10 μM
Inkubationszeit
30 min
Methode
Intracellular ROS levels in hCECs are measured by incubating the cells with the redox-sensitive fluorescent dye H2DCFDA (DCFH-DA) (10 μM) at 37℃ for 30 minutes in the dark. The cells are then detached from the culture wells using 0.25% trypsin-EDTA and washed twice using ice-cold PBS. Flow cytometry measurements are performed three times for each treatment. Mean fluorescence intensity is quantified using software. Cells that had been incubated without this compound are used as negative control. The distribution of fluorescent dichlorofluorescein (DCF) on the cell monolayer is visualized and photographed using a fluorescence microscope.

Referenzen

https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/26976009/
https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/30372737/
https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/26976009/

Sellecks H2DCFDA (DCFH-DA) Wurde zitiert von 9 Publikationen

S-nitrosothiol homeostasis maintained by ADH5 facilitates STING-dependent host defense against pathogens [ Nat Commun, 2024, 15(1):1750]	PubMed: 38409248
Fusobacterium nucleatum-triggered neutrophil extracellular traps facilitate colorectal carcinoma progression [ J Exp Clin Cancer Res, 2023, 42(1):236]	PubMed: 37684625
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Reactive sulfur species disaggregate the SQSTM1/p62-based aggresome-like induced structures via the HSP70 induction and prevent parthanatos [ J Biol Chem, 2023, 299(6):104710]	PubMed: 37060999
[A Novel Chinese Medicine Formula Inhibits Non-small Cell Lung Cancer by Triggering Oxidative Stress Dependent on Pentose Phosphate Pathway] [ Zhongguo Fei Ai Za Zhi, 2023, 10.3779/j.issn.1009-3419.2023.101.27]	PubMed: 37985150
Elevated neutrophil extracellular traps by HBV-mediated S100A9-TLR4/RAGE-ROS cascade facilitate the growth and metastasis of hepatocellular carcinoma [ Cancer Commun (Lond), 2022, 10.1002/cac2.12388]	PubMed: 36346061
S100A8-Mediated NLRP3 Inflammasome-Dependent Pyroptosis in Macrophages Facilitates Liver Fibrosis Progression [ Cells, 2022, 11(22)3579]	PubMed: 36429008
The potential efficacy and mechanism of bendamustine in entra-nodal NK/T cell lymphoma [ Hematol Oncol, 2022, 10.1002/hon.3007]	PubMed: 35439335

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