Imatinib (STI571)

In-vitro-Assays zur Hemmung einer Reihe von Tyrosin- und Serin/Threonin-Proteinkinasen zeigen, dass Imatinib die v-Abl-Tyrosinkinase und PDGFR potent mit einer IC50 von 0,6 bzw. 0,1 μM hemmt. [1]

Diese Verbindung hemmt die SLF-abhängige Aktivierung der Wildtyp-c-Kit-Kinaseaktivität mit einer IC50 für diese Effekte von ca. 0,1 μM, was der Konzentration entspricht, die zur Hemmung von PDGFR erforderlich ist. [2]

Es zeigt wachstumshemmende Aktivität auf die menschliche Bronchialkarzinoid-Zelllinie NCI-H727 und die menschliche Pankreaskarzinoid-Zelllinie BON-1 mit einer IC50 von 32,4 bzw. 32,8 μM. [3]

Eine aktuelle Studie zeigt, dass diese Chemikalie das Potenzial hat, ihre antileukämischen Wirkungen bei chronischer myeloischer Leukämie durch die Herunterregulierung von hERG1 K(+)-Kanälen zu entfalten, die in Leukämiezellen stark exprimiert werden und von außergewöhnlicher Bedeutung für die Begünstigung der Leukämogenese zu sein scheinen. [4]

Imatinib erzeugt einen unterschiedlichen Antitumor-Effekt bei drei xenograftierten Tumoren, die aus chirurgischen Proben von frischen menschlichen kleinzelligen Lungenkrebsen stammen, mit 80 %, 40 % und 78 % Wachstumshemmung von SCLC6-, SCLC61- und SCLC108-Tumoren bzw. keiner signifikanten Hemmung des SCLC74-Wachstums. [5]

Bei mit fettreicher Diät gefütterten ApoE(-/-)-Mäusen reduziert diese Verbindung die durch fettreiche Diät induzierte Lipidfärbefläche signifikant um 30 %, 27 % und 35 % im Vergleich zu unbehandelten Kontrollen mit fettreicher Diät, wenn sie per Gavage mit 10, 20 und 40 mg/kg dosiert wird, und unterdrückt die Lipidakkumulation in der Halsschlagader. [6]

• PDGF-Rezeptor-Kinaseaktivität

  Der PDGF-Rezeptor wird aus BALB/c 3T3-Zellextrakten mit Kaninchenantiserum gegen den murinen PDGF-Rezeptor für 2 Stunden auf Eis immunpräzipitiert. Protein A-Sepharose-Kügelchen werden verwendet, um die Antigen-Antikörper-Komplexe zu sammeln. Die Immunpräzipitate werden zweimal mit TNET (50 mM Tris, pH 7,5, 140 mM NaCl, 5 mM EDTA, 1% Triton X-100), einmal mit TNE (50 mM Tris, pH 7,5, 140 mM EDTA) und einmal mit Kinasepuffer (20 mM Tris, pH 7,5, 10 mM MgCl₂) gewaschen. Nach Stimulation mit PDGF (50 ng/mL) für 10 Minuten bei 4 °C werden verschiedene Konzentrationen dieser Verbindung zur Reaktionsmischung gegeben. Die PDGF-Rezeptor-Kinaseaktivität wird durch Inkubation mit 10 μCi [7-³³P]-ATP und 1 μM ATP für 10 Minuten bei 4 °C bestimmt. Immunkomplexe werden durch SDS-PAGE auf 7,5%-Gelen getrennt.

• Zelllinien

  BON-1 cells and NCI-H727 cells

• Konzentrationen

  ~100 μM

• Inkubationszeit

  48 hours

• Methode

  BON-1 cells and NCI-H727 cells are seeded into flat-bottomed 96-well plates in triplicate and allowed to adhere overnight in 10% fetal bovine serum-supplemented DMEM or RPMI 1640 complete medium, respectively; the medium is then exchanged for serum-free medium (negative control) or serum-free medium containing serial dilutions of this compound. After 48 hours (control cultures do not reach confluence), the number of metabolically active cells is determined by the 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide assay, and absorbance is measured in a Packard Spectra microplate reader at 540 nm. Growth inhibition is calculated using the following formula: inhibition rate = (1 − a / b) × 100%, where a and b are the absorbance values of the treated and control groups, respectively.