JNK-IN-8

Katalog-Nr.S4901 Charge:S490103

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Technische Daten

Formel

C29H29N7O2
Molekulargewicht 507.59 CAS-Nr. 1410880-22-6
Löslichkeit (25°C)* In vitro DMSO 100 mg/mL (197.0 mM)
Water Insoluble
Ethanol Insoluble
In vivo (Lösungsmittel einzeln und der Reihe nach zum Produkt hinzufügen.)
Homogeneous suspension
CMC-NA
≥5mg/ml Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Clear solution
5%DMSO 40%PEG300 5%Tween80 50%ddH2O

Validiert von Selleck Labs. Sollten Sie Anpassungen an dieser Formulierung benötigen, wenden Sie sich an unser Vertriebsteam für kundenspezifische Tests.

 2.000mg/ml (3.94mM) Taking the 1 mL working solution as an example, add 50 μL of 40 mg/ml clarified DMSO stock solution to 400 μL of PEG300, mix evenly to clarify it; add 50 μL of Tween80 to the above system, mix evenly to clarify; then continue to add 500 μL of ddH2O to adjust the volume to 1 mL. The mixed solution should be used immediately for optimal results. 
* <1 mg/ml bedeutet schwer löslich oder unlöslich.
* Bitte beachten Sie, dass Selleck die Löslichkeit aller Verbindungen intern testet und die tatsächliche Löslichkeit geringfügig von veröffentlichten Werten abweichen kann. Dies ist normal und ist auf geringfügige Batch-zu-Batch-Variationen zurückzuführen.
* Versand bei Raumtemperatur (Stabilitätstests zeigen, dass dieses Produkt ohne Kühlmaßnahmen versendet werden kann.)

Vorbereitung von Stammlösungen

Biologische Aktivität

Beschreibung JNK-IN-8 (JNK Inhibitor XVI) ist der erste irreversible JNK-Inhibitor für JNK1, JNK2 und JNK3 mit einer IC50 von 4,7 nM, 18,7 nM und 1 nM, einer >10-fachen Selektivität gegenüber MNK2, Fms und keiner Hemmung von c-Kit, Met, PDGFRβ in der A375-Zelllinie.
Ziele
JNK3
(A375 cells)		 JNK1
(A375 cells)		 JNK2
(A375 cells)		 Kit (V559D,T670I)
(A375 cells)		 Kit (V559D)
(A375 cells)
1 nM 4.7 nM 18.7 nM 56 nM 92 nM
In vitro

JNK-IN-8 hemmt die c-Jun-Phosphorylierung in HeLa- und A375-Zellen mit einer EC50 von 486 nM bzw. 338 nM. Diese Verbindung zeigt eine dramatische Verbesserung der Selektivität und eliminierte die Bindung an IRAK1, PIK3C3, PIP4K2C und PIP5K3. Es erfordert Cys116 für die JNK2-Hemmung.

Diese Chemikalie (10 mM) unterdrückt die IL-1β-stimulierte Phosphorylierung von c-Jun in IL-1R-Zellen, einem etablierten Substrat der JNKs. Die kovalente Anlagerung an die JNK-Isoformen führte zu einer geringen Verzögerung der elektrophoretischen Mobilität der JNK-Isoformen.

Es wurde entdeckt, dass es die JNK-Kinase durch ein breit angelegtes Kinase-Selektivitätsprofiling einer Bibliothek von Acrylamid-Kinase-Inhibitoren basierend auf der Struktur unter Verwendung des KinomeScan-Ansatzes hemmt. Diese Verbindung besitzt eine ausgeprägte Regiochemie der 1,4-Dianilin- und 1,3-Aminobenzoesäure-Untereinheiten. Es nimmt eine L-förmige Typ-I-Bindungskonformation an, um Cys 154 zu erreichen, das sich zum Rand der ATP-Bindungsstelle hin befindet.

In vivo

JNK-IN-8 ist ein potenter JNK-Inhibitor, der speziell die JNK-Aktivierung hemmt. Er besitzt antifungale Aktivität.
Merkmale JNK-IN-8 und JNK-IN-7 sind strukturell sehr ähnlich, doch während ersteres ein spezifischer kovalenter Inhibitor von JNKs ist.

Protokoll (aus Referenz)

Kinase-Assay:

[1]
  • Bindungskinetik-Assay

    Bindungskinetik-Assay A375-Zellen werden mit 1 μM JNK-IN-8 für die angegebenen Zeiträume vorbehandelt. Das Medium entfernen und dreimal mit PBS waschen. Das Zellpellet mit 1 ml Lysepuffer (1% NP-40, 1% CHAPS, 25 mM Tris, 150 mM NaCl, Phosphatase Inhibitor Cocktail und Protease Inhibitor Cocktail) resuspendieren. 30 min bei 4℃ von Ende zu Ende rotieren. Lysate werden durch Zentrifugation bei 1,4×104 rpm für 15 min im Eppendorf geklärt. Die geklärten Lysate werden mittels 10DG-Säulen in Kinase-Puffer (0,1% NP-40, 20 mM HEPES, 150 mM NaCl, Phosphatase Inhibitor Cocktail, Protease Inhibitor Cocktail) gelfiltert. Die Gesamtproteinkonzentration des gelfilterten Lysats sollte etwa 5–15 mg/ml betragen. Zelllysat wird mit der Sonde von ActivX bei 5 μM für 1 Stunde markiert. Proben werden mit DTT reduziert, und Cysteine werden mit Iodoacetamid blockiert und gelfiltert, um überschüssige Reagenzien zu entfernen und den Puffer auszutauschen. 1 Volumen 2× Binding Buffer (2% Triton-100, 1% NP-40, 2 mM EDTA, 2× PBS) und 50 μL Streptavidin-Bead-Slurry hinzufügen und 2 Stunden von Ende zu Ende rotieren, bei 7.000 rpm für 2 min zentrifugieren. Dreimal mit 1× Binding Buffer und dreimal mit PBS waschen. 30 μL 1× Probenpuffer zu den Beads geben; Proben 10 min bei 95℃ erhitzen. Proben auf einem SDS-PAGE-Gel bei 110V laufen lassen. Nach dem Transfer wird die Membran mit JNK-Antikörper immungeblottet.
Tierstudie:

[4]
  • Tiermodelle

    C57BL/6 mice

  • Dosierungen

    10 mg/kg

  • Verabreichung

    i.p.

Referenzen

  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/22284361/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/22007846/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/23438744/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/28112734/

Kundenproduktvalidierung

<p>SCC-9 cells were pre-treated with JNK inhibitor SP 600125 (1 umol/L) or JNK-IN-8 (1 umol/L) for 1 h, cells were also stimulated with indicated AZD8055 and cultured for 72 h, cell survival was analyzed. Scramble RNAi or JNK1/2 RNAi (JNK RNAi-1 or JNK RNAi-2, see methods) transfected HEK-293 cells were stimulated with AZD8055, cells were further cultured for 72 h before cell survival was tested.</p>

Daten von [ Biochem Biophys Res Commun , 2013 , 440(4), 701-6 ]

The viability of DLBCL cell lines was assessed after 72 h of treatment with the indicated concentrations of the JNK inhibitor JNK-IN-8. Mean + SEM of at least three independent experiments is shown.

Daten von [ , , J Exp Med, 2015, 212(5): 775-92 ]

Striatal slices from 6-OHDA-lesion mice were incubated for 5 min with vehicle, SKF38393 (3 μM), or SKF38393 in the presence of SP600125 (20 μM) or JNK-IN-8 (10 μM). P-cJun and P-ERK 1/2 were determined by Western blotting (25 and 10 μg of protein were loaded, respectively). Note the reduction of SKF38393-induced P-cJun produced by the two JNK inhibitors (top panels). In contrast, SP600125 and JNK-IN-8 did not affect the increase in P-ERK 1/2 produced by SKF38393 (bottom panels). Summary of data were calculated as percentage of control and are represented as mean ± S.E.M. 1 W ANOVA indicated significant effect of the treatment for both P-cJun (F3,16 = 15.22, p < 0.0001, n = 5 slices from 5 mice) and P-ERK 1/2 (F3,16 =18.23, p < 0.0001, n= 5 slices from mice).

Daten von [ , , Neurobiol Dis, 2018, 110:37-46 ]

ICT induces JNK activation, mediating mPTP opening and CRC cell necrosis. JNK expression (p- and regular) in HT-29 or the primary CRC cells stimulated with applied ICT was tested by Western blots (a). HT-29 cells were pre-treated with JNK inhibitors SP600125 (SP), JNK inhibitor IX (JNK-IX), and JNK-IN-8 (JNKi-8) (5 μM each) for 1 h, followed by ICT (25 μM) stimulation, MMP decrease was tested by JC-10 dye assay (b, after 12 h), and cell necrosis was tested by LDH release assay (c, after 72 h).

Daten von [ , , Tumour Biol, 2016, 37(3):3135-44 ]

Sellecks JNK-IN-8 Wurde zitiert von 102 Publikationen

Macropinocytosis maintains CAF subtype identity under metabolic stress in pancreatic cancer [ Cancer Cell, 2025, S1535-6108(25)00271-5] PubMed: 40712568
Oncogenic RAS induces a distinctive form of non-canonical autophagy mediated by the P38-ULK1-PI4KB axis [ Cell Res, 2025, 10.1038/s41422-025-01085-9] PubMed: 40055523
Spike-in enhanced phosphoproteomics uncovers synergistic signaling responses to MEK inhibition in colon cancer cells [ Nat Commun, 2025, 16(1):4884] PubMed: 40419504
SLFN11-mediated ribosome biogenesis impairment induces TP53-independent apoptosis [ Mol Cell, 2025, S1097-2765(25)00042-5] PubMed: 39909041
Inhibiting JNK and PI3K-Akt signaling pathways altered spontaneous network bursts and developmental trajectories of neuronal networks [ J Neural Eng, 2025, 22(5)] PubMed: 40897198
L1CAM signaling through planar cell polarity generates SOX2 + metastatic progenitors in lung adenocarcinoma [ bioRxiv, 2025, 2025.08.22.671773] PubMed: 40894609
[C6TSEDRVAJZ, a combination of small-molecule compounds, induces differentiation of human placental fibroblasts into epithelioid cells in vitro] [ Nan Fang Yi Ke Da Xue Xue Bao, 2025, 45(2):322-330] PubMed: 40031976
The ribotoxic stress response drives UV-mediated cell death [ Cell, 2024, 187(14):3652-3670.e40] PubMed: 38843833
Pharmacogenomic profiling of intra-tumor heterogeneity using a large organoid biobank of liver cancer [ Cancer Cell, 2024, 42(4):535-551.e8] PubMed: 38593780
Reversible covalent c-Jun N-terminal kinase inhibitors targeting a specific cysteine by precision-guided Michael-acceptor warheads [ Nat Commun, 2024, 15(1):8606] PubMed: 39366946

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