Monastrol

Monastrol hemmt weder den Fortschritt durch die S- und G2-Phasen des Zellzyklus noch die Zentrosomenverdopplung. Der durch diese Verbindung verursachte mitotische Arrest ist ebenfalls schnell reversibel. Es hemmt auch die Bildung bipolarer Spindeln in Xenopus-Eiextrakten. Diese Chemikalie arretiert Zellen in der Mitose mit monoastralen Spindeln, die aus einer radialen Anordnung von Mikrotubuli bestehen, umgeben von einem Chromosomenring, während sie Mikrotubuli in Interphasezellen oder die Mikrotubulipolymerisation in vitro nicht beeinflusst[1]. Die Exposition kultivierter sympathischer Neuronen gegenüber dieser Verbindung für einige Stunden erhöht sowohl die Anzahl als auch die Wachstumsrate der Axone. Mit zusätzlicher Zeit sind die Gesamtlängen der Axone nicht von Kontrollen zu unterscheiden. Sensorische Neuronen zeigen einen ähnlichen kurzfristigen Anstieg der axonalen Wachstumsrate. Eine längere Exposition führt jedoch zu kürzeren Axonen, was darauf hindeutet, dass sensorische Neuronen empfindlicher auf toxische Wirkungen des Medikaments reagieren könnten. Dennoch ist die allgemeine Gesundheit der Kulturen immer noch weitaus robuster als Kulturen, die mit Taxol behandelt wurden, einem Medikament, das häufig zur Krebsbekämpfung eingesetzt wird[2]. In HeLa-Zellen aktiviert diese Verbindung den Spindel-Checkpoint, was zu mitotischem Arrest und Apoptose führt[3].

• Zelllinien

  BS-C-1 (monkey epithelial kidney) cells

• Konzentrationen

  100 μM

• Inkubationszeit

  4 h

• Methode

  For the double thymidine arrest, exponentially growing BS-C-1 cells are cultured for 16 h in normal growth medium containing 2 mM thymidine. After this, the cells are released into normal growth medium supplemented with 24 μM deoxycytidine for 9 h. The second thymidine block is imposed for 16 h during which the cells were maintained in serum-free medium containing 2 mM thymidine. Finally, the cells are released into normal growth medium containing 24 μM deoxycytidine to which is added either 100 μM monastrol or 0.1% DMSO. To assess the reversibility of the effect of this compound and nocodazole treatment, BS-C-1 cells plated on coverslips are treated for 4 h in normal growth medium containing either 2 μM nocodazole or 100 μM this chemical and then released into normal medium. At the different time points, coverslips are processed for immunofluorescence and the cells in interphase or mitosis are counted and categorized.