SU9516

Katalog-Nr.S7636 Charge:S763601

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Technische Daten

Formel

C₁₃H₁₁N₃O₂

Molekulargewicht

241.25

CAS-Nr.

377090-84-1

Löslichkeit (25°C)*

In vitro

DMSO

48 mg/mL (198.96 mM)

Ethanol

12 mg/mL (49.74 mM)

Water

Insoluble

In vivo (Lösungsmittel einzeln und der Reihe nach zum Produkt hinzufügen.)

Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Clear solution	5%DMSO 1 40%PEG300 2 5%Tween80 3 50%ddH2O Validiert von Selleck Labs. Sollten Sie Anpassungen an dieser Formulierung benötigen, wenden Sie sich an unser Vertriebsteam für kundenspezifische Tests.	2.400mg/ml (9.95mM)	Taking the 1 mL working solution as an example, add 50 μL of 48 mg/ml clarified DMSO stock solution to 400 μL of PEG300, mix evenly to clarify it; add 50 μL of Tween80 to the above system, mix evenly to clarify; then continue to add 500 μL of ddH2O to adjust the volume to 1 mL. The mixed solution should be used immediately for optimal results.
Clear solution	5% DMSO 1 95% Corn oil Validiert von Selleck Labs. Sollten Sie Anpassungen an dieser Formulierung benötigen, wenden Sie sich an unser Vertriebsteam für kundenspezifische Tests.	0.340mg/ml (1.41mM)	Taking the 1 mL working solution as an example, add 50 μL of 6.8 mg/ml clear DMSO stock solution to 950 μL of corn oil and mix evenly. The mixed solution should be used immediately for optimal results.

* <1 mg/ml bedeutet schwer löslich oder unlöslich.
* Bitte beachten Sie, dass Selleck die Löslichkeit aller Verbindungen intern testet und die tatsächliche Löslichkeit geringfügig von veröffentlichten Werten abweichen kann. Dies ist normal und ist auf geringfügige Batch-zu-Batch-Variationen zurückzuführen.
* Versand bei Raumtemperatur (Stabilitätstests zeigen, dass dieses Produkt ohne Kühlmaßnahmen versendet werden kann.)

Vorbereitung von Stammlösungen

Biologische Aktivität

Beschreibung

SU 9516 ist ein 3-substituierter Indolinon-CDK-Inhibitor mit IC50-Werten von 22 nM, 40 nM und 200 nM für CDK2, CDK1 bzw. CDK4.

Ziele

CDK2	CDK1	CDK4
22 nM	40 nM	200 nM

In vitro

SU9516 verringert die cdk2-spezifische Phosphorylierung des Retinoblastom-Proteins pRB, erhöht die Caspase-3-Aktivierung und verändert den Cell Cycle in RKO- und SW480-Zellen. Diese Verbindung hemmt auch die Zellproliferation und induziert die Zellapoptose in beiden Zelllinien. Es tötet Leukämiezellen durch Hemmung der RNA Pol II CTD-Phosphorylierung, oxidative Schäden und transkriptionelle Herunterregulierung von Mcl-1. In menschlichen T-Zell-Leukämie-Jurkat-Zellen erhöht diese Chemikalie die Empfindlichkeit gegenüber Methotrexat erheblich. Darüber hinaus unterdrückt es auch die Aurora-A-Zentrosomenlokalisation und die daraus folgende Zentrosomenamplifikation.

Protokoll (aus Referenz)

Kinase-Assay:^{^[1]}	CDK-Kinase-Assay Kinase-Assays werden in 96-Well-Polypropylenplatten durchgeführt. Jede Reaktion enthielt 2 μg Histon H1 bei einer Endkonzentration von 10 μM [γ-³³P]ATP (0,2 μCi/Well; etwa das Zweifache des experimentell bestimmten Km), 10 mM MgCl₂, 1 mM DTT, 0,01 % Triton X-100 und 10 % Glycerin in einem Volumen von 40 μL. Die Reaktion wird durch Zugabe von 20 μL Enzym (6 ng cdk2/Well, was zu einer Endkonzentration von 1,6 nM führt) initiiert, das zuvor 1:50–1:200 im gleichen Puffer verdünnt wurde, und 1 Stunde bei Raumtemperatur inkubiert. Die Reaktion wird durch Zugabe von 0,01 mL 10 %iger Phosphorsäure gestoppt, und 25 μL des Reaktionsgemisches werden auf P30-Phosphocellulose-Filterpapier übertragen. Die Filtermatte wird dreimal mit 1,0 %iger Phosphorsäure gewaschen, luftgetrocknet und dann die Radioaktivität in einem Flüssigszintillationszähler gemessen. Der cdk4-Kinase-Assay für Cyclin D1-cdk4 wird in einem 96-Well-Polypropylen-Mikrotiterplattenformat durchgeführt, wobei die Inkorporation von radioaktivem Phosphat in GST-Rb gemessen wird. Gereinigtes Cyclin D1-cdk4 wird mit 1 μg GST-Rb in 20 mM HEPES (pH 7,5) in Gegenwart von 10 mM MgCl₂, 1 mM DTT, 0,01 % Triton X-100 und 10 % Glycerin inkubiert. Die finale cdk4-Konzentration beträgt 10 ng/Well oder 1,6 nM. Die Kinase-Reaktion wird durch Zugabe von ATP in einer Endkonzentration von 10 μM ATP (zweifache des experimentell bestimmten Km) und [γ-³³P]ATP (1,0 μCi pro Well) in einem Volumen von 60 μL initiiert und 1 Stunde bei Raumtemperatur inkubiert. Die Reaktion wird durch Zugabe von 0,01 ml 10 %iger Phosphorsäure gestoppt, und 25 μL des Reaktionsgemisches werden auf P30-Phosphocellulose-Filterpapier übertragen. Die Filtermatte wird wie bei den Cdk1/Cdk2-Assays behandelt.
Zell-Assay:^{^[1]}	Zelllinien RKO cells and SW480 cells Konzentrationen 24 hours Inkubationszeit ~50 μM Methode RKO cells and SW480 cells are seeded in replicates in 96-well plates at 1 × 10⁴ cells/well and allowed to attach overnight. SU9516 is added in concentrations from 0.05 μM to 50.00 μM for 24 h, the cells are then washed twice with PBS, and cells are replenished with complete media. The cells are fixed at 0, 4, and 7 days post-drug removal and assayed for protein levels using a modified SRB cytotoxicity assay. The cells are fixed in 10% trichloroacetic acid for 1 h, washed in distilled H2O, and stained in 0.4% SRB/acetic acid for 30 min. The cells are then washed in 0.1% acetic acid, solubilized in 10 mM Tris (pH 9), and analyzed on a Bio-Rad 360 microplate reader at 595 nm. All experiments are repeated at least three times.

Kinase-Assay:^{^[1]}

CDK-Kinase-Assay
Kinase-Assays werden in 96-Well-Polypropylenplatten durchgeführt. Jede Reaktion enthielt 2 μg Histon H1 bei einer Endkonzentration von 10 μM [γ-³³P]ATP (0,2 μCi/Well; etwa das Zweifache des experimentell bestimmten Km), 10 mM MgCl₂, 1 mM DTT, 0,01 % Triton X-100 und 10 % Glycerin in einem Volumen von 40 μL. Die Reaktion wird durch Zugabe von 20 μL Enzym (6 ng cdk2/Well, was zu einer Endkonzentration von 1,6 nM führt) initiiert, das zuvor 1:50–1:200 im gleichen Puffer verdünnt wurde, und 1 Stunde bei Raumtemperatur inkubiert. Die Reaktion wird durch Zugabe von 0,01 mL 10 %iger Phosphorsäure gestoppt, und 25 μL des Reaktionsgemisches werden auf P30-Phosphocellulose-Filterpapier übertragen. Die Filtermatte wird dreimal mit 1,0 %iger Phosphorsäure gewaschen, luftgetrocknet und dann die Radioaktivität in einem Flüssigszintillationszähler gemessen. Der cdk4-Kinase-Assay für Cyclin D1-cdk4 wird in einem 96-Well-Polypropylen-Mikrotiterplattenformat durchgeführt, wobei die Inkorporation von radioaktivem Phosphat in GST-Rb gemessen wird. Gereinigtes Cyclin D1-cdk4 wird mit 1 μg GST-Rb in 20 mM HEPES (pH 7,5) in Gegenwart von 10 mM MgCl₂, 1 mM DTT, 0,01 % Triton X-100 und 10 % Glycerin inkubiert. Die finale cdk4-Konzentration beträgt 10 ng/Well oder 1,6 nM. Die Kinase-Reaktion wird durch Zugabe von ATP in einer Endkonzentration von 10 μM ATP (zweifache des experimentell bestimmten Km) und [γ-³³P]ATP (1,0 μCi pro Well) in einem Volumen von 60 μL initiiert und 1 Stunde bei Raumtemperatur inkubiert. Die Reaktion wird durch Zugabe von 0,01 ml 10 %iger Phosphorsäure gestoppt, und 25 μL des Reaktionsgemisches werden auf P30-Phosphocellulose-Filterpapier übertragen. Die Filtermatte wird wie bei den Cdk1/Cdk2-Assays behandelt.

Zell-Assay:^{^[1]}

Zelllinien
RKO cells and SW480 cells
Konzentrationen
24 hours
Inkubationszeit
~50 μM
Methode
RKO cells and SW480 cells are seeded in replicates in 96-well plates at 1 × 10⁴ cells/well and allowed to attach overnight. SU9516 is added in concentrations from 0.05 μM to 50.00 μM for 24 h, the cells are then washed twice with PBS, and cells are replenished with complete media. The cells are fixed at 0, 4, and 7 days post-drug removal and assayed for protein levels using a modified SRB cytotoxicity assay. The cells are fixed in 10% trichloroacetic acid for 1 h, washed in distilled H2O, and stained in 0.4% SRB/acetic acid for 30 min. The cells are then washed in 0.1% acetic acid, solubilized in 10 mM Tris (pH 9), and analyzed on a Bio-Rad 360 microplate reader at 595 nm. All experiments are repeated at least three times.

Referenzen

https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/11507069/
https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/16672643/
https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/20059476/

https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/23446853/

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Kundenproduktvalidierung

: Daten von [ , , Biotechnol Lett, 2017, 39(7):951-957 ]

Sellecks SU9516 Wurde zitiert von 5 Publikationen

Combined therapy with DR5-targeting antibody-drug conjugate and CDK inhibitors as a strategy for advanced colorectal cancer [ Cell Rep Med, 2025, S2666-3791(25)00231-9]	PubMed: 40449480
Inactivation of TACC2 epigenetically represses CDKN1A and confers sensitivity to CDK inhibitors [ Med, 2025, S2666-6340(24)00482-3]	PubMed: 39793578
Tip60-mediated H2A.Z acetylation promotes neuronal fate specification and bivalent gene activation [ Mol Cell, 2022, S1097-2765(22)01064-4]	PubMed: 36417913
Differences in the Conformational Energy Landscape of CDK1 and CDK2 Suggest a Mechanism for Achieving Selective CDK Inhibition [ Cell Chem Biol, 2019, 26(1):121-130]	PubMed: 30472117
CDK inhibitor SU9516 induces tetraploid blastocyst formation from parthenogenetically activated porcine embryos. [Guo Q, et al. Biotechnol Lett, 2017, 39(7):951-957]	PubMed: 28315059

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