PNU-74654

Die Verbindung PNU-74654 (PNU) ist ein nicht von der FDA zugelassenes Medikament, das die Bindung von Tcf an β-Catenin verhindert und als Wnt/beta-catenin-Antagonist wirkt. In NCI-H295-Zellen verringert diese Verbindung die Zellproliferation 96 h nach der Behandlung signifikant, erhöht die frühe und späte Apoptose, verringert die nukleäre β-Catenin-Akkumulation, beeinträchtigt die CTNNB1/beta-catenin-Expression und erhöht die β-Catenin-Zielgene 48 h nach der Behandlung. Bei HeLa-Zellen werden keine Auswirkungen beobachtet. In NCI-H295-Zellen verringert diese Chemikalie die Cortisol-, Testosteron- und Androstendionsekretion 24 und 48 h nach der Behandlung. Zusätzlich verringert sie in NCI-H295-Zellen die SF1- und CYP21A2-mRNA-Expression sowie die Proteinspiegel von STAR und Aldosteronsynthase 48 h nach der Behandlung. In Y1-Zellen beeinträchtigt diese Verbindung die Corticosteronsekretion 24 h nach der Behandlung, verringert jedoch nicht die Zellviabilität[2].

• Zelllinien

  Adrenal (NCI-H295 and Y1) and non-adrenal (HeLa) cell lines

• Konzentrationen

  5-200 μM

• Inkubationszeit

  24-96 h

• Methode

  NCI-H295 cells are plated at 200,000 cells per well in 24-well plates for gene expression, protein analysis and adrenal steroid measurements. After 48 h, cells are treated with vehicle (0.1%-0.4% DMSO) or 10, 50, 100 and 200 μM PNU-74654. After 24 and 48 h, medium supernatants are collected for adrenal steroid measurements. Adherent cells are fixed for immunofluorescence or harvested for RNA and protein isolation.