In vivo (Lösungsmittel einzeln und der Reihe nach zum Produkt hinzufügen.)
Homogeneous suspension
CMC-NA
≥5mg/ml
Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Clear solution
5%DMSO
40%PEG300
5%Tween80
50%ddH2O
Validiert von Selleck Labs. Sollten Sie Anpassungen an dieser Formulierung benötigen, wenden Sie sich an unser Vertriebsteam für kundenspezifische Tests.
2.500mg/ml
(4.88mM)
Taking the 1 mL working solution as an example, add 50 μL of 50 mg/ml clarified DMSO stock solution to 400 μL of PEG300, mix evenly to clarify it; add 50 μL of Tween80 to the above system, mix evenly to clarify; then continue to add 500 μL of ddH2O to adjust the volume to 1 mL. The mixed solution should be used immediately for optimal results.
Clear solution
5% DMSO
95% Corn oil
Validiert von Selleck Labs. Sollten Sie Anpassungen an dieser Formulierung benötigen, wenden Sie sich an unser Vertriebsteam für kundenspezifische Tests.
0.500mg/ml
(0.98mM)
Taking the 1 mL working solution as an example, add 50 μL of 10 mg/ml clear DMSO stock solution to 950 μL of corn oil and mix evenly. The mixed solution should be used immediately for optimal results.
* <1 mg/ml bedeutet schwer löslich oder unlöslich. * Bitte beachten Sie, dass Selleck die Löslichkeit aller Verbindungen intern testet und die tatsächliche Löslichkeit geringfügig von veröffentlichten Werten abweichen kann. Dies ist normal und ist auf geringfügige Batch-zu-Batch-Variationen zurückzuführen. * Versand bei Raumtemperatur (Stabilitätstests zeigen, dass dieses Produkt ohne Kühlmaßnahmen versendet werden kann.)
Vorbereitung von Stammlösungen
Biologische Aktivität
Beschreibung
PD0166285 ist ein potenter Wee1- und Chk1-Inhibitor mit Aktivität in nanomolaren Konzentrationen (IC50=24 nM für Wee1 und 72 nM für Myt1). Diese Verbindung ist auch ein neuartiger G2-Checkpoint-Abrogator. Sie induziert Apoptose.
Ziele
Wee1 (Cell-free assay)
Myt1 (Cell-free assay)
Chk1 (Cell-free assay)
24 nM
72 nM
3.4 μM
In vitro
PD0166285 inhibiert nachweislich die Wee1-Aktivität in nanomolaren Konzentrationen. Der Inhibitor hebt den G2/M-Kontrollpunkt auf und induziert eine frühe Zellteilung. Auf zellulärer Ebene inhibiert 0,5 μM dieser Verbindung die strahleninduzierte Cdc2-Phosphorylierung an Tyr-15 und Thr-14 in sieben von sieben getesteten Krebszelllinien dramatisch. Diese Aufhebung des G2-Kontrollpunkts durch diese Chemikalie tötet nachweislich Krebszellen ab. Es inhibiert Cdc2/Cyclin B nicht, aber Chk1-Kinase bei einer viel höheren Konzentration (3433 nM). Die Behandlung von Zellen mit dem Inhibitor ist mit Mikrotubuli-Stabilisierung und einer Abnahme der Cyclin-D-Transkription verbunden. Daher kann diese Verbindung eine potenziell nützliche Anti-Krebs-Therapie sein.
In vivo
PD0166285 in einer Konzentration von 0,5 μM kann die Cdc2Y15/T14-Phosphorylierung in allen getesteten Zelllinien hemmen, unabhängig von ihrem p53-Status, und die pharmakologische Hemmung von WEE1 durch diese Verbindung sensibilisiert U251-FM-GBM-Tumoren für IR in vivo.
Das Wee1-Massenscreening wird mit dem p34cdc2-Kinase-SPA-Kit von Amersham mit einigen Modifikationen durchgeführt. Kurz gesagt, 45–60 nM vollständige Wee1-Kinase wird mit 25 μM dieser Verbindung, 20 μM ATP und 122–441 nM Cdc2/Cyclin B in einem Endvolumen von 50 μl Enzymverdünnungspuffer [50 mM Tris (pH 8,0), 10 mM NaCl, 10 mM MgCl2, 1 mM DTT und 0,1 mM Na3VO4] inkubiert. Nach 30 Minuten Inkubation bei 30 °C werden 30 μl [33P]ATP-haltiger Kinasepuffer [67 mM Tris (pH 8,0), 40 mM NaCl, 13 mM MgCl2, 1 mM DTT und 0,13 mM Na3VO4], der 1 μM biotinyliertes Peptid und 0,25 μCi [γ-33P]ATP enthält, zur Reaktion gegeben und weitere 30 Minuten bei 30 °C inkubiert. Die Reaktion wird durch Zugabe von 200 μl Stopppuffer [50 μM ATP, 5 mM EDTA, 0,1 % Triton X-100 und 1,25 mg/ml SPA-Beads in PBS] gestoppt. Nach Zentrifugation bei 2400 U/min für 15 Minuten wird die Platte mit Wallacs Microbeta-Zähler gezählt.
B16 cells (1 × 105 cells in 100 mm-dishes) are maintained in medium overnight. In addition, the cells are treated with (0, 0.5, 1.0, or 2.0 μM) PD0166285 (including DMSO vehicle) for indicated times. The cells are washed twice with phosphate-buffered saline (PBS). Next, the cells are trypsinized, so the cell numbers in each dish are determined by using a computed cell-counter (Sysmex CDA-500) according to manufacturer's recommendation.
Synergistic induction of mitotic pyroptosis and tumor remission by inhibiting proteasome and WEE family kinases
[ Signal Transduct Target Ther, 2024, 9(1):181.]
Comprehensive multi-omics analysis reveals WEE1 as a synergistic lethal target with hyperthermia through CDK1 super-activation
[ Nat Commun, 2024, 15(1):2089]
Mild replication stress causes premature centriole disengagement via a sub-critical Plk1 activity under the control of ATR-Chk1
[ Nat Commun, 2023, 14(1):6088]
Prolonged unfolded protein reaction is involved in the induction of chronic myeloid leukemia cell death upon oprozomib treatment
[ Cancer Sci, 2020, 112(1):133-143]
RÜCKGABERICHTLINIE
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VERSAND UND LAGERUNG
Selleck-Produkte werden bei Raumtemperatur transportiert. Wenn Sie das Produkt bei Raumtemperatur erhalten, seien Sie versichert, dass die Qualitätskontrollabteilung von Selleck Experimente durchgeführt hat, um zu überprüfen, dass die normale Temperaturplatzierung von einem Monat die biologische Aktivität von Pulverprodukten nicht beeinträchtigt. Nach dem Sammeln lagern Sie das Produkt bitte gemäß den in der Datenblatt beschriebenen Anforderungen. Die meisten Selleck-Produkte sind unter den empfohlenen Bedingungen stabil.
NICHT FÜR DIE ANWENDUNG AM MENSCHEN, FÜR VETERINÄRMEDIZINISCHE DIAGNOSTIK ODER THERAPEUTISCHE ZWECKE.
