SB202190

SB 202190 hemmt sowohl die basale als auch die durch Anti-Fas-Antikörper induzierte MAPKAPK 2-Aktivität dosisabhängig. Diese Verbindung allein reicht aus, um den Zelltod in Jurkat- und HeLa-Zellen durch Aktivierung von CPP32-ähnlichen Caspasen zu induzieren, was durch die Expression von bcl-2 blockiert werden kann. Seine Apoptose wird durch p38β abgeschwächt, aber durch p38α verstärkt. [2] Die Chemikalie hemmt stark die UVB-induzierte COX-2-Proteinexpression in HaCaT-Zellen und hemmt deutlich die UVB-induzierte cox-2-mRNA. [3] Die Behandlung mit diesem Inhibitor hemmt die Expression von Albumin-induzierten proinflammatorischen (Monozyten-Chemoattraktionsprotein-1) und Transforming Growth Factor (TGF)-beta1-induzierten profibrotischen (Prokollagen-Ialpha1) Genen um über 50% in Nierentubuluszellen (normale Rattenniere-52E). [4] Es induziert die Phosphorylierung von JNK dosis- und zeitabhängig in A549-Zellen, induziert die Phosphorylierung des ATF-2-Transkriptionsfaktors und erhöht die AP-1-DNA-Bindung. [6] Dieses Mittel verbessert das Wachstum von THP-1- und MV4-11-Zellen. Es erhöht die Phosphorylierung von c-Raf und ERK, was darauf hindeutet, dass die Aktivierung des Ras-Raf-MEK-Mitogen-aktivierten Proteinkinase (MAPK)-Signalwegs am Leukämiezellwachstum beteiligt ist, das durch diese Verbindung induziert wird. [7]

Die Hemmung von p38 durch die Verabreichung von SB 202190 hemmt die PV-IgG-induzierte Blasenbildung im passiven Transfer-Mausmodell. [5] Im Endotoxinmodell der Sepsis führt die Behandlung mit dieser Verbindung zu einem statistisch signifikanten Überlebensvorteil im Vergleich zur Kontrolle. [8]

• In-vitro-Kinase-Assays

  Die p38α und p38β werden in 25 mM Tris-HCl, pH 7,5, das 0,1 mM EGTA enthält, mit Myelin-Basischem Protein (0,33 mg/mL) als Substrat getestet. Die Assays werden entweder manuell für 10 Minuten bei 30 °C in 50 μL Inkubationen unter Verwendung von [γ-³³P]ATP durchgeführt, oder mit einer Biomek 2000 Laborautomatisierungs-Workstation in einem 96-Well-Format für 40 Minuten bei Umgebungstemperatur in 25 μL Inkubationen unter Verwendung von [γ-³³P]ATP. Die Konzentrationen von ATP und Magnesiumacetat betragen jeweils 0,1 mM und 10 mM. Alle Assays werden mit MgATP initiiert. Manuelle Assays werden durch Auftragen von Inkubationsaliquots auf Phosphozellulosepapier und anschließendes Eintauchen in 50 mM Phosphorsäure beendet. Robotergestützte Assays werden durch Zugabe von 5 μL 0,5 M Phosphorsäure beendet, bevor Aliquots auf P30-Filtermatten aufgetragen werden. Alle Papiere werden dann viermal in 50 mM Phosphorsäure gewaschen, um ATP zu entfernen, einmal in Aceton (manuelle Inkubationen) oder Methanol (robotergestützte Inkubationen), und dann getrocknet und auf Radioaktivität gezählt.

• Zelllinien

  Jurkat, and HeLa

• Konzentrationen

  Dissolved in DMSO, final concentrations ~50 μM

• Inkubationszeit

  24 hours

• Methode

  Cells are serum-starved and then treated with different concentration of SB 202190 for 24 hours. Cell viability is assayed by either trypan blue exclusion or propidium iodide exclusion followed by flow cytometry analysis. The apoptotic nuclei are visualized by H33258 staining.

• Tiermodelle

  C57BL/6J mice injected i.d. with a sterile solution of either control IgG or PV IgG

• Dosierungen

  12.5 μg

• Verabreichung

  Administered via i.d.