Ramucirumab (anti-VEGFR2)

Katalog-Nr.A2003 Batch: A200301

Technische Daten

CAS-Nr.	947687-13-0
Formel	PBS buffer, pH 7.2
Isotyp	human IgG1
Lagerung (Ab dem Datum des Erhalts)	Store the undiluted solution at 4°C in the dark to avoid freeze-thaw cycles
Reinheit	99.4%
Proteinkonzentration:	5mg/ml
Endotoxinspiegel	≤1 EU/mg

Biologische Aktivität

Beschreibung

Ramucirumab ist ein monoklonaler Antikörper der IgG1-Klasse, der an VEGF-R2 bindet und dessen Aktivierung verhindert. Der IC50-Wert für die Blockierung der KDR-Bindung an VEGF beträgt 0,8 nM für Ramucirumab, MW: 143,6 KD.

Ziele

KDR/VEGF interaction

0.8 nM

In vitro

Ramucirumab ist ein direkter Inhibitor von VEGF-R2, wo es mit hoher Spezifität und Affinität im Pikomolarbereich an die extrazelluläre VEGF-Bindungsdomäne bindet. Es verhindert somit die Bindung des VEGF-Liganden an den VEGF-R2-Rezeptor. Ramucirumab hat potenzielle Vorteile gegenüber Bevacizumab, da es selektiv für VEGF-R2 ist, während Bevacizumab durch die Adressierung von VEGF-A VEGF-R1, -R2 und die nicht-katalytischen Korezeptoren Neuropilin-1 und -2 beeinflusst. Ramucirumab verhindert die Bindung von VEGFR-Liganden: VEGF-A, VEGF-C und VEGF-D an seine Rezeptoren. Somit hemmt Ramucirumab die Angiogenesis-Signalwege, die an der Entwicklung und Progression von Magenkrebs beteiligt sind. Ramucirumab zeigt eine Hemmung der VEGF-stimulierten VEGFR-2-Aktivierung, der Proliferation menschlicher Endothelzellen, der VEGF-Migration menschlicher Leukämiezellen und der VEGF-induzierten Phosphorylierung von VEGFR-2 in menschlichen Nabelschnurvenen- und Schweineaorten-Endothelzellen, die VEGFR-2 überexprimieren. Präklinische In-vitro-Daten zeigten, dass Ramucirumab eine hohe Affinität für VEGFR-2 aufweist, mit einer halbmaximalen effektiven Konzentration (EC50) von 0,15 nM, 8- bis 9-mal höher als sein natürlicher Ligand VEGFA. Ramucirumab bindet VEGFR-2 in Domäne 3 nahe dem N-Terminus, sowohl als lösliches Protein als auch als Zelloberflächenrezeptor, mit einem IC50 von 1-2 nM.

In vivo

In präklinischen Studien waren Ramucirumab-Konzentrationen von >20 μg/mL mit einer Antikrebsaktivität verbunden. Und Ramucirumab hemmte die VEGF-Bindung an VEGFR-2 potent mit einer Bindungsaffinitätskonstante von Ramucirumab an VEGFR-2 von 5 × 10^-11 M. Die pharmakokinetische Bewertung hat eine nichtlineare Pharmakokinetik gezeigt, wobei inkrementelle Dosen dieses Wirkstoffs mit einer Abnahme der Clearance verbunden sind. Ramucirumab hat eine Halbwertszeit von 200-300 h. Präklinische Studien sollten auch an Mäusen durchgeführt werden, aber interspezifische Rezeptorunterschiede machten Ramucirumab in präklinischen Mausmodellen inaktiv.

Protokoll (nur als Referenz)

Zell-Assay:	Die anti-KDR-Antikörper wurden den Mikrowells einer 96-Well-Platte zugesetzt, die mit KDR(Ig1-7) (vollständiger KDR ECD), KDR(Ig1-3) (Variante, die nur die ersten drei N-terminalen Ig-Domänen des KDR ECD enthält) oder KDR(Ig1) (Variante, die nur die erste N-terminale Ig-Domäne des KDR ECD enthält) beschichtet war, und 1 h bei Raumtemperatur inkubiert. Die Platte wurde gewaschen und dann mit einem Maus-Anti-Human-Fc-Antikörper-HRP-Konjugat für weitere 1 h inkubiert, danach wurde die Platte wie oben beschrieben entwickelt. Die Antikörperbindung an die beiden Ig-Deletionsvarianten wird relativ (als Prozentsätze) zu ihrer Bindung an den vollständigen KDR ECD dargestellt.

Zell-Assay:

Die anti-KDR-Antikörper wurden den Mikrowells einer 96-Well-Platte zugesetzt, die mit KDR(Ig1-7) (vollständiger KDR ECD), KDR(Ig1-3) (Variante, die nur die ersten drei N-terminalen Ig-Domänen des KDR ECD enthält) oder KDR(Ig1) (Variante, die nur die erste N-terminale Ig-Domäne des KDR ECD enthält) beschichtet war, und 1 h bei Raumtemperatur inkubiert. Die Platte wurde gewaschen und dann mit einem Maus-Anti-Human-Fc-Antikörper-HRP-Konjugat für weitere 1 h inkubiert, danach wurde die Platte wie oben beschrieben entwickelt. Die Antikörperbindung an die beiden Ig-Deletionsvarianten wird relativ (als Prozentsätze) zu ihrer Bindung an den vollständigen KDR ECD dargestellt.

Referenzen	https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/25281695/ https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/26413377/ https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/20624120/ https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/27144874/ https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/12917408/ Aufklappen

Referenzen

https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/25281695/
https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/26413377/
https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/20624120/

https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/27144874/
https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/12917408/

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Sellecks Ramucirumab (anti-VEGFR2) Wurde zitiert von 4 Publikationen

ALK5/VEGFR2 dual inhibitor TU2218 alone or in combination with immune checkpoint inhibitors enhances immune-mediated antitumor effects [ Cancer Immunol Immunother, 2024, 73(10):190]	https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/?term=39105882
[ Int J Mol Sci, 2024, ]	https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/?term=38339049
Comparison of Tepotinib, Paclitaxel, or Ramucirumab Efficacy According to the Copy Number or Phosphorylation Status of the MET Gene: Doublet Treatment versus Single Agent Treatment [ Int J Mol Sci, 2024, 25(3)1769]	https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/?term=38339049
Analysis of Tumor Heterogeneity Through AXL Activation in Primary Resistance to EGFR Tyrosine Kinase Inhibitors [ JTO Clin Res Rep, 2023, 4(6):100525]	https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/?term=37426308

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