CC-5013 (Lenalidomide)

Lenalidomid induziert stark die Produktion von IL-2 und sIL-2R. Diese durch die Verbindung induzierte Tyrosinphosphorylierung von CD28 auf T-Zellen wird von einer nachgeschalteten Aktivierung von NF-κB gefolgt. [2]

Diese Verbindung und Pomalidomid hemmen die Autoubiquitinierung von CRBN in HEK293-T-Zellen, die thalidomidbindungsfähiges Wildtyp-CRBN exprimieren, aber nicht thalidomidbindungsdefektes CRBN(YW/AA). Die Überexpression von CRBN-Wildtyp-Protein, aber nicht von CRBN(YW/AA)-Mutantenprotein, in KMS12-Myelomzellen verstärkt Pomalidomid-vermittelte Reduktionen der c-myc- und IRF4-Expression und Erhöhungen der p21(WAF-1)-Expression. Die Langzeitselektion auf diese Verbindungsresistenz in H929-Myelomzelllinien geht mit einer Reduktion von CRBN einher, während in DF15R-Myelomzellen, die sowohl gegen Pomalidomid als auch gegen diese Chemikalie resistent sind, CRBN-Protein nicht nachweisbar ist. [3]

Diese Chemikalie verhindert die Induktion von Defekten durch Herunterregulierung der Expression von Tumorzell-Inhibitor-Molekülen. Sie verhindert die Induktion von Tumor-induzierter T-Zell-lytischer Synapsendysfunktion. Die Behandlung mit dieser Verbindung blockiert die CLL-Zell-induzierte T-Zell-Aktin-Synapsendysfunktion, imitiert die Antikörperblockade und reguliert die Expression von CLL-inhibitorischen Liganden und deren Rezeptoren auf T-Zellen herunter. Diese Behandlung verhindert die Tumor-induzierte Immunsuppression bei FL, DLBCL, HL, MM, SCC und OC und reguliert die immunsuppressive Ligandenexpression auf allen untersuchten Tumorzellen herunter. Die CTL-Abtötungsfunktion nimmt nach Antikörperblockade von CLL-inhibitorischen Liganden oder dieser chemischen Behandlung im Vergleich zu Kontrollbehandlungen signifikant zu. Die Behandlung von autologen CLL-T-Zell-Kokulturen mit diesem Agens kehrt die beeinträchtigte CD8⁺ T-Zell-lytische Synapsenbildung und Granzym B-Trafficking um. [4]

Die Induktion der Angiogenese durch bFGF wird durch die orale Behandlung mit Lenalidomid dosisabhängig signifikant gehemmt. Diese Verbindung verringert den Prozentsatz der vaskularisierten Fläche signifikant von 5,16 % (Kontrollgruppe) auf 2,58 % (50 mg/kg). Sie reduziert die berechnete Gesamt-MVL signifikant von 21,07 (Kontrolle) auf 8,11 (50 mg/kg). Diese Chemikalie hemmt die HUVEC-Migration durch die Fibronectin-beschichteten Membranen in Richtung von 0,1 ng/mL bFGF bei 100 μM, 1 ng/mL VEGF bei Konzentrationen von 10 μM und 100 μM signifikant. [5]

• Assay zur Hemmung der TNF-Synthese durch menschliche PBMCs

  Menschliche PBMCs von normalen Spendern werden durch Ficoll-Hypaque-Dichtezentrifugation gewonnen. Zellen (10⁶ Zellen/mL) werden in RPMI kultiviert, ergänzt mit 10 % AB+-Serum, 2 mM L-Glutamin, 100 U/mL Penicillin und 100 μg/mL Streptomycin. Lenalidomid wird in DMSO zu 20 mg/mL gelöst; weitere Verdünnungen erfolgen mit Kulturmedium. Die endgültige DMSO-Konzentration in allen Assays, einschließlich der Kontrollen, beträgt 0,25 %. Diese Verbindung wird den Zellen 1 Stunde vor der Zugabe von LPS zugesetzt. PBMCs (10⁶ Zellen/mL) werden mit 1 μg/mL LPS von Salmonella minnesota R595 stimuliert. Zellen werden in dreifacher Ausfertigung 18–20 Stunden bei 37 °C in 5 % CO₂ mit LPS inkubiert. Die Überstände werden dann geerntet und auf Zytokinspiegel getestet. In einigen Experimenten werden die Überstände bis zur Verwendung bei –70 °C eingefroren. Die Zellviabilität wird mittels Trypanblau-Ausschlussfärbemethode bestimmt. Die Konzentration von TNFα in den Kulturüberständen wird mittels ELISA bestimmt. Diese Chemikalie wird in mindestens drei separaten Experimenten getestet. Die prozentuale Hemmung wird als 100 × [1 – (Zytokin (experimentell)/Zytokin (Kontrolle))] bestimmt.

• Tiermodelle

  Adult male Sprague-Dawley rats bearing HUVECs cells

• Dosierungen

  50 mg/kg and 250 mg/kg

• Verabreichung

  Administered via i.p.