P5091

Katalog-Nr.S7132 Charge:S713202

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Technische Daten

Formel

C12H7Cl2NO3S2
Molekulargewicht 348.22 CAS-Nr. 882257-11-6
Löslichkeit (25°C)* In vitro DMSO 35 mg/mL (100.51 mM)
Water Insoluble
Ethanol Insoluble
In vivo (Lösungsmittel einzeln und der Reihe nach zum Produkt hinzufügen.)
Homogeneous suspension
CMC-NA
≥5mg/ml Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Clear solution
6.5%DMSO 40%PEG300 5%Tween80 48.5%ddH2O

Validiert von Selleck Labs. Sollten Sie Anpassungen an dieser Formulierung benötigen, wenden Sie sich an unser Vertriebsteam für kundenspezifische Tests.

 1.950mg/ml (5.60mM) Taking the 1 mL working solution as an example, add 65 μL of 30 mg/ml clarified DMSO stock solution to 400 μL of PEG300, mix evenly to clarify it; add 50 μL of Tween80 to the above system, mix evenly to clarify; then continue to add 485 μL of ddH2O to adjust the volume to 1 mL. The mixed solution should be used immediately for optimal results. 
* <1 mg/ml bedeutet schwer löslich oder unlöslich.
* Bitte beachten Sie, dass Selleck die Löslichkeit aller Verbindungen intern testet und die tatsächliche Löslichkeit geringfügig von veröffentlichten Werten abweichen kann. Dies ist normal und ist auf geringfügige Batch-zu-Batch-Variationen zurückzuführen.
* Versand bei Raumtemperatur (Stabilitätstests zeigen, dass dieses Produkt ohne Kühlmaßnahmen versendet werden kann.)

Vorbereitung von Stammlösungen

Biologische Aktivität

Beschreibung P5091 ist ein selektiver und potenter Inhibitor der Ubiquitin-spezifischen Protease 7 (USP7) mit einer EC50 von 4,2 μM und der eng verwandten USP47.
Ziele
USP7
(Cell-free assay)		 USP47
(Cell-free assay)
4.2 μM(EC50) 4.3 μM
In vitro

P5091 ist ein trisubstituiertes Thiophen mit Dichlorphenylthio-, Nitro- und Acetyl-Substituenten, die die Anti-USP7-Aktivität vermitteln. Diese Verbindung zeigt eine potente, spezifische und selektive Deubiquitinierungsaktivität gegen USP7. Im Gegensatz dazu hemmt sie keine anderen DUBs oder andere getestete Familien von Cysteinproteasen (EC50 > 100 mM). Diese Chemikalie hemmt die Markierung von USP7 mit HA-UbVME in einer konzentrationsabhängigen Weise. Die USP7-vermittelte Spaltung von hochmolekularen Polyubiquitinketten wird durch diese Verbindung dosisabhängig gehemmt. Darüber hinaus hemmt sie die USP7-, aber nicht die USP2- oder USP8-vermittelte Spaltung von Poly-K48-verknüpften Ubiquitinketten. Die USP7-Hemmung durch diese Verbindung induziert die Polyubiquitinierung von HDM2 und beschleunigt den Abbau von HDM2. Sie hemmt die USP7-Deubiquitinierungsaktivität, ohne die Proteasomaktivität in MM-Zellen zu blockieren. Diese Chemikalie induziert einen dosisabhängigen Rückgang der Lebensfähigkeit verschiedener MM-Zelllinien. Sie überwindet das durch Knochenmark-Stromazellen induzierte Wachstum von MM-Zellen. Diese Verbindung verringerte HDM2 und HDMX sowie erhöhte p53- und p21-Spiegel. Insgesamt wird die durch diese Verbindung induzierte Zytotoxizität teilweise über die HDM2-p21-Signalachse vermittelt, und obwohl p53 als Reaktion auf diese chemische Behandlung hochreguliert wird, ist die zytotoxische Aktivität davon nicht p53-abhängig.

In vivo

In Tiermodellstudien für Tumore wird P5091 gut vertragen, hemmt das Tumorwachstum und verlängert das Überleben. Die Kombination dieser Verbindung mit dem HDAC-Inhibitor SAHA löst eine synergistische Anti-MM-Aktivität aus.

Protokoll (aus Referenz)

Kinase-Assay:

[1]
  • Ubiquitin Protease-Assays

    Rekombinante Enzyme in 20 mM Tris-HCl (pH 8,0), 2 mM CaCl2 und 2 mM β-Mercaptoethanol werden mit Dosisbereichen von P5091 für 30 min in einer 96-Well-Platte inkubiert, bevor Ub-PLA2 und NBD C6-HPC oder Ub-EKL und EKL-Substrat hinzugefügt werden. Die Freisetzung eines fluoreszierenden Produkts innerhalb des linearen Bereichs des Assays wird mit einem Perkin Elmer Envision Fluoreszenzplattenleser überwacht. Vehikel (2 % [v/v] DMSO) und 10 mM N-Ethylmaleimid (NEM) sind als Kontrollen enthalten.
Zell-Assay:

[3]
  • Zelllinien

    293T cells

  • Konzentrationen

    10 μM

  • Inkubationszeit

    24 h

  • Methode

    Cells were treated with indicated concentration of P5091 for 24 h.
Tierstudie:

[1]
  • Tiermodelle

    CB-17 SCID-mice

  • Dosierungen

    10 mg/kg

  • Verabreichung

    --

Referenzen

  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/22975377/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/24900381/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/35061527/

Kundenproduktvalidierung

MM.1S cells were treated with RRx-001 (1.25 µM), P5091 (3 µM), or RRx-001 plus P5091 for 12h; protein extracts were analyzed for total DNMT activity using EpiQuik DNMT activity kit (mean ± SD; p < 0.001; n=3).

Daten von [ , , Leukemia, 2016, 30(11):2187-2197 ]

(e) MM.1S cells were treated with RRx-001 (1.25 μM), P5091 (3 μM) or RRx-001 plus P5091 for 12 h; protein extracts were analyzed for total DNMT activity using the EpiQuik DNMT activity kit (mean±s.d.; P<0.001; n=3). (f) MM.1S cells were treated with RRx-001 (1.25 μM), P5091 (3 μM) or RRx-001 plus P5091 for 12 h; protein lysates were then subjected to immunoblot analysis using antibodies specific against p21, HDM2, p53 or GAPDH.

Daten von [ , , Leukemia, 2016, 30(11):2187-2197. ]

The USP7 inhibitor P5091 suppresses ovarian cancer cell growth in vitro. Cultured ovarian cancer cells were treated with various concentrations of P5091 as indicated and cell proliferation was measured with MTT assays. A, B, C, and D represent SKOV3, HeyA8, OVCAR-8, and T80 cells, respectively. All error bars represent standard error of the mean (n = 3, * represents p<0.05). E and F, HeyA8 and OVCAR-8 cells were treated with 50 µM of P5091 for 12 and 24 hours before examination under a phase contrast microscope. Control cells were treated with DMSO. Representative micrographs are shown to illustrate morphology changes (scale bar = 100 µm).

Daten von [ , , Cell Physiol Biochem, 2017, 43(5):1755-1766 ]

P5091 attenuates the TopFlash activity and the expression of Wnt target genes in colorectal cancer cells. (A) P5091 repressed the activity of Wnt signaling in HEK293W cells. HEK293W cells seeded in 96-well plates were incubated with indicated concentrations of P5091 for 24 h. The Luciferase activity was then measured and normalized to the activity of the Renilla (Relative Luciferase Activity, RLA). (B) P5091 attenuated the activation of Wnt signaling initiated by Wnt1 in HEK293 cells. HEK293 cells in 96-well plates were transiently transfected with SuperTopflash and Renilla constructs, with or without Wnt1. 3 h after transfection, cells were treated with indicated doses of P5091 for 24 h, and the luciferase activity were measured and normalized to the activity of Renilla. (C) HCT116 cells, SW480 cells and Caco-2 cells in 96-well plates were transiently cotransfected with plasmids of SuperTopflash and Renilla. After Incubation for 3 h, cells were treated with the indicated concentrations of P5091 for 24 h, after which cells were lysed and underwent dual luciferase reporter assay. The values represented the mean ± SD (n = 3). The significance was determined by student’s t test (ap < 0.05 and bp ≤ 0.01 vs. control). (D) Western blot of Wnt signaling downstream target protein in HCT116 cells, SW480 cells and Caco-2 cells treated with the indicated doses of P5091, actin were used as the loading control. (E) Quantification of indicated protein levels in (D) by NIH ImageJ software. The values represented the mean ± SD (n = 3). The significance was determined by student’s t test (ap < 0.05, bp ≤ 0.01 and cp ≤ 0.001 vs. control). RLA is the abbreviation of relative luciferase activity.

Daten von [ , , Biochem Pharmacol, 2017, 131:29-39 ]

Sellecks P5091 Wurde zitiert von 57 Publikationen

ACC1 is a dual metabolic-epigenetic regulator of Treg stability and immune tolerance [ Mol Metab, 2025, 94:102111] PubMed: 39929287
The deubiquitinase USP7 stabilizes HER2 expression and promotes breast cancer progression [ Neoplasia, 2025, 66:101192] PubMed: 40472738
Stabilization of KPNB1 by deubiquitinase USP7 promotes glioblastoma progression through the YBX1-NLGN3 axis [ J Exp Clin Cancer Res, 2024, 43(1):28] PubMed: 38254206
ER Stress-Activated HSF1 Governs Cancer Cell Resistance to USP7 Inhibitor-Based Chemotherapy through the PERK Pathway [ Int J Mol Sci, 2024, 25(5)2768] PubMed: 38474017
USP7/Maged1-mediated H2A monoubiquitination in the paraventricular thalamus: an epigenetic mechanism involved in cocaine use disorder [ Nat Commun, 2023, 14(1):8481] PubMed: 38123574
Engineered Microparticles for Treatment of Murine Brain Metastasis by Reprograming Tumor Microenvironment and Inhibiting MAPK Pathway [ Adv Sci (Weinh), 2023, 10(8):e2206212] PubMed: 36698296
USP7 promotes non-small-cell lung cancer cell glycolysis and survival by stabilizing and activating c-Abl [ Clin Transl Med, 2023, 13(12):e1509] PubMed: 38082439
De-ubiquitination of SAMHD1 by USP7 promotes DNA damage repair to overcome oncogenic stress and affect chemotherapy sensitivity [ Oncogene, 2023, 42(22):1843-1856] PubMed: 37081042
Suppression of USP7 negatively regulates the stability of ETS proto-oncogene 2 protein [ Biomed Pharmacother, 2023, 162:114700] PubMed: 37062218
USP7 Inhibits Osteoclastogenesis via Dual Effects of Attenuating TRAF6/TAK1 Axis and Stimulating STING Signaling [ Aging Dis, 2023, 14(6):2267-2283] PubMed: 37199589

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