S100A9 + Calprotectin (S100A8/A9 complex) Antibody [P14P6]

Katalog-Nr. F1711

Drucken

Biologische Beschreibung

Spezifität

S100A9 + Calprotectin (S100A8/A9 complex) Antibody [P14P6] detektiert endogene Spiegel des gesamten S100A9 + Calprotectin (S100A8/A9 complex) Proteins.
Hintergrund S100A9 + Calprotectin (S100A8/A9 complex), auch bekannt als Myeloid-bezogene Proteine MRP8/MRP14, ist ein Ca²⁺-bindender heterodimerer Komplex, bestehend aus S100A8 und S100A9, beides Mitglieder der S100-Proteinfamilie. Es wird vorwiegend in Neutrophilen, Monozyten und anderen Immunzellen exprimiert, wobei seine Expression unter entzündlichen und Stressbedingungen induziert wird. Strukturell enthält jede Untereinheit zwei EF-Hand-Ca²⁺-Bindedomänen (niederaffine N-terminale und hochaffine C-terminale), die durch eine Scharnierregion verbunden sind und stabile Heterodimere oder funktionelle Tetramere bilden. Funktionell spielt S100A8/A9 vielfältige Rollen in der angeborenen Immunität und Entzündung, indem es die Leukozyten-Chemotaxis, Phagozyten-Migration, Mikrotubuli-Polymerisation, die Produktion reaktiver Sauerstoffspezies und die Zytokin-Freisetzung reguliert. Es bindet auch an Rezeptoren wie TLR4 und RAGE und aktiviert nachgeschaltete Signalwege wie MAPKs, PI3K/Akt, NF-κB und mTOR. Bei Krebs moduliert S100A8/A9 das Tumorwachstum, die Metastasierung, die Apoptose, die Arzneimittelresistenz und die Prognose, was es zu einem vielversprechenden Biomarker und therapeutischen Ziel macht.

Nutzungsinformationen

Anwendung IHC Verdünnung
IHC
1:1000
Reaktivität Human
Quelle Mouse Monoclonal Antibody MW
Lagerpuffer PBS, pH 7.2+50% Glycerol+0.05% BSA+0.01% NaN3
Lagerung
(Ab dem Datum des Erhalts)		 -20°C (avoid freeze-thaw cycles), 2 years
IHC
Experimental Protocol：
 
Deparaffinization/Rehydration
1. Deparaffinize/hydrate sections:
2. Incubate sections in three washes of xylene for 5 min each.
3. Incubate sections in two washes of 100% ethanol for 10 min each.
4. Incubate sections in two washes of 95% ethanol for 10 min each.
5. Wash sections two times in dH2O for 5 min each.
6.Antigen retrieval: For Citrate: Heat slides in a microwave submersed in 1X citrate unmasking solution until boiling is initiated; continue with 10 min at a sub-boiling temperature (95°-98°C). Cool slides on bench top for 30 min.
 
Staining
1. Wash sections in dH2O three times for 5 min each.
2. Incubate sections in 3% hydrogen peroxide for 10 min.
3. Wash sections in dH2O two times for 5 min each.
4. Wash sections in wash buffer for 5 min.
5. Block each section with 100–400 µl of blocking solution for 1 hr at room temperature.
6. Remove blocking solution and add 100–400 µl primary antibody diluent in to each section. Incubate overnight at 4°C.
7. Remove antibody solution and wash sections with wash buffer three times for 5 min each.
8. Cover section with 1–3 drops HRPas needed. Incubate in a humidified chamber for 30 min at room temperature.
9. Wash sections three times with wash buffer for 5 min each.
10. Add DAB Chromogen Concentrate to DAB Diluent and mix well before use.
11. Apply 100–400 µl DAB to each section and monitor closely. 1–10 min generally provides an acceptable staining intensity.
12. Immerse slides in dH2O.
13. If desired, counterstain sections with hematoxylin.
14. Wash sections in dH2O two times for 5 min each.
15. Dehydrate sections: Incubate sections in 95% ethanol two times for 10 sec each; Repeat in 100% ethanol, incubating sections two times for 10 sec each; Repeat in xylene, incubating sections two times for 10 sec each.
16. Mount sections with coverslips and mounting medium.
 

Referenzen

  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/37701037/

Anwendungsdaten

IHC

Validiert von Selleck

  • F1711-IHC1
    Immunohistochemical analysis of formalin fixed paraffin embedded human tonsils tissue with F1711 at 1:1000 dilution.