MHY1485

Katalog-Nr.S7811 Charge:S781101

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Technische Daten

Formel

C₁₇H₂₁N₇O₄

Molekulargewicht

387.39

CAS-Nr.

326914-06-1

Löslichkeit (25°C)*

In vitro

DMSO (mit 50 °C warmem Wasserbad erwärmt)

10 mg/mL (25.81 mM)

Water

Insoluble

Ethanol

Insoluble

In vivo (Lösungsmittel einzeln und der Reihe nach zum Produkt hinzufügen.)

Homogeneous suspension

CMC-NA

≥5mg/ml

Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.

* <1 mg/ml bedeutet schwer löslich oder unlöslich.
* Bitte beachten Sie, dass Selleck die Löslichkeit aller Verbindungen intern testet und die tatsächliche Löslichkeit geringfügig von veröffentlichten Werten abweichen kann. Dies ist normal und ist auf geringfügige Batch-zu-Batch-Variationen zurückzuführen.
* Versand bei Raumtemperatur (Stabilitätstests zeigen, dass dieses Produkt ohne Kühlmaßnahmen versendet werden kann.)

Vorbereitung von Stammlösungen

Biologische Aktivität

Beschreibung

MHY1485 ist ein potenter und zellgängiger mTOR-Aktivator, und diese Verbindung hemmt auch potent die Autophagy.

Ziele

mTOR

In vitro

MHY1485 unterdrückt den basalen autophagischen Fluss. Diese Verbindung führt zu einer Akkumulation von LC3II und einer Vergrößerung der Autophagosomen in dosis- und zeitabhängiger Weise.

Es erhöht die Phospho-mTOR-Spiegel und die Phosphorylierung der nachgeschalteten S6K1- und rpS6-Proteine, ohne den gesamten mTOR-Gehalt, die gesamten S6K1- und rpS6-Spiegel zu beeinflussen. Eine kurzfristige Behandlung von Ovarien mit dieser Chemikalie, gefolgt von einer Allotransplantation, förderte das Wachstum sekundärer Follikel. Die Behandlung damit und die anschließende Transplantation ermöglichten die Gewinnung reifer Eizellen und gesunder Nachkommen.

In vivo

MHY1485 ist ein potenter und zellgängiger mTORC1-Agonist.

Protokoll (aus Referenz)

Kinase-Assay:^{^[1]}	Aktivierung von mTOR Die Western-Blot-Analyse wird durchgeführt, um die Veränderung des gesamten Proteingehalts und der Spiegel der phosphorylierten Formen von mTOR und 4E-BP1, die die Aktivität von mTOR widerspiegeln, zu erfassen. Ac2F-Zellen werden 1 Stunde lang mit MHY1485 in verschiedenen Konzentrationen und Rapamycin 5 mM als Positivkontrolle behandelt. Die Zellen werden mit kaltem PBS gewaschen und geerntet. Zelllysate werden unter Verwendung von RIPA-Puffer hergestellt. Die Proteinkonzentration wird mittels der Bicinchoninsäure-Methode (BCA) bestimmt. Gleiche Proteinmengen werden auf 10-12%igen Natriumdodecylsulfat-Polyacrylamidgel-Elektrophorese (SDS-PAGE)-Gelen getrennt. Die Gele werden anschließend durch Elektroblotting für 2 Stunden bei 60-75 V auf eine Polyvinylidendifluoridmembran übertragen. Die Membranen werden in einer 5%igen Magermilchlösung in Tris-gepufferter Salzlösung (TBS) mit 0,5% Tween-20 blockiert und mit primären Antikörpern inkubiert. Vorgefärbte Proteinmarker werden zur Bestimmung des Molekulargewichts verwendet.
Zell-Assay:^{^[3]}	Zelllinien TU177 cells Konzentrationen 10 µM Inkubationszeit 24 h Methode Cells were treated with indicated concentration of this compound for 24 h.

Kinase-Assay:^{^[1]}

Aktivierung von mTOR
Die Western-Blot-Analyse wird durchgeführt, um die Veränderung des gesamten Proteingehalts und der Spiegel der phosphorylierten Formen von mTOR und 4E-BP1, die die Aktivität von mTOR widerspiegeln, zu erfassen. Ac2F-Zellen werden 1 Stunde lang mit MHY1485 in verschiedenen Konzentrationen und Rapamycin 5 mM als Positivkontrolle behandelt. Die Zellen werden mit kaltem PBS gewaschen und geerntet. Zelllysate werden unter Verwendung von RIPA-Puffer hergestellt. Die Proteinkonzentration wird mittels der Bicinchoninsäure-Methode (BCA) bestimmt. Gleiche Proteinmengen werden auf 10-12%igen Natriumdodecylsulfat-Polyacrylamidgel-Elektrophorese (SDS-PAGE)-Gelen getrennt. Die Gele werden anschließend durch Elektroblotting für 2 Stunden bei 60-75 V auf eine Polyvinylidendifluoridmembran übertragen. Die Membranen werden in einer 5%igen Magermilchlösung in Tris-gepufferter Salzlösung (TBS) mit 0,5% Tween-20 blockiert und mit primären Antikörpern inkubiert. Vorgefärbte Proteinmarker werden zur Bestimmung des Molekulargewichts verwendet.

Zell-Assay:^{^[3]}

Zelllinien
TU177 cells
Konzentrationen
10 µM
Inkubationszeit
24 h
Methode
Cells were treated with indicated concentration of this compound for 24 h.

Referenzen

https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/22927967/
https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/25710488/
https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/36438491/

https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/34580888/

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Kundenproduktvalidierung

: Daten von [ , , FASEB J, 2018, 32(1):512-528 ]

: Daten von [ , , Int J Biol Sci, 2017, 13(11):1398-1408 ]

: Daten von [ , , Biochem J, 2017, 474(16):2733-2747 ]

: Daten von [ , , Oncol Rep, 2018, 40(1):425-433 ]

Sellecks MHY1485 Wurde zitiert von 98 Publikationen

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Targeted knockdown of PGAM5 in synovial macrophages efficiently alleviates osteoarthritis [ Bone Res, 2024, 12(1):15]	PubMed: 38433252
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