Nutlin-3a

Katalog-Nr.S8059 Charge:S805902

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Technische Daten

Formel

C30H30Cl2N4O4
Molekulargewicht 581.49 CAS-Nr. 675576-98-4
Löslichkeit (25°C)* In vitro DMSO 100 mg/mL (171.97 mM)
Ethanol 100 mg/mL (171.97 mM)
Water Insoluble
In vivo (Lösungsmittel einzeln und der Reihe nach zum Produkt hinzufügen.)
Homogeneous suspension
CMC-NA
≥5mg/ml Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
* <1 mg/ml bedeutet schwer löslich oder unlöslich.
* Bitte beachten Sie, dass Selleck die Löslichkeit aller Verbindungen intern testet und die tatsächliche Löslichkeit geringfügig von veröffentlichten Werten abweichen kann. Dies ist normal und ist auf geringfügige Batch-zu-Batch-Variationen zurückzuführen.
* Versand bei Raumtemperatur (Stabilitätstests zeigen, dass dieses Produkt ohne Kühlmaßnahmen versendet werden kann.)

Vorbereitung von Stammlösungen

Biologische Aktivität

Beschreibung Nutlin-3a ((-)-Nutlin-3), das aktive Enantiomer von Nutlin-3, hemmt die p53/MDM2-Interaktion mit einer IC50 von 90 nM in einem zellfreien Assay. Nutlin-3a induziert Autophagy und Apoptosis auf eine p53-abhängige Weise.
Ziele
p53-MDM2 interaction
(Cell-free assay)
90 nM
In vitro Nutlin-3a verdrängt p53 aus der Bindungstasche von MDM2 und setzt dadurch p53 von Hemmung und proteasomalem Abbau frei, was zur Induktion seiner nachgeschalteten Ziele, Zellzyklusarrest und Apoptosis führt. Sieben Tage Inkubation mit 10 μM dieser Verbindung führten zu >90% Hemmung des Wachstums von NIH3T3-Zellen. Diese Verbindung stabilisiert und aktiviert p53 und induziert die p21-Expression dosisabhängig. Sie reduziert effektiv das S-Phasen-Kompartiment auf 0,2-2% und erhöht die G1- und G2/M-Phasen-Kompartimente. Diese Chemikalie induziert Apoptosis bei ~60% der SJSA-1- und MHM Zellen nach 40 h, was nach 60 h weiter anstieg (85% bzw. 65%) .
In vivo Nutlin-3a unterdrückt das Xenograft-Wachstum dosisabhängig, wobei die höchste Dosis (200 mg/kg) eine erhebliche Tumorschrumpfung zeigte . Diese Verbindung ist ein selektiver Aktivator des p53-Signalwegs in vivo und hochwirksam gegen SJSA-1-Osteosarkom-Tumoren. Tumoren mit Wildtyp-p53 und MDM2-Genamplifikation sprechen am besten auf eine Therapie mit dieser Chemikalie an.
Merkmale Hochselektiver MDM2-Inhibitor mit einem viel geringeren Effekt auf MDMX. Am wirksamsten bei Tumoren mit Wildtyp-p53.

Protokoll (aus Referenz)

Kinase-Assay:[3]
  • Biacore-Studien

    Kompetitionsassays werden auf einem Biacore S51 durchgeführt. Ein Sensorchip CM5 der Serie S wird für die Immobilisierung eines PentaHis-Antikörpers zur Erfassung des His-markierten p53 derivatisiert. Der Erfassungsgrad beträgt ~200 Response Units (1 Response Unit entspricht 1 pg Protein pro mm2). Die Konzentration des MDM2-Proteins wird konstant bei 300 nM gehalten. Testsubstanzen werden in DMSO bei 10 mM gelöst und weiter verdünnt, um eine Konzentrationsreihe des Inhibitors in jeder MDM2-Testprobe herzustellen. Die Assays werden bei 25 °C in Laufpuffer (10 mM Hepes, 0,15 M NaCl, 2% DMSO) durchgeführt. Die MDM2-p53-Bindung in Anwesenheit dieser Verbindung wird als Prozentsatz der Bindung in Abwesenheit dieser Verbindung berechnet, und die IC50 wird mit Microsoft Excel berechnet.
Zell-Assay:[2]
  • Zelllinien

    OSA, T778, RMS13, U2OS, SaOS-2

  • Konzentrationen

    ~5 μM

  • Inkubationszeit

    120 h

  • Methode

    SRB
Tierstudie:[1]
  • Tiermodelle

    SJSA-1 xenograft

  • Dosierungen

    50, 100, 200 mg/kg twice daily

  • Verabreichung

    oral

Referenzen

  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/16443686/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/21624110/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/14704432/

Kundenproduktvalidierung

<p>Nutlin-3a preserved p53 expression without influencing high glucose (HG)-induced podocyte impairment. A-D: cultured podocytes were pre-treated by nutlin-3a for 2 hrs before subjected to HG treatment. Western blotting gel documents (A) and summarized data (B) showing the expression of p53 and MDM2 in podocytes under HG exposure for 24 hrs. n = 4. Western blotting gel documents (C) and summarized data (D) showing the expression of Desmin in podocytes under HG exposure for 24 hrs. n = 3. *P < 0.05 vs. Ctrl, #P < 0.05 vs. Vehl + HG. Ctrl: control; Vehl: vehicle; nutlin-3a: nutlin-3a treatment.</p>

, , J Cell Mol Med, 2017, 21(12):3435-3444

Twenty-four hours after plating 1×105 Shh-EGFP cells, media was changed to serum-free media containing vehicle, 8µM Nutlin-3a, and/or Shh (3µg/mL). Cells were also transduced with lentivirus containing pLKO.1 empty vector or LentiORF-YFP-WIP1. 48 hours later, cells were fixed in 4% paraformaldehyde, permeabilized, incubated with α-WIP1 or α-Ki-67 antibody, and mounted using media containing DAPI. Scale bar, 100µm.

Daten von [ , , Oncogene, 2016, 35(42):5552-5564 ]

(a) Westernblot analysis of the whole cell lysate from WT-MTEC, KO-MTEC and 1601 treated with or without Nutlin-3a (15 μM for MTEC) with antibodies as indicated.

Daten von [ , , Int J Cancer. 2019, 144(4):777-787 ]

Protein expression of p53, TAZ and CYP24A1 were detected by western blot after treatment with Nutlin 3a in CCLP-1.

Daten von [ , , Cancer Lett, 2016, 381(2):370-9 ]

Sellecks Nutlin-3a Wurde zitiert von 116 Publikationen

A cancer persistent DNA repair circuit driven by MDM2, MDM4 (MDMX), and mutant p53 for recruitment of MDC1 and 53BP1 on chromatin [ Nucleic Acids Res, 2025, 53(13)gkaf627] PubMed: 40626562
Combined MEK and PARP inhibition enhances radiation response in rectal cancer [ Cell Rep Med, 2025, 6(8):102284] PubMed: 40782795
Chaperone-mediated autophagy directs a dual mechanism to balance premature senescence and senolysis to prevent intervertebral disc degeneration [ Bone Res, 2025, 13(1):62] PubMed: 40506462
WIP1 mutations suppress DNA damage triggered bypass of the mitotic timer [ EMBO J, 2025, 10.1038/s44318-025-00495-0] PubMed: 40551011
Advanced organoid models for targeting Kras-driven lung adenocarcinoma in drug discovery and combination therapy [ J Exp Clin Cancer Res, 2025, 44(1):128] PubMed: 40275403
The Prolonged Half-Life of the p53 Missense Variant R248Q Promotes Accumulation and Heterotetramer Formation with Wildtype p53 to Exert the Dominant-Negative Effect [ Cancer Res, 2025, 10.1158/0008-5472.CAN-24-1136] PubMed: 40163352
HOXC10 Protects from Skin Aging by Targeting the FZD6/Wnt/β-Catenin Signaling Pathway [ Research (Wash D C), 2025, 8:0976] PubMed: 41268215
Identification of CNOT1-CCR4-NOT as a suppressor of 53BP1-p53-p21 signaling [ Cell Rep, 2025, 44(8):116090] PubMed: 40742806
The puzzling regulation of the interferon signaling system by the p53 tumor suppressor protein [ Cell Mol Life Sci, 2025, 82(1):233] PubMed: 40512405
Reduction of lymphotoxin beta receptor induces cellular senescence via the MDMX-p53 pathway [ Cell Death Discov, 2025, 11(1):416] PubMed: 40883295

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