Gedatolisib (PKI-587)

Katalog-Nr.S2628 Charge:S262804

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Technische Daten

Formel

C32H41N9O4
Molekulargewicht 615.73 CAS-Nr. 1197160-78-3
Löslichkeit (25°C)* In vitro DMSO (mit 50 °C warmem Wasserbad erwärmt) 10 mg/mL (16.24 mM)
Water Insoluble
Ethanol Insoluble
In vivo (Lösungsmittel einzeln und der Reihe nach zum Produkt hinzufügen.)
Homogeneous suspension
CMC-NA
≥5mg/ml Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
* <1 mg/ml bedeutet schwer löslich oder unlöslich.
* Bitte beachten Sie, dass Selleck die Löslichkeit aller Verbindungen intern testet und die tatsächliche Löslichkeit geringfügig von veröffentlichten Werten abweichen kann. Dies ist normal und ist auf geringfügige Batch-zu-Batch-Variationen zurückzuführen.
* Versand bei Raumtemperatur (Stabilitätstests zeigen, dass dieses Produkt ohne Kühlmaßnahmen versendet werden kann.)

Vorbereitung von Stammlösungen

Biologische Aktivität

Beschreibung Gedatolisib (PKI-587) ist ein hochwirksamer dualer Inhibitor von PI3Kα, PI3Kγ und mTOR mit IC50-Werten von 0,4 nM, 5,4 nM bzw. 1,6 nM in zellfreien Assays. Diese Verbindung befindet sich derzeit in Phase 2.
Ziele
PI3Kα
(Cell-free assay)		 mTOR
(Cell-free assay)		 PI3Kγ
(Cell-free assay)
0.4 nM 1.6 nM 5.4 nM
In vitro Gedatolisib (PKI-587) zeigt eine starke hemmende Aktivität gegen PI3K-α, PI3K-γ und mTOR mit IC50-Werten von 0,4 nM, 5,4 nM bzw. 1,6 nM. Darüber hinaus zeigt es auch seine Wirksamkeit gegen die am häufigsten auftretenden mutierten Formen von PI3Kα, insbesondere H1047R und E545K mit IC50-Werten von 0,6 nM bzw. 0,6 nM. In Korrelation mit der Unterdrückung der Phosphorylierung von PI3K/mTOR-Signalwegproteinen bewirkt diese Verbindung eine Hemmung des Tumorzellwachstums in den Zelllinien MDA-361 und PC3-MM2 mit IC50-Werten von 4 nM bzw. 13,1 nM.
In vivo Die Behandlung mit Gedatolisib (PKI-587) bei 25 mg/kg i.v. bei Nacktmäusen führt zu einer geringen Plasmaclearance (7 (mL/min)/kg), einem hohen Verteilungsvolumen (7,2 L/kg) und einer langen Halbwertszeit (14,4 Stunden). Im MDA-361-Xenograft-Modell zeigt es eine starke Antitumorwirksamkeit mit der minimal wirksamen Dosis (MED) von 3 mg/kg gegen MDA-361-Tumoren und der maximal verträglichen Einzeldosis (MTD) von 30 mg/kg. Im H1975 (nicht-kleinzelliges Lungenkarzinom, mutiertes EGFR [L858R, T790M])-Xenograft-Modell führt diese Verbindung bei 25 mg/kg über 7 Wochen zu einer Überlebensrate von 90 % in der behandelten Gruppe.

Protokoll (aus Referenz)

Kinase-Assay:[1]
  • PI3K- und mTOR-Kinase-Assay

    Enzymassays werden im Fluoreszenzpolarisation (FP)-Format durchgeführt, das an das Protokoll des Echelon K-1100 PI3K FP Assay Kits angepasst ist. Humane Klasse-I-PI3Ks und PI3K-α-Mutanten (E545K und H1047R) werden in Sf9 produziert oder von Upstate Biotech erworben. GST-GRP1 (murin) wird in Escherichia coli produziert und durch GST-Sepharose isoliert. Die Assay-Puffer sind Reaktionspuffer [20 mM HEPES (pH 7,1), 2 mM MgCl2, 0,05 % CHAPS und 0,01 % β-Mercaptoethanol] und Stopp-/Detektionspuffer [100 mM HEPES (pH 7,5), 4 mM EDTA, 0,05 % CHAPS]. Die FP-Reaktion wird 30 Minuten lang bei Raumtemperatur in 20 μL Reaktionspuffer durchgeführt, der 20 μM Phosphatidylinositol-4,5-bisphosphat (PIP2), 25 μM ATP und <4 % DMSO enthält. Die FP-Reaktion wird mit 20 μL Stopp-/Detektionspuffer (10 nM Sonde und 40 nM GST-GRP) gestoppt, und nach 2 Stunden werden die Daten mit einem Envision-Plattenlesegerät erfasst. Die Routineassays mit gereinigtem FLAG-TOR (FL und 3,5) werden in 96-Well-Platten wie folgt durchgeführt. Enzyme werden zuerst in Kinase-Assay-Puffer (10 mM Hepes (pH 7,4), 50 mM NaCl, 50 mM β-Glycerophosphat, 10 mM MnCl2, 0,5 mM DTT, 0,25 μM Microcystin LR und 100 μg/mL BSA) verdünnt. Zu jeder Vertiefung werden 12 μL des verdünnten Enzyms kurz mit 0,5 μL Testinhibitor oder Kontrollvehikel Dimethylsulfoxid (DMSO) gemischt, wobei der Testinhibitor Gedatolisib (PKI-587) ist. Die Kinase-Reaktion wird durch Zugabe von 12,5 μL Kinase-Assay-Puffer, der ATP und His6-S6K enthält, eingeleitet, um ein Endreaktionsvolumen von 25 μL zu erhalten, das 800 ng/mL FLAG-TOR, 100 μM ATP und 1,25 μM His6-S6K enthält. Die Reaktionsplatte wird 2 Stunden (linear bei 1–6 Stunden) bei Raumtemperatur unter sanftem Schütteln inkubiert und dann durch Zugabe von 25 μL Stopp-Puffer (20 mM Hepes (pH 7,4), 20 mM EDTA und 20 mM EGTA) beendet.
Zell-Assay:[1]
  • Zelllinien

    MDA-361 and PC3-MM2

  • Konzentrationen

    0-10 μM

  • Inkubationszeit

    72 hours

  • Methode

    Cells are plated in 96-well culture plates at about 3000 cells per well. One day following plating, Gedatolisib (PKI-587) is added to cells. Three days after treatment with this compound, viable cell densities are determined by measuring metabolic conversion (by viable cells) of the dye MTS, a previously established cell proliferation assay. For each assay, MTS and PMS stocks are freshly thawed and mixed (MTS/PMS, 20:1). The MTS/PMS mixture is then added to 96-well cell plates at 20 μL/well, and plates are incubated for 1 hour–2 hours in cell culture incubator. MTS assay results are read in a 96-well format plate reader by measuring absorbance at 490 nm. The effect of each treatment is calculated as a percentage of control cell growth obtained from vehicle-treated cells grown in the same culture plate.
Tierstudie:[1]
  • Tiermodelle

    MDA-361 and H1975 cells are injected subcutaneously into the nude mice.

  • Dosierungen

    ≤30 mg/kg

  • Verabreichung

    Administered via i.v.

Referenzen

  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/20166697/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/22261591/

Kundenproduktvalidierung

PI3K inhibitors promote apoptosis in checkpoint-defective cell lines. Two checkpoint-functional (A2058, D28) and three defective (HT144, D20, SKMel13) melanoma cell lines growth as tumour spheres as in Figure 4B were either untreated or treated with 5 uM PF-05212384 for 72 h, harvested and immunoblotted for pAkt Ser473.

Daten von [ Pigment Cell Melanoma Res , 2014 , 27(5), 813-21 ]

<p>After starved in serum-free medium for 24h,A549 cells incubated with the indicated concentrations of PKI-587 for 3h,followed by 20-minute stimolation of 100ng/ml EGF.</p>

, , Dr. Zhang of Tianjin Medical University

Sellecks Gedatolisib (PKI-587) Wurde zitiert von 31 Publikationen

Efficacy of NAMPT inhibition in T-cell acute lymphoblastic leukemia [ PLoS One, 2025, 20(6):e0324443] PubMed: 40526635
Bypassing cisplatin resistance in Nrf2 hyperactivated head and neck cancer through effective PI3Kinase targeting [ bioRxiv, 2025, 2025.01.10.632413] PubMed: 39868226
AKT1 phosphorylation of cytoplasmic ME2 induces a metabolic switch to glycolysis for tumorigenesis [ Nat Commun, 2024, 15(1):686] PubMed: 38263319
A multiplex single-cell RNA-Seq pharmacotranscriptomics pipeline for drug discovery [ Nat Chem Biol, 2024, ] PubMed: 39482470
Assessments of prostate cancer cell functions highlight differences between a pan-PI3K/mTOR inhibitor, gedatolisib, and single-node inhibitors of the PI3K/AKT/mTOR pathway [ Mol Oncol, 2024, 10.1002/1878-0261.13703] PubMed: 39092562
Functional Assessments of Gynecologic Cancer Models Highlight Differences Between Single-Node Inhibitors of the PI3K/AKT/mTOR Pathway and a Pan-PI3K/mTOR Inhibitor, Gedatolisib [ Cancers (Basel), 2024, 16(20)3520] PubMed: 39456616
Selective Eradication of Colon Cancer Cells Harboring PI3K and/or MAPK Pathway Mutations in 3D Culture by Combined PI3K/AKT/mTOR Pathway and MEK Inhibition [ Int J Mol Sci, 2023, 24(2)1668] PubMed: 36675180
RECOVER identifies synergistic drug combinations in vitro through sequential model optimization [ Cell Rep Methods, 2023, 3(10):100599] PubMed: 37797618
In Vitro Angiogenesis Inhibition and Endothelial Cell Growth and Morphology [ Int J Mol Sci, 2022, 23(8)4277] PubMed: 35457095
Fibroblast-Induced Paradoxical PI3K Pathway Activation in PTEN-Competent Colorectal Cancer: Implications for Therapeutic PI3K/mTOR Inhibition [ Front Oncol, 2022, 12:862806] PubMed: 35719951

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