Rhodamine 123

Katalog-Nr.S3577 Charge:S357701

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Technische Daten

Formel

C₂₁H₁₇ClN₂O₃

Molekulargewicht

380.82

CAS-Nr.

62669-70-9

Löslichkeit (25°C)*

In vitro

DMSO

76 mg/mL (199.56 mM)

Ethanol

15 mg/mL (39.38 mM)

Water

Insoluble

In vivo (Lösungsmittel einzeln und der Reihe nach zum Produkt hinzufügen.)

Homogeneous suspension

CMC-NA

≥5mg/ml

Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.

* <1 mg/ml bedeutet schwer löslich oder unlöslich.
* Bitte beachten Sie, dass Selleck die Löslichkeit aller Verbindungen intern testet und die tatsächliche Löslichkeit geringfügig von veröffentlichten Werten abweichen kann. Dies ist normal und ist auf geringfügige Batch-zu-Batch-Variationen zurückzuführen.
* Versand bei Raumtemperatur (Stabilitätstests zeigen, dass dieses Produkt ohne Kühlmaßnahmen versendet werden kann.)

Vorbereitung von Stammlösungen

Biologische Aktivität

Beschreibung

Rhodamine 123 (RH-123, R-22420) ist ein fluoreszierender kationischer dye, der zur Markierung von mitochondria in lebenden Zellen verwendet wird. Diese Verbindung hemmt die ADP-stimulierte Atmung von Mitochondrien mit einem Ki = 12 μM und die ATPase-Aktivität von invertierten inneren Membranvesikeln mit einem Ki von 126 μM und teilweise gereinigter F1-ATPase mit einem Ki von 177 μM.

Ziele

ATPase (inverted inner membrane vesicles)	F1-ATPase (Cell-free assay)
126 μM(Ki)	177 μM(Ki)

In vitro

1. Herstellung der Rhodamine 123 Arbeitslösung
1.1 Herstellung der Stammlösung
Lösen Sie 1 mg dieser Verbindung in 525 μL DMSO auf, um 5 mM Stammlösung zu erhalten.
1.2 Herstellung der Arbeitslösung dieser Chemikalie
Verdünnen Sie die Stammlösung in serumfreiem Zellkulturmedium oder PBS, um 1-20 μM Arbeitslösung zu erhalten.
Hinweis: Bitte passen Sie die Konzentration der Arbeitslösung dieser Verbindung an die tatsächliche Situation an.
2. Zellfärbung
2.1 Suspensionszellen (6-Well-Platte)
a. Zentrifugieren Sie bei 1000 g bei 4℃ für 3-5 Minuten und verwerfen Sie dann den Überstand. Waschen Sie zweimal mit PBS, jedes Mal 5 Minuten lang. Die Zelldichte beträgt 1×106/mL.
b. Geben Sie 1 mL Arbeitslösung hinzu und inkubieren Sie dann bei Raumtemperatur für 5-30 Minuten.
c. Zentrifugieren Sie bei 400 g bei 4℃ für 3-4 Minuten und verwerfen Sie dann den Überstand.
d. Waschen Sie zweimal mit PBS, jedes Mal 5 Minuten lang.
e. Resuspendieren Sie die Zellen mit serumfreiem Zellkulturmedium oder PBS. Beobachtung mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie.
2.2 Adhärente Zellen
a. Kultivieren Sie adhärente Zellen auf sterilen Deckgläsern.
b. Entfernen Sie das Deckglas aus dem Medium und saugen Sie überschüssiges Medium ab.
c. Geben Sie 100 μL Arbeitslösung hinzu, schütteln Sie es vorsichtig, um die Zellen vollständig zu bedecken, und inkubieren Sie dann bei Raumtemperatur für 30-60 Minuten.
d. Waschen Sie zweimal mit Medium, jedes Mal 5 Minuten lang. Beobachtung mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie.
Hinweis: Bei der Detektion mittels Durchflusszytometrie müssen die Zellen vor dem Färben resuspendiert werden.

Protokoll (aus Referenz)

Zell-Assay:^{^[2]}	Zelllinien KBV₂₀₀ and HCT-8/V cells with or without knockout of ABCB1 Konzentrationen 10 μM Inkubationszeit 2 h Methode The cell was seeded into a 6-well plate at a density of 2.5×10⁵ cells/well. After adhered, the cells were then incubated with 10 μM rhodamine 123 or doxorubicin for 2 h at 37°C. After washing three times with ice-cold PBS, cells were analyzed with FCM.

Zell-Assay:^{^[2]}

Zelllinien
KBV₂₀₀ and HCT-8/V cells with or without knockout of ABCB1
Konzentrationen
10 μM
Inkubationszeit
2 h
Methode
The cell was seeded into a 6-well plate at a density of 2.5×10⁵ cells/well. After adhered, the cells were then incubated with 10 μM rhodamine 123 or doxorubicin for 2 h at 37°C. After washing three times with ice-cold PBS, cells were analyzed with FCM.

Referenzen

https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/2873836/
https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC5040697/

Sellecks Rhodamine 123 Wurde zitiert von 1 Publikation

The protective effect of leukemia inhibitory factor on apoptosis of BMSCs induced by hypoxia and serum-deprivation [ Am J Transl Res, 2023, 15(6):4065-4078]	PubMed: 37434853

The protective effect of leukemia inhibitory factor on apoptosis of BMSCs induced by hypoxia and serum-deprivation [ Am J Transl Res, 2023, 15(6):4065-4078]

PubMed: 37434853

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