TAK-632

Katalog-Nr.S7291 Charge:S729101

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Technische Daten

Formel

C27H18F4N4O3S
Molekulargewicht 554.52 CAS-Nr. 1228591-30-7
Löslichkeit (25°C)* In vitro DMSO 100 mg/mL (180.33 mM)
Ethanol 2 mg/mL (3.6 mM)
Water Insoluble
In vivo (Lösungsmittel einzeln und der Reihe nach zum Produkt hinzufügen.)
Homogeneous suspension
CMC-NA
≥5mg/ml Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
* <1 mg/ml bedeutet schwer löslich oder unlöslich.
* Bitte beachten Sie, dass Selleck die Löslichkeit aller Verbindungen intern testet und die tatsächliche Löslichkeit geringfügig von veröffentlichten Werten abweichen kann. Dies ist normal und ist auf geringfügige Batch-zu-Batch-Variationen zurückzuführen.
* Versand bei Raumtemperatur (Stabilitätstests zeigen, dass dieses Produkt ohne Kühlmaßnahmen versendet werden kann.)

Vorbereitung von Stammlösungen

Biologische Aktivität

Beschreibung TAK-632 ist ein potenter Pan-Raf-Inhibitor mit einer IC50 von 8,3 nM und 1,4 nM für B-Raf(wt) bzw. C-Raf in zellfreien Assays, der eine geringere oder keine Hemmung gegen andere getestete Kinasen zeigt.
Ziele
C-Raf
(Cell-free assay)		 B-Raf
(Cell-free assay)		 Aurora B
(Cell-free assay)		 PDGFRβ
(Cell-free assay)		 FGFR3
(Cell-free assay)		 Mehr anzeigen
1.4 nM 8.3 nM 66 nM 120 nM 280 nM
In vitro TAK-632 hemmt die Phosphorylierung von MEK und ERK in Melanom-A375-Zellen (BRAFV600E) mit einer IC50 von 12 nM bzw. 16 nM. In menschlichen Melanom-HMVII-Zellen (NRASQ61K/BRAFG469V) zeigt diese Verbindung auch eine starke Hemmung von pMEK und pERK mit einer IC50 von 49 nM bzw. 50 nM. Darüber hinaus zeigt sie auch eine antiproliferative Aktivität in sowohl A375- als auch HMVII-Zellen mit einer GI50 von 66 nM bzw. 200 nM. Diese Chemikalie induziert die RAF-Dimerisierung, hemmt jedoch die Kinaseaktivität des RAF-Dimers aufgrund ihrer langsamen Dissoziation von RAF. Die Kombination dieser Verbindung und TAK-733 zeigt synergistische antiproliferative Effekte in BRAF- und NRAS-mutierten Melanomzellen.
In vivo TAK-632 zeigt eine überlegene orale Bioverfügbarkeit sowohl bei Ratten als auch bei Hunden. Diese Verbindung (3,9–24,1 mg/kg, p.o.) zeigt eine dosisabhängige Antitumorwirksamkeit ohne starke Gewichtsabnahme in einem Melanom-A375-(BRAFV600E)-Xenograft-Modell und einem menschlichen Melanom-HMVII-(NRASQ61K/BRAFG469V)-Xenograft bei Ratten. In einem NRAS-mutierten Melanom-SK-MEL-2-Xenograft-Modell zeigt diese Chemikalie (60 oder 120 mg/kg, p.o.) ebenfalls eine potente Antitumorwirksamkeit ohne starke Toxizität.
Merkmale Oral bioverfügbarer Pan-Raf-Inhibitor, der sowohl Wildtyp- als auch mutierte Formen anspricht.

Protokoll (aus Referenz)

Kinase-Assay:

[1]
  • Kinaseprofil-Assay

    Assays für Serin/Threonin-Kinasen unter Verwendung von radiomarkiertem [γ-33P]-ATP werden in 96-Well-Platten durchgeführt. BRAF und c-RAF werden als N-terminal FLAG-markiertes Protein unter Verwendung eines Baculovirus-Expressionssystems exprimiert. Die Reaktionsbedingungen sind für jede Kinase optimiert: BRAF (25 ng/Well Enzym, 1 μg/Well GST-MEK1(K96R), 0,1 μCi/Well [γ-32P]-ATP, Raumtemperatur, 20 min Reaktion); c-RAF (25 ng/Well Enzym, 1 μg/Well GST-MEK1 (K96R), 0,1 μCi/Well [γ-32P]-ATP, Raumtemperatur, 20 min Reaktion). Enzymreaktionen werden in 25 mM HEPES, pH 7,5, 10 mM Magnesiumacetat, 1 mM Dithiothreitol und 0,5 μM ATP, enthaltend eine optimierte Konzentration von Enzym, Substrat und radiomarkiertem ATP, wie oben beschrieben, in einem Gesamtvolumen von 50 μL durchgeführt. Vor der Kinase-Reaktion werden diese Verbindung und das Enzym 5 min lang bei der oben beschriebenen Reaktionstemperatur inkubiert. Die Kinase-Reaktionen werden durch Zugabe von ATP gestartet. Nach der oben beschriebenen Reaktionsdauer werden die Reaktionen durch Zugabe von 10%iger (Endkonzentration) Trichloressigsäure beendet. Die [γ-33P]- oder [γ-32P]-phosphorylierten Proteine werden in GFC-Filterplatten mit einem Cell Harvester filtriert, und dann werden die Platten mit 3%iger Phosphorsäure gewaschen. Die Platten werden getrocknet, gefolgt von der Zugabe von 40 μL MicroScint0. Die Radioaktivität wird mit einem TopCount-Szintillationszähler gezählt.
Zell-Assay:

[1]
  • Zelllinien

    A375 and HMVII cells

  • Konzentrationen

    ~2 μM

  • Inkubationszeit

    72 hours

  • Methode

    The cells are proliferated in appropriate medium (vender recommended) supplemented with 10% heat-inactivated fetal bovine serum (FBS) and antibiotics, in tissue culture dishes placed in a humidified incubator maintained at 37°C in an atmosphere of 5% CO2 and 95% air. The anti-proliferative activity of this compound is determined by treating cell lines with this compound for 3 days, followed by measurement of viable cell number in the Cell Titer-Glo assay. The cells are seeded in a 96-multiwell plate at 1500 to 4000 cells per well in medium containing FBS and cells allowed to sit down overnight. After 18–20 h, this compound at various concentrations by serial dilution are added to the cells and were cultured for 3 days in chamber. After the treatment culture, cellular proliferation is determined by a Cell Titer-Glo Luminescent Cell Viability Assay. In brief, 100 bL/well of Cell Titer-Glo Substrate solution is added to each well and the cells were cultured for an additional 10 minutes (approximately). The chemi-luminescence value is measured using a Luminescence Counter 1420 ARVO MX Light. Concentration response curves are generated by calculating the decrease in chemi-luminescence values in compound-treated samples relative to the vehicle (DMSO) treated controls.
Tierstudie:

[1]
  • Tiermodelle

    Human melanoma A375 (BRAFV600E) xenograft model and human melanoma HMVII (NRASQ61K/BRAFG469V) xenograft model in rats.

  • Dosierungen

    ~24.1 mg/kg

  • Verabreichung

    Oral administration

Referenzen

  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/23906342/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/24121489/

Kundenproduktvalidierung

Graph showing a concentration-dependent response of hypoxia-induced HIF-1α-NanoLuc activity to RAS-RAF-MEK-ERK pathway inhibitors: GDC-0994, PD-184352, selumetinib, TAK632, trametinib, and vemurafenib.

Daten von [ , , Oncotarget, 2016, 7(7):8172-83 ]

Sellecks TAK-632 Wurde zitiert von 34 Publikationen

A structure-based modelling approach identifies effective drug combinations for RAS-mutant acute myeloid leukemia [ bioRxiv, 2025, 2025.04.29.651188] PubMed: 40654850
Cell-specific models reveal conformation-specific RAF inhibitor combinations that synergistically inhibit ERK signaling in pancreatic cancer cells [ Cell Rep, 2024, 43(9):114710] PubMed: 39240715
Hypoxia drives HIF2-dependent reversible macrophage cell cycle entry [ Cell Rep, 2024, 43(7):114471] PubMed: 38996069
HDAC Inhibition Restores Response to HER2-Targeted Therapy in Breast Cancer via PHLDA1 Induction [ Int J Mol Sci, 2023, 24(7)6228] PubMed: 37047202
A Combination of Conformation-Specific RAF Inhibitors Overcome Drug Resistance Brought about by RAF Overexpression [ Biomolecules, 2023, 13(8)1212] PubMed: 37627277
BRAFΔβ3-αC in-frame deletion mutants differ in their dimerization propensity, HSP90 dependence, and druggability [ Sci Adv, 2023, 9(35):eade7486] PubMed: 37656784
Systematic analysis of the MAPK signaling network reveals MAP3K-driven control of cell fate [ Cell Syst, 2022, 13(11):885-894.e4] PubMed: 36356576
Strategies to inhibit FGFR4 V550L-driven rhabdomyosarcoma [ Br J Cancer, 2022, 10.1038/s41416-022-01973-6] PubMed: 36097178
A Systems Biology Approach to Investigate Kinase Signal Transduction Networks That Are Involved in Triple Negative Breast Cancer Resistance to Cisplatin [ J Pers Med, 2022, 12-81277] PubMed: 36013226
Proteasomal down-regulation of the proapoptotic MST2 pathway contributes to BRAF inhibitor resistance in melanoma [ Life Sci Alliance, 2022, 5(10)e202201445] PubMed: 36038253

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