In vivo (Lösungsmittel einzeln und der Reihe nach zum Produkt hinzufügen.)
Homogeneous suspension
CMC-NA
≥5mg/ml
Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
* <1 mg/ml bedeutet schwer löslich oder unlöslich. * Bitte beachten Sie, dass Selleck die Löslichkeit aller Verbindungen intern testet und die tatsächliche Löslichkeit geringfügig von veröffentlichten Werten abweichen kann. Dies ist normal und ist auf geringfügige Batch-zu-Batch-Variationen zurückzuführen. * Versand bei Raumtemperatur (Stabilitätstests zeigen, dass dieses Produkt ohne Kühlmaßnahmen versendet werden kann.)
Vorbereitung von Stammlösungen
Biologische Aktivität
Beschreibung
PI-1840 ist ein reversibler und selektiver Chymotrypsin-ähnlicher (CT-L)-Inhibitor mit einer IC50 von 27 nM mit geringen Auswirkungen auf die beiden anderen wichtigen proteasomalen proteolytischen Aktivitäten, Trypsin-ähnlich (T-L) und Postglutamyl-Peptid-Hydrolyse-ähnlich (PGPH-L).
Ziele
Chymotrypsin-like proteasome
27 nM
In vitro
PI-1840 hemmt die proteasomale CT-L-Aktivität potent mit einer IC50 von 0,37 μM in intakten menschlichen MDA-MB-468-Krebszellen und hemmt die Proliferation/das Überleben menschlicher MDA-MB-468-Zellen. In intakten Krebszellen hemmt diese Verbindung die CT-L-Aktivität, induziert die Akkumulation von Proteasome-Substraten p27, Bax und IκB-α, hemmt Überlebenswege und die Viabilität und induziert Apoptose.
In vivo
PI-1840 (150 mg/kg i.p.) hemmt das Tumorwachstum von MDA-MB-231-Mammatumoren bei Mäusen.
Im Hochdurchsatz-Screening werden fluorogene Peptide als Substrate verwendet, um (bei 10 μM) die 50.000 Verbindungen umfassende Bibliothek von ChemBridge auf hemmende Aktivität gegen die CT-L-proteolytische Aktivität des gereinigten Kaninchen-20S-Proteasome zu testen. Zur Prüfung der Selektivität für CT-L gegenüber T-L und PGPH-L werden die entsprechenden fluorogenen Peptide verwendet. Kurz gesagt, 1 nM gereinigtes 20S-Kaninchen-Proteasome wird mit 20 μM Suc-Leu-Leu-Val-Tyr-AMC für die CT-L-Aktivität, Bz-Val-Gly-Arg-AMC für die T-L-Aktivität und Benzyloxycarbonyl Z-Leu-Leu-Glu-AMC für die PGPH-L-Aktivität für 1 h bei 37 °C in 100 μL Assay-Puffer (50 mM Tris-HCl, pH 7,6) mit oder ohne diese Verbindung inkubiert. Nach der Inkubation wird die Produktion von hydrolysierten 7-Amido-4-methylcoumarin (AMC)-Gruppen mit einem WALLAC Victor2 1420 Multilabel Counter mit einem Anregungsfilter von 355 nm und einem Emissionsfilter von 460 nm gemessen. Die freigesetzte Menge an AMC liegt im linearen Bereich. Bortezomib wird als positive Kontrolle für IC50-Bestimmungen verwendet. Um die Proteasome-Aktivität in ganzen Zellen zu bestimmen, werden Extrakte (5 μg) aus kultiviertem Zelllysat anstelle von 20S-Kaninchen-Proteasome verwendet und der gleiche oben erwähnte Assay durchgeführt.
Cells are plated in 96-well plates in 100 μL medium and allowed to attach overnight. Cells are then incubated for 120 h with varying concentrations of this compound. Media is aspirated and replaced with 100 μL complete media containing 1 mg/ml MTT and incubated for three hours at 37 °C in 5% CO2 humidified incubator. Media is then aspirated and DMSO is added. Cells are incubated for 10 min at room temperature while shaking, and the absorbance is determined at 540 nm using a μQuant spectrophotometric plate reader. The IC50 values are determined using equation under CT-L, T-L, PGPH-L proteolytic activity assays.
Prolonged unfolded protein reaction is involved in the induction of chronic myeloid leukemia cell death upon oprozomib treatment
[ Cancer Sci, 2020, 112(1):133-143]
RÜCKGABERICHTLINIE
Die bedingungslose Rückgaberichtlinie von Selleck Chemical gewährleistet unseren Kunden ein reibungsloses Online-Einkaufserlebnis. Wenn Sie in irgendeiner Weise mit Ihrem Kauf unzufrieden sind, können Sie jeden Artikel innerhalb von 7 Tagen nach Erhalt zurückgeben. Im Falle von Produktqualitätsproblemen, sei es protokollbezogene oder produktbezogene Probleme, können Sie jeden Artikel innerhalb von 365 Tagen ab dem ursprünglichen Kaufdatum zurückgeben. Bitte befolgen Sie die nachstehenden Anweisungen, wenn Sie Produkte zurücksenden.
VERSAND UND LAGERUNG
Selleck-Produkte werden bei Raumtemperatur transportiert. Wenn Sie das Produkt bei Raumtemperatur erhalten, seien Sie versichert, dass die Qualitätskontrollabteilung von Selleck Experimente durchgeführt hat, um zu überprüfen, dass die normale Temperaturplatzierung von einem Monat die biologische Aktivität von Pulverprodukten nicht beeinträchtigt. Nach dem Sammeln lagern Sie das Produkt bitte gemäß den in der Datenblatt beschriebenen Anforderungen. Die meisten Selleck-Produkte sind unter den empfohlenen Bedingungen stabil.
NICHT FÜR DIE ANWENDUNG AM MENSCHEN, FÜR VETERINÄRMEDIZINISCHE DIAGNOSTIK ODER THERAPEUTISCHE ZWECKE.
