RI-1

Katalog-Nr.S8077 Charge:S807701

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Technische Daten

Formel

C₁₄H₁₁Cl₃N₂O₃

Molekulargewicht

361.61

CAS-Nr.

415713-60-9

Löslichkeit (25°C)*

In vitro

DMSO

50 mg/mL (138.27 mM)

Water

Insoluble

Ethanol

Insoluble

In vivo (Lösungsmittel einzeln und der Reihe nach zum Produkt hinzufügen.)

Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Clear solution	5%DMSO 1 40%PEG300 2 5%Tween80 3 50%ddH2O Validiert von Selleck Labs. Sollten Sie Anpassungen an dieser Formulierung benötigen, wenden Sie sich an unser Vertriebsteam für kundenspezifische Tests.	1.250mg/ml (3.46mM)	Taking the 1 mL working solution as an example, add 50 μL of 25 mg/ml clarified DMSO stock solution to 400 μL of PEG300, mix evenly to clarify it; add 50 μL of Tween80 to the above system, mix evenly to clarify; then continue to add 500 μL of ddH2O to adjust the volume to 1 mL. The mixed solution should be used immediately for optimal results.
Clear solution	5% DMSO 1 95% Corn oil Validiert von Selleck Labs. Sollten Sie Anpassungen an dieser Formulierung benötigen, wenden Sie sich an unser Vertriebsteam für kundenspezifische Tests.	1.250mg/ml (3.46mM)	Taking the 1 mL working solution as an example, add 50 μL of 25 mg/ml clear DMSO stock solution to 950 μL of corn oil and mix evenly. The mixed solution should be used immediately for optimal results.

* <1 mg/ml bedeutet schwer löslich oder unlöslich.
* Bitte beachten Sie, dass Selleck die Löslichkeit aller Verbindungen intern testet und die tatsächliche Löslichkeit geringfügig von veröffentlichten Werten abweichen kann. Dies ist normal und ist auf geringfügige Batch-zu-Batch-Variationen zurückzuführen.
* Versand bei Raumtemperatur (Stabilitätstests zeigen, dass dieses Produkt ohne Kühlmaßnahmen versendet werden kann.)

Vorbereitung von Stammlösungen

Biologische Aktivität

Beschreibung

RI-1 (RAD51 inhibitor 1) ist ein RAD51-Inhibitor mit einer IC50 von 5 bis 30 μM.

Ziele

RAD51

<30 μM

In vitro

RI-1 sensibilisiert Zellen für DNA-Schäden, indem es HsRAD51 direkt und spezifisch stört und die Fähigkeit von RAD51, Filamente auf ssDNA zu bilden, hemmt. Darüber hinaus erzeugt diese Verbindung allein eine Toxizität als Einzelwirkstoff in allen drei Krebszelllinien (HeLa, MCF-7 und U2OS) mit LD50-Werten im Bereich von 20–40 µM. Es verringert das Wiederverbinden von γ-H2AX-Foci in G2-Phasen-Zellen und führt 6 Stunden nach Bestrahlung zu einem höheren Grad an nicht reparierten DSBs.

Merkmale

Ein selektiver rekombinanter RAD51-Proteininhibitor, der 2012 entdeckt wurde. Wertvolles Werkzeug für mechanistische Studien der DNA-Reparatur und Potenzial für den Einsatz bei vielen Krebsarten.

Protokoll (aus Referenz)

Kinase-Assay:^{^[1]}	DNA-Bindungsassays Alle Reaktionen werden in schwarzen, nicht bindenden Polystyrol-384-Well-Platten mit Reaktionsvolumina von 30–100 μL durchgeführt. Gereinigte DNA-Strangaustauschproteine und chemische Verbindungen werden 5 Minuten lang bei Raumtemperatur vorinkubiert; anschließend werden sie weitere 30 Minuten bei 37 °C mit 100 nM ssDNA-Substrat inkubiert, das aus einem 45-mer Poly-dT besteht, das am 5'-Terminus mit Alexa 488 markiert ist (synthetisiert und gereinigt von Integrated DNA Technologies). Die Reaktionen werden in 20 mM HEPES pH 7,5, 10 mM MgCl₂, 0,25 μM BSA, 2 % Glycerin, 30 mM NaCl, 4 % DMSO und 2 mM ATP durchgeführt. Einige Bedingungen enthielten DTT oder TCEP (Tris(2-carboxyethyl)phosphin), wie angegeben. Die DNA-Bindung wird als Funktion der Fluoreszenzpolarisation (FP) mit einem Safire2-Plattenlesegerät gemessen, wobei die folgenden Einstellungen verwendet werden: Anregung 470±5nm, Emission 530±5nm, 10 Messungen/Well, Z-Höhe und G-Faktor automatisch aus Kontrollwells kalibriert. Die angezeigten Fehlerbalken stellen die Standardabweichung dar. Für Experimente, die eine Titration von Proteinkonzentrationen beinhalten, werden die Daten an eine Gleichung angepasst, die die kooperative Natur berücksichtigt, mit der Rekombinaseproteine DNA binden. Für Experimente, die eine Titration dieser Verbindung beinhalten, werden Proteinkonzentrationen so gewählt, dass eine Sättigung des FP-Signals von ∼80 % in Abwesenheit dieser Chemikalie erreicht wird.
Zell-Assay:^{^[1]}	Zelllinien HeLa, MCF-7 and U2OS cells Konzentrationen ~35 μM Inkubationszeit 24 hours Methode Cytotoxicity is determined by loss of colony-forming ability. Experiments are performed in triplicate. Crystal violet stained colonies are imaged with a CCD camera and counted using NIH Image software. Error bars denote standard error.

Kinase-Assay:^{^[1]}

DNA-Bindungsassays
Alle Reaktionen werden in schwarzen, nicht bindenden Polystyrol-384-Well-Platten mit Reaktionsvolumina von 30–100 μL durchgeführt. Gereinigte DNA-Strangaustauschproteine und chemische Verbindungen werden 5 Minuten lang bei Raumtemperatur vorinkubiert; anschließend werden sie weitere 30 Minuten bei 37 °C mit 100 nM ssDNA-Substrat inkubiert, das aus einem 45-mer Poly-dT besteht, das am 5'-Terminus mit Alexa 488 markiert ist (synthetisiert und gereinigt von Integrated DNA Technologies). Die Reaktionen werden in 20 mM HEPES pH 7,5, 10 mM MgCl₂, 0,25 μM BSA, 2 % Glycerin, 30 mM NaCl, 4 % DMSO und 2 mM ATP durchgeführt. Einige Bedingungen enthielten DTT oder TCEP (Tris(2-carboxyethyl)phosphin), wie angegeben. Die DNA-Bindung wird als Funktion der Fluoreszenzpolarisation (FP) mit einem Safire2-Plattenlesegerät gemessen, wobei die folgenden Einstellungen verwendet werden: Anregung 470±5nm, Emission 530±5nm, 10 Messungen/Well, Z-Höhe und G-Faktor automatisch aus Kontrollwells kalibriert. Die angezeigten Fehlerbalken stellen die Standardabweichung dar. Für Experimente, die eine Titration von Proteinkonzentrationen beinhalten, werden die Daten an eine Gleichung angepasst, die die kooperative Natur berücksichtigt, mit der Rekombinaseproteine DNA binden. Für Experimente, die eine Titration dieser Verbindung beinhalten, werden Proteinkonzentrationen so gewählt, dass eine Sättigung des FP-Signals von ∼80 % in Abwesenheit dieser Chemikalie erreicht wird.

Zell-Assay:^{^[1]}

Zelllinien
HeLa, MCF-7 and U2OS cells
Konzentrationen
~35 μM
Inkubationszeit
24 hours
Methode
Cytotoxicity is determined by loss of colony-forming ability. Experiments are performed in triplicate. Crystal violet stained colonies are imaged with a CCD camera and counted using NIH Image software. Error bars denote standard error.

Referenzen

https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/22573178/
https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/23874869/
[4] Pereira M, et al. Prog Neuropsychopharmacol Biol Psychiatry. 2011, 35(7), 1636-1644.

Kundenproduktvalidierung

: Daten von [ , , Biomed Pharmacother, 2017, 94:165-168 ]

Sellecks RI-1 Wurde zitiert von 21 Publikationen

Combined MEK and PARP inhibition enhances radiation response in rectal cancer [ Cell Rep Med, 2025, 6(8):102284]	PubMed: 40782795
Low-dose ionizing radiation-induced RET/PTC1 rearrangement via the non-homologous end joining pathway to drive thyroid cancer [ MedComm (2020), 2024, 5(8):e690]	PubMed: 39135916
Amodiaquine ameliorates stress-induced premature cellular senescence via promoting SIRT1-mediated HR repair [ Cell Death Discov, 2024, 10(1):434]	PubMed: 39394181
Short-Term Starvation Weakens the Efficacy of Cell Cycle Specific Chemotherapy Drugs through G1 Arrest [ Int J Mol Sci, 2023, 24(3)2498]	PubMed: 36768821
DNA‑PKcs phosphorylation specific inhibitor, NU7441, enhances the radiosensitivity of clinically relevant radioresistant oral squamous cell carcinoma cells [ Biomed Rep, 2023, 18(4):28]	PubMed: 36926187
U2AF1 mutation connects DNA damage to the alternative splicing of RAD51 in lung adenocarcinomas [ Clin Exp Pharmacol Physiol, 2022, 10.1111/1440-1681.13646]	PubMed: 35434831
CRIP1 cooperates with BRCA2 to drive the nuclear enrichment of RAD51 and to facilitate homologous repair upon DNA damage induced by chemotherapy [ Oncogene, 2021, 10.1038/s41388-021-01932-0]	PubMed: 34262130
A non-genetic, cell cycle-dependent mechanism of platinum resistance in lung adenocarcinoma [ Elife, 2021, 10e65234]	PubMed: 33983115
The Valproate Mediates Radio-Bidirectional Regulation Through RFWD3-Dependent Ubiquitination on Rad51 [ Front Oncol, 2021, 11:646256]	PubMed: 33842359
Upregulation of FoxO6 in nucleus pulposus cells promotes DNA damage repair via activation of RAD51 [ Eur Rev Med Pharmacol Sci, 2021, 25(17):5392-5401]	PubMed: 34533813

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