Obinutuzumab (anti-CD20)

Katalog-Nr.A2023 Batch: A202301

Technische Daten

CAS-Nr.	949142-50-1
Formel	PBS buffer, pH 7.2
Isotyp	Human IgG1 isotype control
Quelle	Humanized (from mouse)
Lagerung (Ab dem Datum des Erhalts)	Store the undiluted solution at 4°C in the dark to avoid freeze-thaw cycles
Reinheit	99.65%
Proteinkonzentration:	5 mg/ml
Endotoxinspiegel	≤1 EU/mg

Biologische Aktivität

Beschreibung	Obinutuzumab (anti-CD20) (Gazyva, GA101, Gazyvaro, Afutuzumab) ist ein neuartiger, glykoengineerter, humanisierter monoklonaler Antikörper vom Typ II gegen CD20, der zur Behandlung von lymphatischer Leukämie und Lymphomen B-Zell-Ursprungs entwickelt wurde. MW: 146,1 kD.
In vitro	GA101 ist der erste Fc-enginierte, humanisierte IgG1-Antikörper vom Typ II gegen CD20. Im Vergleich zu Rituximab weist GA101 eine erhöhte direkte und Immuneffektorzell-vermittelte Zytotoxizität auf und zeigt eine überlegene Aktivität in zellulären Assays und B-Zell-Depletionsassays mit Vollblut.
In vivo	In humanen Lymphom-Xenotransplantatmodellen zeigt GA101 eine überlegene Antitumoraktivität, die zur Induktion einer vollständigen Tumorremission und einer erhöhten Gesamtüberlebensrate führt. Bei nicht-humanen Primaten zeigt GA101 eine überlegene B-Zell-depletierende Aktivität in lymphatischem Gewebe, einschließlich Lymphknoten und Milz.

Protokoll (nur als Referenz)

Zell-Assay:	Ziel: Annexin V/PI FACS Assay Zellen: NHL-Zelllinien Konzentrationen: 10 μg/mL Inkubationszeit: 36 h Methode: Zur CD40-Stimulation von hCD20-Zellen aus transgenen Mäusen werden rote Blutkörperchen (RBCs) durch hypotonische Ammoniumchlorid-Kalium (ACK)-Lyse entfernt, und unberührte Milz-B-Zellen werden durch anti-CD43-vermittelte Depletion von Nicht-B-Zellen (MACS) gereinigt. B-Zellen werden 2 Stunden lang in konditioniertem, komplettem RPMI 1640-Medium mit 10 % fötalem Rinderserum (mit oder ohne 10 μg/mL mitogene Stimulation) und entweder anti-CD40- oder anti-IgM-Fab2-Antikörpern inkubiert. Darauf folgen 36 Stunden anti-CD20-Stimulation (GA101 oder Rituximab 10 μg/mL). Als positive Kontrollen für die Induktion des Zelltods werden folgende Agenzien verwendet: 100 nM Staurosporin für die mitochondrial vermittelte Apoptose oder 1 μg/mL anti-CD95 Fas für die extrinsische Induktion der Apoptose. Referenz: https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/20194898/ Obinutuzumab kann bei humanisierten Mäusen (z. B.SCID Beige Mäusen), peripherem Blut und anderen verwandten Assays angewendet werden (Nur als Referenz)
Tierstudie:	Ziel: Tumorkontrollrate (TCR) und Tumorzahlinhibition (TGI) Tiermodelle: 4 bis 8 Wochen alte weibliche SCID Beige Mäuse Formulierung: -- Dosierungen: 30 mg/kg Verabreichung: i.p. Referenz: https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/24304419/ Ziel: NHL-Xenotransplantatstudien an SCID Beige Mäusen Tiermodelle: 4 bis 5 Wochen alte weibliche SCID Beige Mäuse Formulierung: -- Dosierungen: 10 mg/kg, 30 mg/kg Verabreichung: i.p. Referenz: https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/20194898/ Obinutuzumab kann bei humanisierten Mäusen (z. B.SCID Beige Mäusen), peripherem Blut und anderen verwandten Assays angewendet werden (Nur als Referenz)

Zell-Assay:

Ziel: Annexin V/PI FACS Assay
Zellen: NHL-Zelllinien
Konzentrationen: 10 μg/mL
Inkubationszeit: 36 h
Methode: Zur CD40-Stimulation von hCD20-Zellen aus transgenen Mäusen werden rote Blutkörperchen (RBCs) durch hypotonische Ammoniumchlorid-Kalium (ACK)-Lyse entfernt, und unberührte Milz-B-Zellen werden durch anti-CD43-vermittelte Depletion von Nicht-B-Zellen (MACS) gereinigt. B-Zellen werden 2 Stunden lang in konditioniertem, komplettem RPMI 1640-Medium mit 10 % fötalem Rinderserum (mit oder ohne 10 μg/mL mitogene Stimulation) und entweder anti-CD40- oder anti-IgM-Fab2-Antikörpern inkubiert. Darauf folgen 36 Stunden anti-CD20-Stimulation (GA101 oder Rituximab 10 μg/mL). Als positive Kontrollen für die Induktion des Zelltods werden folgende Agenzien verwendet: 100 nM Staurosporin für die mitochondrial vermittelte Apoptose oder 1 μg/mL anti-CD95 Fas für die extrinsische Induktion der Apoptose.
Referenz: https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/20194898/

Obinutuzumab kann bei humanisierten Mäusen (z. B.SCID Beige Mäusen), peripherem Blut und anderen verwandten Assays angewendet werden (Nur als Referenz)

Tierstudie:

Ziel: Tumorkontrollrate (TCR) und Tumorzahlinhibition (TGI)
Tiermodelle: 4 bis 8 Wochen alte weibliche SCID Beige Mäuse
Formulierung: --
Dosierungen: 30 mg/kg
Verabreichung: i.p.
Referenz: https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/24304419/

Ziel: NHL-Xenotransplantatstudien an SCID Beige Mäusen
Tiermodelle: 4 bis 5 Wochen alte weibliche SCID Beige Mäuse
Formulierung: --
Dosierungen: 10 mg/kg, 30 mg/kg
Verabreichung: i.p.
Referenz: https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/20194898/

Obinutuzumab kann bei humanisierten Mäusen (z. B.SCID Beige Mäusen), peripherem Blut und anderen verwandten Assays angewendet werden (Nur als Referenz)

Referenzen	https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/28004361/ https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/24304419/ https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/20194898/

Referenzen

https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/28004361/
https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/24304419/
https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/20194898/

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