Rimonabant (SR141716)

Rimonabant (SR141716) reduziert dosisabhängig die ACAT-Aktivität in Raw264.7-Makrophagen mit einer IC50 von 2,9 M und in isolierten Peritonealmakrophagen. Es hemmt die ACAT-Aktivität in intakten CHO-ACAT1- und CHO-ACAT2-Zellen sowie in zellfreien Assays mit annähernd gleicher Effizienz mit einer IC50 von 1,5 M für CHO-ACAT1 bzw. 2,2 M für CHO-ACAT2. Konsistent mit der ACAT-Hemmung blockiert diese Verbindung ACAT-abhängige Prozesse in Makrophagen, Oxysterol-induzierte Apoptose und Acetyliertes-LDL-induzierte Schaumzellbildung. [2] Es antagonisiert die hemmenden Wirkungen von Cannabinoid Receptor-Agonisten sowohl auf Kontraktionen des Maus-Vas deferens als auch auf die Adenylylcyclase-Aktivität in Rattenhirnmembranen auf eine konzentrationsabhängige Weise. [3] Die Verbindung reduziert signifikant das Zellwachstum und induziert den Zelltod menschlicher kolorektaler Krebszellen (DLD-1, CaCo-2 und SW620). Sie ist in der Lage, die Zellzyklusverteilung in allen getesteten Zelllinien zu verändern. Insbesondere bewirkt Rimonabant einen G2/M-Zellzyklusarrest in DLD-1-Zellen, ohne Apoptose oder Nekrose zu induzieren. [4]

Rimonabant (SR141716) wird intraperitoneal oder oral verabreicht und antagonisiert potent und dosisabhängig klassische pharmakologische und Verhaltenswirkungen von Cannabinoid Receptor-Agonisten. [3] Im Mausmodell der Azoxymethan-induzierten Kolonkarzinogenese verringerte es signifikant die Bildung aberranter Kryptenherde (ACF), die dem kolorektalen Karzinom vorausgehen. [4] Diese Verbindung (10 mg/kg per Magensonde) wird 2 Wochen lang 3 Monate alten männlichen übergewichtigen Zucker-Ratten als Modell für eine gestörte Glukosetoleranz und 10 Wochen lang 6 Monate alten männlichen übergewichtigen Zucker-Ratten als Modell für das metabolische Syndrom verabreicht. Die Serumspiegel von RANTES (Regulated upon Activation, Normal T cell Expressed, and Secreted) und MCP-1 (monocyte chemotactic protein-1) sind bei übergewichtigen im Vergleich zu mageren Zucker-Ratten erhöht und werden durch eine Langzeitbehandlung damit signifikant reduziert, was die Gewichtszunahme bei Ratten mit metabolischem Syndrom verlangsamt. Neutrophile und Monozyten sind bei jungen und alten übergewichtigen im Vergleich zu mageren Zucker-Ratten signifikant erhöht und werden durch diese Verbindung gesenkt. Plättchengebundenes Fibrinogen ist bei übergewichtigen im Vergleich zu mageren Zucker-Ratten beider Altersgruppen signifikant erhöht und wird durch diese Verbindung reduziert. Blutplättchen von übergewichtigen Ratten sind empfindlicher gegenüber Thrombin-induzierter Aggregation und Adhäsion an Fibrinogen, die beide durch die Rimonabant-Therapie abgeschwächt werden. [5]

• Radioliganden-Bindungsassay

  Menschliche CB1- und CB2-Zellen werden stabil in HEK 293-Zellen transfiziert, und die Zellmembran wird gereinigt. 0,2-8 g der gereinigten Membran werden mit 0,75 nM [³H] CP55,940 und Rimonabant (SR141716) in Inkubationspuffer (50 mM Tris-HCl, 5 mM MgCl₂, 1 mM EDTA, 0,3% BSA, pH 7,4) inkubiert. Die unspezifische Bindung wird in Gegenwart von 1 M CP55,940 definiert. Die Reaktionen werden anderthalb Stunden bei 30 °C in Multiscreen inkubiert. Die Reaktionen werden durch Manifold-Filtration beendet und viermal mit eiskaltem Waschpuffer (50mM Tris, pH 7,4, 0,25% BSA) gewaschen. Die an die Filter gebundene Radioaktivität wird mit Topcount gemessen. Die IC50 wird als die Konzentration dieser Verbindung bestimmt, die erforderlich ist, um 50% der Bindung von [³H] CP55,940 zu hemmen, und durch nichtlineare Regression berechnet.

• Zelllinien

  Raw 264.7 cells

• Konzentrationen

  0,1,4 μM

• Inkubationszeit

  17 hours

• Methode

  Raw 264.7 cells (2 × 10⁶ /well) in 12-well plates are rinsed with PBS and refed culture media supplemented with varying amounts of Rimonabant (SR141716). One hour prior to supplementation with 7-ketocholesterol (7KC), this compound is introduced. All wells are adjusted to receive equal amounts of vehicle. Following 16-hour incubation, caspase-3 and caspase 3-like activity are determined using a fluorogenic substrate (Ac-DEVD-AFC) and a spectrofluorometer equipped with a microplate reader.

• Tiermodelle

  Male mice and male rats

• Dosierungen

  20 ml/kg (mice) and 5 ml/kg (rats)

• Verabreichung

  Rimonabant is administered i.p. (30 minutes) or p.o. (1hour) before the i.v. injection of WIN55212-2.