In vivo (Lösungsmittel einzeln und der Reihe nach zum Produkt hinzufügen.)
Homogeneous suspension
CMC-NA
≥5mg/ml
Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Clear solution
5%DMSO
40%PEG300
5%Tween80
50%ddH2O
Validiert von Selleck Labs. Sollten Sie Anpassungen an dieser Formulierung benötigen, wenden Sie sich an unser Vertriebsteam für kundenspezifische Tests.
5.000mg/ml
(9.03mM)
Taking the 1 mL working solution as an example, add 50 μL of 100 mg/ml clarified DMSO stock solution to 400 μL of PEG300, mix evenly to clarify it; add 50 μL of Tween80 to the above system, mix evenly to clarify; then continue to add 500 μL of ddH2O to adjust the volume to 1 mL. The mixed solution should be used immediately for optimal results.
Clear solution
5% DMSO
95% Corn oil
Validiert von Selleck Labs. Sollten Sie Anpassungen an dieser Formulierung benötigen, wenden Sie sich an unser Vertriebsteam für kundenspezifische Tests.
0.410mg/ml
(0.74mM)
Taking the 1 mL working solution as an example, add 50 μL of 8.2 mg/ml clear DMSO stock solution to 950 μL of corn oil and mix evenly. The mixed solution should be used immediately for optimal results.
* <1 mg/ml bedeutet schwer löslich oder unlöslich. * Bitte beachten Sie, dass Selleck die Löslichkeit aller Verbindungen intern testet und die tatsächliche Löslichkeit geringfügig von veröffentlichten Werten abweichen kann. Dies ist normal und ist auf geringfügige Batch-zu-Batch-Variationen zurückzuführen. * Versand bei Raumtemperatur (Stabilitätstests zeigen, dass dieses Produkt ohne Kühlmaßnahmen versendet werden kann.)
Vorbereitung von Stammlösungen
Biologische Aktivität
Beschreibung
Bisindolylmaleimide IX (Ro 31-8220 Mesylate) ist ein Pan-PKC-Inhibitor mit IC50 von 5 nM, 24 nM, 14 nM, 27 nM und 24 nM für PKC-α, PKC-βI, PKC-βII, PKC-γ und PKC-ε bzw. und zeigt auch eine potente Hemmung gegen MAPKAP-K1b, MSK1, GSK3β und S6K1.
Ziele
PKCα (Cell-free assay)
PKCβ2 (Cell-free assay)
PKCβ1 (Cell-free assay)
PKCε (Cell-free assay)
PKCγ (Cell-free assay)
5 nM
14 nM
24 nM
24 nM
27 nM
In vitro
Ro 31-8220 hemmt die PKC-Aktivität im Rattenhirn mit einer IC50 von 23 nM und zeigt keine hohe Selektivität zwischen PKC-α, PKC-β, PKC-γ und PKC-ε. Ro 31-8220 hemmt auch MSK1, MAPKAPK1, RSK, GSK3β und S6K1 mit einer ähnlichen Potenz wie für PKC. Darüber hinaus hemmt Ro 31-8220 spannungsabhängige Na+-Kanäle. Ro 31-8220 verändert die zelluläre Proteinkinase-C-Lokalisation und hemmt das Wachstum von A549- und MCF-7-Zellen potent mit einer IC50 von 0,78 μM bzw. 0,897 μM. RO 31-8220 verstärkt die Epinephrin-induzierte Plättchenaggregation in Katecholamin-hyporesponsiven Plättchen durch die Verstärkung der Akt-Phosphorylierung. Ro 31-8220 verringert die ApoE-Sekretion aus primären menschlichen Makrophagen signifikant, indem es den vesikulären Transport von ApoE zur Plasmamembran hemmt, ohne die ApoE-mRNA- oder ApoE-Proteinspiegel signifikant zu beeinflussen.
In vivo
Bei MLP−/−-Mäusen führt Ro 31-8220 (6 mg/kg/d, s.c.) zu einer signifikanten Zunahme der kardialen Kontraktilität.
Die Assay-Mischungen enthalten 0,2 mg/mL Peptid-gamma, 10 μM MgCl2, 0,6 mM CaCl2, 10 μM [γ-32P]ATP, 1,25 mg/mL Phosphatidylserin und 1,25 ng/mL Phorbol-12-myristat-13-acetat in 20 mM Hepes (pH 7,5), 2 mM EDTA, 1 mM Dithiothreit und 0,02 % (w/v) Triton X-100. Peptid-γ ist ein synthetisches Peptid, GPRPLFCRKGSLRQKW, das der PKC-γ-Pseudosubstratstelle ähnelt, außer dass ein Serinrest das Pseudosubstrat-Alanin ersetzt, wodurch das Peptid von einem Inhibitor in ein Substrat umgewandelt wird. Die Assays werden durch Zugabe von 2,5 m-Einheiten Enzym gestartet, 10 Minuten bei 30 °C inkubiert und durch Auftragen auf P81-Papier beendet, gefolgt von ausgiebigem Waschen in 75 mM Orthophosphorsäure. Die Papiere werden dann in Ethanol gewaschen, getrocknet, und die inkorporierte Radioaktivität wird mittels Flüssigszintillationsspektroskopie bestimmt.
Human A549 lung and MCF-7 breast carcinoma cells are obtained from the European Collection of Animal Cell Cultures. Cells (passage number 10-30) are cultured in an atmosphere of 5% carbon dioxide, the former in Ham's F-12 medium with penicillin/streptomycin, the latter in minimum essential medium (Eagle's modification) with additional pyruvate (1 mM) and non-essential amino acids. Both media are supplemented with 10% FCS and glutamine (2 mM). Cells are subcultured routinely twice weekly to maintain logarithmic growth. For cell proliferation studies cells are seeded and incubated with 3 ml of medium including agents, which is replenished at intervals of 48 h (A549) or 72 h (MCF-7). Following incubation for 4 days (A549) or 6 days (MCF-7) with drugs, cell number is assessed using a Coulter Counter Model ZM. In order to achieve PKC depletion, cells are incubated for 24 h with bryostatin 1 (1 μM). Under these conditions growth inhibition caused by bryostatin 1 is negligible. Bryostatin is removed by extensive washing of the cells followed by a 2 h recovery period. In previous work using the A549 cell line this washing procedure has been shown to eliminate bryostatin-mediated effects. The cells are then incubated for a further 24 h with staurosporine, RO 31-8220, UCN-01 or H-7. In some experiments cells are incubated with inhibitor for 48 rather than 24 h, in this case bryostation was not removed and left in the incubate. After removal of agents inhibition of DNA synthesis is evaluated by measurement of [3H]Tdr incorporation into cell. Radioactivity is counted using a Packard 1500 Tricarb scintillation counter.
Alternative splicing of HDAC7 regulates its interaction with 14-3-3 proteins to alter histone marks and target gene expression
[ Cell Rep, 2023, 42(3):112273]
Naturally-derived diterpenoid sphaeropsidin C as an activator of Nrf2/ARE pathway and its potential capability of relieving intracellular oxidative stress in human lung epithelial cells.
[ Biomed Pharmacother, 2020, 121:109669]
RÜCKGABERICHTLINIE
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