Prexasertib (LY2606368) Dihydrochloride

In nichtklinischen Studien induzierte Prexasertib HCl (LY2606368) DNA-Schäden, gemessen an der Replikationskatastrophe und dem Anstieg von pH2A.X, einem Marker für doppelsträngige DNA-Brüche[1]. Die Behandlung von Zellen mit dieser Verbindung führt zu einem schnellen Auftreten von TUNEL- und pH2AX-positiven doppelsträngigen DNA-Brüchen in der S-Phase der Zellpopulation. In einem funktionellen Assay hob es den durch Doxorubicin aktivierten G2-M-Checkpoint in p53-defizienten HeLa-Zellen mit einer EC50 von 9 nmol/L stark auf. Es war breit antiproliferativ mit IC50-Werten, die in den empfindlichsten Zelllinien typischerweise <50 nmol/L betrugen, wobei eine Minderheit der Zelllinien eine beträchtliche Resistenz mit IC50-Werten >1.000 nmol/L zeigte. Diese Verbindung benötigt CDC25A und CDK2, um DNA-Schäden zu verursachen[2].

Prexasertib HCl (LY2606368) hemmte das Tumorwachstum in Krebs-Xenografts als Monotherapie und in Kombination mit anderen Wirkstoffen[1]. In einem orthotopen SKOV3-Ovarialkarzinommodell zeigte es eine Hemmung des Wachstums primärer Tumoren und eine signifikante Reduzierung der Inzidenz von Metastasen und Aszitesakkumulation. Diese Verbindung zeigte auch Wirksamkeit in einem orthotopen Pankreaskrebsmodell SW1990, was zu einer 92%igen Hemmung des primären Tumorwachstums und der Eliminierung von Metastasen in Lymphknoten, Milz und Darm führte[3].

• Zelllinien

  HeLa cells

• Konzentrationen

  33 or 100 nmol/L

• Inkubationszeit

  12 h

• Methode

  HeLa cells were plated onto T25 flasks and allowed to recover for 24 hours. Prexasertib HCl (LY2606368) was then added to give final concentrations of 33 or 100 nmol/L. In some experiments, 20μmol/L Z-VAD-FMK was included during the drug treatment. Cells were treated for 12 hours, and during the last 2 hours, Colchisol was added to 1 μg/mL. Fixation of nuclei for metaphase spreads was done following the method of Bayani and Squire. Chromosome spreads were done. A 12-μL volume of cell suspension in 3:1 methanol/acetic acid fixative was dropped from a height of 3 cm onto dry glass slides or coverslips. The slides were then heated for 45 seconds on a 43°C metal block, before being removed to allow drying to complete at room temperature. Coverslips were mounted on slides with Vectashield Hard Set mounting medium with DAPI. Slides were examined with a Leica DMR fluorescence microscope and images were captured using a SPOT RT3 Slider camera.

• Tiermodelle

  Female CD-1 nu-/nu- mice

• Dosierungen

  15 mg/kg

• Verabreichung

  s.c.