In vivo (Lösungsmittel einzeln und der Reihe nach zum Produkt hinzufügen.)
Homogeneous suspension
CMC-NA
≥5mg/ml
Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
* <1 mg/ml bedeutet schwer löslich oder unlöslich. * Bitte beachten Sie, dass Selleck die Löslichkeit aller Verbindungen intern testet und die tatsächliche Löslichkeit geringfügig von veröffentlichten Werten abweichen kann. Dies ist normal und ist auf geringfügige Batch-zu-Batch-Variationen zurückzuführen. * Versand bei Raumtemperatur (Stabilitätstests zeigen, dass dieses Produkt ohne Kühlmaßnahmen versendet werden kann.)
Vorbereitung von Stammlösungen
Biologische Aktivität
Beschreibung
Suplatast Tosylate (IPD-1151T, Suplatast Tosilate) ist ein neuartiger kapsulärer Antiasthmatikum, das sowohl die IgE-Produktion als auch die IL-4- und IL-5-Synthese mit einer IC50 von über 100 μM unterdrückt.
Ziele
IL-4 (Cell-free assay)
IL-5 (Cell-free assay)
>100 μM
>100 μM
In vitro
Suplatast Tosylate hat eine hemmende Wirkung auf die Antikörperproduktion in isolierten B-Zellen der Milz von Mäusen und peripheren Blut-B-Zellen von Menschen mit einer IC50 >100 nM. Suplatast Tosylate hemmt die Produktion von Maus- und menschlichen Zytokinen, IFN-γ, IL-2, IL-4, IL-5 und IL-10, mit einer IC50 >100 nM. Die durch SN-4 vermittelte Cryj1-abhängige IgE-Synthese wird in autologen B-Zellen durch Suplatast Tosylate (1 und 10 µg/ml) konzentrationsabhängig unterdrückt. Die IL-4-Produktion, sowohl stimuliert durch SN-4 mit Cryj1 in Anwesenheit von autologen APCs für 3 Tage als auch produziert von PHA-stimulierten PBMCs von normalen Spendern, wird durch Suplatast Tosylate (1 und 10 μg/mL) konzentrationsabhängig wirksam gehemmt. Suplatast Tosylate hemmt signifikant die Expression von CD1a, CD80 und CD86 auf unreifen dendritischen Zellen (DCs) sowie von CD1a, CD80, CD83 und CD86 auf reifen DCs. Suplatast Tosylate hemmt auch signifikant die Sekretion von CCL17, IL-12p70 und IL-12p40; die Sekretion von IL-10 wird jedoch nicht beeinflusst. Die proliferativen Reaktionen allogener CD4(+) T-Zellen auf mit Suplatast Tosylate behandelte DCs werden unterdrückt. Darüber hinaus haben mit Suplatast Tosylate behandelte DCs eine eingeschränkte Fähigkeit, CD4(+) T-Zellen zur Produktion von IFN-gamma und IL-5 zu stimulieren.
In vivo
Suplatast Tosylate (100 mg/kg/100 μL) reduziert signifikant die Anzahl der Gesamtzellen und Eosinophilen in BALF (ungefähr -40 %) und hemmt fast vollständig die Entwicklung der Antigen-induzierten BHR. Histologische Befunde bestätigen die Reduktion der submukosalen Zellinfiltration in der Lunge und zeigen eine deutliche Hemmung der bronchialen Epithelzellschädigung. Ovalbumin-spezifisches IgE ist leicht, aber signifikant reduziert. Die Spiegel von IL-4, IL-5 und IL-13 in BALF sind bei Mäusen, die mit Suplatast Tosylate behandelt wurden, im Vergleich zu unbehandelten Mäusen signifikant erniedrigt.
Die Kulturen für die Zytokinproduktion werden bei 37 °C wie folgt angesetzt: Die Mischungen aus SN-4 und autologen APC (jeweils 1 × 105 Zellen/Well) werden 3 Tage lang mit 50 μg/mL Cry j1 in einem Gesamtvolumen von 0,2 mL in Rundboden-Mikroplatten kultiviert; PBMCs (2 × 105 Zellen/Well) von normalen Spendern werden 24 Stunden lang mit 10 μg/ml PHA in einem Gesamtvolumen von 0,2 mL in Flachboden-96-Well-Mikroplatten kultiviert; und gereinigte T-Zellen (1 × 105 Zellen/Well) von normalen Spendern werden in einem Gesamtvolumen von 1 ml für 24 Stunden mit anti-CD3 mAb kultiviert, die auf Flachboden-24-Well-Platten in einer Konzentration von 5 µg/ml immobilisiert wurden. Zytokine in den Kulturüberständen werden quantitativ mit den folgenden kommerziell erhältlichen Kits bestimmt: IL-4 und IFN-γ. Die Empfindlichkeit des Assays beträgt 30 pg/mL für IL-4 und 1 U/mL für IFN-γ.
Allogeneic responder CD4+ T cells obtained from healthy subjects are purified from PBMCs by negative depletion of CD14+, CD16+, CD19+, CD56+, and CD8+ cells using magnetic cell separation system micro-beads and columns. After 7 days of culture with GM-CSF and IL-4, iDCs differentiated from monocytes in the presence or absence of Suplatast tosilate (10 and 100 mg/ mL) are co-cultured with purified 1×10 5 allogeneic CD41 T cells at varying ratios of iDCs in 96-well round bottomed culture plates for 5 days. Cells are pulsed with 1 μCi of 3H-methylthymidine for the last 8 hours of the culture period. Incorporated radioactivity is counted with a liquid scintillation counter, and proliferative responses are expressed as the mean 3 H-methylthymidine incorporation (counts per minutes) of triplicate wells_SEM. Proliferation of DCs alone or CD4+ T cells alone is also assessed.
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