AMD3100 (Plerixafor)

Plerixafor (AMD3100) hemmt die CXCL12-vermittelte Chemotaxis mit einer Potenz, die etwas besser ist als seine Affinität für CXCR4. [1]

Es antagonisiert auch die SDF-1/CXCL12-Ligandenbindung mit einer IC50 von 651 nM. Diese Verbindung hemmt die SDF-1-vermittelte GTP-Bindung, den SDF-1-vermittelten Kalziumfluss und die SDF-1-stimulierte Chemotaxis mit IC50-Werten von 27 nM, 572 nM bzw. 51 nM. Es hemmt nicht den Kalziumfluss gegen Zellen, die CXCR3, CCR1, CCR2b, CCR4, CCR5 oder CCR7 exprimieren, wenn sie mit ihren kognaten Liganden stimuliert werden, noch hemmt es die Rezeptorbindung von LTB4. Alleine induziert es keinen Kalziumfluss in den CCRF-CEM-Zellen, die mehrere GPCRs einschließlich CXCR4, CCR4 und CCR7 exprimieren. [2]

Bei diabetischen Mäusen fördert eine einmalige topische Anwendung von Plerixafor (AMD3100) die Wundheilung durch Erhöhung der Zytokinproduktion, Mobilisierung von Knochenmark-EPCs und Verbesserung der Aktivität von Fibroblasten und Monozyten/Makrophagen, wodurch sowohl die Angiogenese als auch die Vaskulogenese erhöht werden. [3]

Kohorten von Mäusen werden fünf aufeinanderfolgende Tage lang mit PBS, IGF1, PDGF, SCF oder VEGF und am 5. Tag mit dieser Verbindung behandelt. Die Anzahl und Größe der Kolonien sind bei Mäusen, denen IGF1 plus diese Verbindung injiziert wurde, im Vergleich zu den mit PDGF, SCF und VEGF behandelten Gruppen in Kombination mit Plerixafor am höchsten. [4]

• Rezeptorbindungsassays

  Für die Kompetitionsbindungsstudien gegen CXCR4 wird Plerixafor (AMD3100) in einem Konzentrationsbereich 3 Stunden lang bei 4 °C in Bindepuffer (PBS enthaltend 5 mM MgCl₂, 1 mM CaCl₂, 0,25 % BSA, pH 7,4) mit 5 × 10⁵ CCRF-CEM-Zellen und 100 pM ¹²⁵I-SDF-1α (2200 Ci/mmol) in Milipore Durapore^TM Filterplatten inkubiert. Ungebundenes ¹²⁵I-SDF-1α wird durch Waschen mit kaltem 50 mM HEPES, 0,5 M NaCl pH 7,4 entfernt. Der Kompetitionsbindungsassay gegen BLT1 wird an Membranen aus CHO-S-Zellen durchgeführt, die rekombinantes BLT1 exprimieren. Die Membranen werden durch mechanische Zelllyse, gefolgt von Hochgeschwindigkeitszentrifugation, hergestellt, in 50 mM HEPES, 5 mM MgCl₂-Puffer resuspendiert und schockgefroren. Diese Verbindung wird mit der Membranpräparation 1 Stunde lang bei Raumtemperatur in einem Assay-Gemisch inkubiert, das 50 mM Tris, pH 7,4, 10 mM MgCl₂, 10 mM CaCl₂, 4 nM LTB₄ gemischt mit 1 nM ³H-LTB₄ (195,0 Ci/mmol) und 8 μg Membran enthält. Das ungebundene ³H-LTB₄ wird durch Filtration auf Millipore Typ GF-C Filterplatten abgetrennt.

• Tiermodelle

  Twelve-week-old C57BL/6 mice with segmental bone defect

• Dosierungen

  5 mg/kg

• Verabreichung

  Administered via i.p.