PF-543 hydrochloride

Katalog-Nr.S7177 Charge:S717701

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Technische Daten

Formel

C27H32ClNO4S
Molekulargewicht 502.07 CAS-Nr. 1706522-79-3
Löslichkeit (25°C)* In vitro DMSO 93 mg/mL (185.23 mM)
Ethanol 93 mg/mL (185.23 mM)
Water Insoluble
In vivo (Lösungsmittel einzeln und der Reihe nach zum Produkt hinzufügen.)
Homogeneous suspension
CMC-NA
≥5mg/ml Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
* <1 mg/ml bedeutet schwer löslich oder unlöslich.
* Bitte beachten Sie, dass Selleck die Löslichkeit aller Verbindungen intern testet und die tatsächliche Löslichkeit geringfügig von veröffentlichten Werten abweichen kann. Dies ist normal und ist auf geringfügige Batch-zu-Batch-Variationen zurückzuführen.
* Versand bei Raumtemperatur (Stabilitätstests zeigen, dass dieses Produkt ohne Kühlmaßnahmen versendet werden kann.)

Vorbereitung von Stammlösungen

Biologische Aktivität

Beschreibung PF-543 hydrochloride, ein neuartiger Sphingosin-kompetitiver Inhibitor von SphK1, hemmt SphK1 mit einer IC50 und einem Ki von 2,0 nM und 3,6 nM und weist eine über 100-fache Selektivität gegenüber der SphK2-Isoform auf. Diese Verbindung induziert Apoptose, Nekrose und Autophagie.
Ziele
SphK1
(Cell-free assay)		 SphK1
(Cell-free assay)
2.0 nM 3.6 nM(Ki)
In vitro

PF543 ist eine zellgängige Hydroxyl-Methylpyrrolidin-Verbindung, die die SphK-1/SphK1-katalysierte Sphingosinphosphorylierung reversibel und Sphingosin-kompetitiv hemmt, keine Affinität zu S1P-Rezeptoren aufweist und eine stark reduzierte Hemmaktivität gegenüber Sphk2 (6,8 % Hemmung bei 10 μM) oder 46 anderen Lipid- und Proteinkinasen (IC50 >10 μM) zeigt. In den SphK1-überexprimierenden 1483 Kopf- und Halskarzinomzellen verringert diese Verbindung den Spiegel des endogenen S1P um das 10-fache mit einem proportionalen Anstieg des Sphingosinspiegels. Es bindet SphK1 reversibel (k off t1/2=8,5 min) und mit hoher Affinität, wobei die Bindungskonstante (Kd) 5 nM beträgt. Diese Chemikalie hatte trotz einer dramatischen Veränderung des zellulären S1P/Sphingosin-Verhältnisses keine Auswirkung auf die Proliferation und das Überleben von 1483-, A549-, LN229-, Jurkat-, U937- und MCF-7-Zellen. Es ist als potenter Inhibitor der S1P-Bildung in Vollblut wirksam, was darauf hindeutet, dass die SphK1-Isoform der Sphingosinkinase die Hauptquelle von S1P im menschlichen Blut ist.

In vivo PF-543 hydrochloride, ein potenter Sphingosinkinase-1-Inhibitor, reduzierte die dysfunktionale Hypertrophie, verbunden mit Schutz vor Kardiomyozyten-Apoptose.
Merkmale Der bislang potenteste beschriebene Inhibitor von SphK1.

Protokoll (aus Referenz)

Kinase-Assay:

[1]
  • FITC-S1P-Quantifizierung/Caliper-Assay

    Es wird ein 384-Well-Format des SphK-Enzymassays entwickelt, das auf der Trennung von FITC-S1P von unreagiertem FITC-Sphingosin-Substrat unter Verwendung eines mikrofluidischen Kapillarelektrophorese-Mobilitätsshift-Systems basiert. Kurz gesagt, 3 nM SphK1–His6 werden mit 1 μM FITC-Sphingosin, 20 μM ATP und 10 μM dieser Verbindung (eine Endkonzentration von DMSO von 2 %) in einem Puffer inkubiert, der 100 mM Hepes (pH 7,4), 1 mM MgCl2, 0,01 % Triton X-100, 10 % Glycerin, 100 μM Natriumorthovanadat und 1 mM DTT enthält, und zwar für 1 Stunde in einer 384-Well-Matrical MP-101-1-PP-Platte. Reaktionsgemische (10 μL) werden durch Zugabe von 20 μL 30 mM EDTA und 0,15 % Beschichtungsreagens-3 in 100 mM Hepes gelöscht, und ein kleines Aliquot jeder Reaktion (einige Nanoliter) wird im Caliper LabChip 3000-Instrument unter -1,5 psi (psi = 6,9 kPa) Druck, einer nachgeschalteten Spannung von -1900 V und einer Ansaugzeit von 0,2 s analysiert. Phosphoryliertes Fluoreszenzprodukt und unphosphoryliertes Fluoreszenzsubstrat erschienen als charakteristische Peaks und werden mit den Caliper-Daten quantifiziert.
Zell-Assay:

[1]
  • Zelllinien

    1483, A549, LN229, Jurkat, U937, MCF-7

  • Konzentrationen

    ~1 μM

  • Inkubationszeit

    7 days

  • Methode

    CellTiter-Glo Assay
Tierstudie:

[2]
  • Tiermodelle

    C57BL/6 mice

  • Dosierungen

    1 mg/kg

  • Verabreichung

    i.p.

Referenzen

  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/22397330/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/27063355/

Kundenproduktvalidierung

(C) Western blot analysis of mature TGF-β1, FN and Col-I protein levels in sham, sham+ PF-543, UUO and UUO +PF-543 groups at 7 days (n =3). (average ± SEM; ANOVA; *P < 0.05, **P < 0.01 versus sham group. #P < 0.05 versus UUO group). (D) Periodic acid-Schiff staning showed that tubular atrophy was evident in the obstructed kidneys at UUO 7 days after PF-543 treatment (n =6). (E) Masson

Daten von [ , , Int J Biochem Cell Biol, 2017, 90:17-28 ]

PF-543 is anti-proliferative and cytotoxic to CRC cells. Human CRC cell lines, including HCT-116 (a-d), DLD-1 and HT-29 (e), as well as patient-derived primary colon cancer cells (P1, P2 and P3, f), were incubated with regular or PF-543-containg medium for indicated time, cell proliferation was tested by viable cell counting assay (a) and colony formation assay (b); Cell survival was examined by MTT assay (c-f). Expression of SphK1 and Tubulin (the equal loading) was examined by Western blots (e and f, upper panels). Relative SphK1 expression (verse Tubulin) was quantified. “C” stands for untreated control cells (For all Figs). Values represented the mean ± SEM (n = 5). Experiments in this figure were repeated three times, with similar results achieved. *P < 0.05 versus “C” group.

Daten von [ , , Biochem Biophys Res Commun, 2016, 470(3):728-34. ]

Sellecks PF-543 hydrochloride Wurde zitiert von 30 Publikationen

SPHK1 enhances olaparib resistance in ovarian cancer through the NFκB/NRF2/ferroptosis pathway [ Cell Death Discov, 2025, 11(1):29] PubMed: 39875359
Elevated Sphingosine Levels Suppress Profibrotic TGF-β Signaling via the PKC/miR-21/SMAD7 Axis in Sphingosine Kinase 2-Deficient Renal Fibroblasts and Unilateral Ureteral Obstruction-Induced Kidney Fibrosis [ FASEB J, 2025, 39(12):e70768] PubMed: 40558859
Molecular subtyping of renal clear cell carcinoma based on prognostic RASSF family genes and validation of C1QL1 as a key prognostic marker [ Sci Rep, 2025, 15(1):9786] PubMed: 40118977
Targeting the SphK1/S1P/PFKFB3 axis suppresses hepatocellular carcinoma progression by disrupting glycolytic energy supply that drives tumor angiogenesis [ J Transl Med, 2024, 22(1):43] PubMed: 38200582
Cannabinoid-Induced Immunogenic Cell Death of Colorectal Cancer Cells Through De Novo Synthesis of Ceramide Is Partially Mediated by CB2 Receptor [ Cancers (Basel), 2024, 16(23)3973] PubMed: 39682160
Induction of Inflammation Disrupts the Negative Interplay between STING and S1P Axis That Is Observed during Physiological Conditions in the Lung [ Int J Mol Sci, 2023, 24(9)8303] PubMed: 37176007
Comprehensive metabolomics expands precision medicine for triple-negative breast cancer [ Cell Res, 2022, 10.1038/s41422-022-00614-0] PubMed: 35105939
Sphingosine kinase 1 promotes tumor immune evasion by regulating the MTA3-PD-L1 axis [ Cell Mol Immunol, 2022, 19(10):1153-1167] PubMed: 36050478
Targeting sphingosine kinase 1/2 by a novel dual inhibitor SKI-349 suppresses non-small cell lung cancer cell growth [ Cell Death Dis, 2022, 13(7):602] PubMed: 35831279
The anti-osteosarcoma cell activity by the sphingosine kinase 1 inhibitor SKI-V [ Cell Death Discov, 2022, 8(1):48] PubMed: 35115496

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