Mocetinostat (MGCD0103)

Mocetinostat (MGCD0103) hemmt nur eine Untergruppe der neun humanen rekombinanten HDACs, einschließlich HDAC1, HDAC2, HDAC3 und HDAC11, in nanomolaren oder niedrigen mikromolaren Konzentrationen und auf dosisabhängige Weise. Es zeigt in vitro die potenteste hemmende Aktivität gegen humane HDAC1- und HDAC2-Enzyme und hemmt keine Klasse-II-HDACs. Die exozyklische Aminogruppe in dieser Verbindung ist für die Enzym-hemmende Aktivität notwendig, da die HDAC-hemmende Aktivität gegen HDAC1 und HDAC2 mit dem Desamino-Analogon vollständig aufgehoben wird. Seine hemmende Aktivität erreicht bei 6 μM ein maximales Plateau, und der maximale hemmbare Enzympool, der von MGCD0103 beeinflusst wird, beträgt 75 % der gesamten Enzymaktivität in HCT116-Zellen, während NVP-LAQ824 fast 100 % davon in diesen Zellen hemmt. In A549-Zellen zeigt es auch eine dosisabhängige Hemmung der HDAC-Aktivität in ganzen Zellen. [1]

Mocetinostat (MGCD0103) hemmt signifikant das Wachstum menschlicher Tumor-Xenografts in Nacktmäusen, und die Antitumoraktivität korrelierte mit der Induktion der Histonacetylierung in Tumoren. Die p.o.-Verabreichung dieser Verbindung (2HBr-Salz) verringert signifikant das Wachstum von implantierten fortgeschrittenen A549-Tumoren in Nacktmäusen dosisabhängig nach 13-tägiger täglicher Verabreichung. Es (170 mg/kg für 2HBr-Salz, entsprechend 120 mg/kg freie Base) blockiert signifikant das Wachstum von Tumoren im Vergleich zur alleinigen Fahrzeugbehandlung ohne Veränderung des Körpergewichts. Darüber hinaus reduziert es nicht die WBC-Zahlen und wird gut vertragen. Die Verbindung ist auch oral aktiv in vielen anderen humanen Tumor-Xenograft-Modellen, einschließlich NSCLC H1437. Bei 80 mg/kg (freie Base) blockiert es fast vollständig das Wachstum von H1437-Tumoren nach 13-tägiger täglicher p.o.-Verabreichung ohne Reduzierung des Körpergewichts bei Tieren. [1] Es reduziert den pulmonalen arteriellen Druck dramatischer. Darüber hinaus verbessert diese Verbindung die pulmonale Arterienbeschleunigungszeit und reduziert die systolische Einkerbung der pulmonalen Arterienflusskurve, was auf einen positiven Einfluss des HDAC inhibitor auf die pulmonale Gefäßumgestaltung und -versteifung hindeutet. [2]

• HDAC Enzymtest in vitro

  Der Deacetylase-Enzymtest basiert auf einem homogenen Fluoreszenz-Freisetzungs-Assay. Gereinigte rekombinante HDAC-Enzyme werden mit Mocetinostat (MGCD0103), verdünnt in verschiedenen Konzentrationen, für 10 Minuten in Assay-Puffer [25 mM HEPES (pH 8,0), 137 mM NaCl, 1 mM MgCl₂, 2,7 mM KCl] bei Raumtemperatur inkubiert. Das Substrat Boc-Lys(ε-Ac)-AMC wird zur Reaktion gegeben und für weitere Inkubation bei 37 °C inkubiert. Die Konzentration des Substrats und die Inkubationszeit variieren für verschiedene Isotypen von HDAC-Enzymen. Eine 20-minütige Trypsininkubation bei Raumtemperatur ermöglicht die Freisetzung des Fluorophors aus dem deacetylierten Substrat. Das Fluoreszenzsignal wird mit einem Fluorometer bei einer Anregung von 360 nm, einer Emission von 470 nm und einem Cutoff bei 435 nm detektiert.

• Zelllinien

  Human mammary epithelial cells (HMEC), human foreskin fibroblasts (MRHF) cells

• Konzentrationen

  0-60 μM

• Inkubationszeit

  72 hours

• Methode

  Human mammary epithelial cells (HMEC) and human foreskin fibroblasts (MRHF) cells in 96-well plates are incubated with Mocetinostat (MGCD0103) at various concentrations for 72 hours at 37 °C in 5% CO₂. MTT is added at a final concentration of 0.5 mg/ml and incubated with the cells for 4 hours before an equal volume of solubilization buffer is added. After overnight incubation, solubilized dye is quantified by reading at 570 nm using a reference at 630 nm. Absorbance values are converted to cell numbers according to a standard growth curve of the relevant cell line. The concentration which reduces cell numbers to 50% relative to DMSO-treated cells is determined as MTT IC5

• Tiermodelle

  Female CD-1 nude mice bearing H1437 tumors

• Dosierungen

  80 mg/kg

• Verabreichung

  Administered via p.o.