MG132

MG-132 zeigt eine >1000-fach höhere Aktivität als ZLLal bei der Hemmung der ZLLL-MCA-abbauenden Aktivität des 20S proteasome mit einer IC50 von 100 nM gegenüber 110 μM. Diese Verbindung hemmt auch Calpain mit einer IC50 von 1,2 μM. Diese Chemikalie induziert Neuritenwachstum in PC12-Zellen bei einer optimalen Konzentration von 20 nM und zeigt eine 500-fach höhere Wirksamkeit als ZLLal. [1] Diese Verbindung (10 μM) hemmt potent die TNF-α-induzierte NF-κB-Aktivierung, die Interleukin-8 (IL-8)-Gengtranskription und die IL-8-Proteinfreisetzung in A549-Zellen durch Hemmung des proteasome-vermittelten IκBα-Abbaus. [2] Diese chemische Behandlung induziert potent eine p53-abhängige Apoptose in KIM-2-Zellen durch 26S proteasome-Hemmung. [3] Im Gegensatz zu BzLLLCOCHO oder PS-341 führt die Behandlung mit dieser Verbindung zu einer schwachen Hemmung der Chymotrypsin-ähnlichen (CT-L) und Peptidylglutamyl-Peptid-hydrolysierenden (PGPH)-Aktivitäten des 26S proteasome, während multiple Myelomzellen (U266 und OPM-2) empfindlicher auf die Induktion der Apoptose durch diese Chemikalie reagieren als auf BzLLLCOCHO. [4] Diese Verbindung (1 μM) sensibilisiert TRAIL-resistente Prostatakrebszellen durch Aktivierung der AP-1-Familienmitglieder c-Fos und c-Jun, die wiederum das antiapoptotische Molekül c-FLIP(L) unterdrücken. [5] Diese Chemikalie verstärkt signifikant die Fähigkeit von Inositolhexakisphosphat (IP6), die zelluläre Stoffwechselaktivität in PC3- und DU145-Androgen-unabhängigen Prostatakrebs (AIPCa)-Zelllinien zu reduzieren. [6]

Die Verabreichung von MG-132 rettet effektiv die Expressionslevel und die Plasmamembranlokalisation von Dystrophin, β-Dystroglykan, α-bdystroglykan und α-Sarcoglykan in Skelettmuskelfasern von mdx-Mäusen, reduziert Muskelfaserschäden und lindert die histopathologischen Anzeichen der Muskeldystrophie. [7] Die Behandlung mit dieser Verbindung reduziert signifikant die immobilisationsinduzierte Skelettmuskelatrophie bei Mäusen, indem sie die muskelspezifischen Ubiquitinligasen Atrogin-1/MAFbx und MuRF-1 mRNA herunterreguliert. [8]

• Messung der hemmenden Aktivitäten von MG-132 gegen 20S proteasome

  Die Reaktionsmischung für den 20S proteasome-Hemmtest enthält 0,1 M Tris-Acetat, pH 7,0, 20S proteasome, MG-132 und 25 μM Substrat, gelöst in Dimethylsulfoxid, in einem Endvolumen von 1 mL. Nach Inkubation bei 37 °C für 15 Minuten wird die Reaktion durch Zugabe von 0,1 mL 10% SDS und 0,9 mL 0,1 M Tris-Acetat, pH 9,0, gestoppt. Die Fluoreszenz der Reaktionsprodukte wird gemessen. Um die IC50 gegen 20S proteasome zu bestimmen, werden verschiedene Konzentrationen dieser Verbindung in die Testmischung gegeben.

• Zelllinien

  KIM-2, HC11, and ES

• Konzentrationen

  Dissolved in DMSO, final concentrations ~25 μM

• Inkubationszeit

  24 and 48 hours

• Methode

  Cells are exposed to various concentrations of MG-132 for 24, and 48 hours. Supernatant and monolayer cells are harvested by centrifugation and fixed in 70% ethanol in PBS for staining with acridine orange. Equal volumes of cells and acridine orange (5 mg/mL in PBS) are mixed on a microscope slide and examined by fluorescence microscopy. For annexin V analysis, cells are harvested by centrifugation and stained with annexin V and propidium iodide. For cell cycle analysis, cells are rehydrated in PBS at room temperature for 10 minutes, followed by staining with propidium iodide (5 mg/mL). All samples are analyzed using a Coulter Epics XL flow cytometer.

• Tiermodelle

  Male mdx (C57BL/10ScSn DMD mdx) mice

• Dosierungen

  ~10 μg/kg/day

• Verabreichung

  Injection