Tariquidar (XR9576)

Tariquidar zeigt eine hochaffine Bindung an P-gp mit einem B_max von 275 pmol/mg. Diese Verbindung zeigt eine nicht-kompetitive Interaktion mit den P-gp-Substraten. Es erhöht die Steady-State-Akkumulation dieser Zytotoxika in CH^rB30-Zellen auf Werte, die in nicht-P-gp-exprimierenden AuxB1-Zellen beobachtet werden, mit einer EC50 von 487 nM. Diese Chemikalie ist in der Lage, die Vanadat-sensitive ATPase-Aktivität von P-gp um 60-70% zu hemmen, mit potenten IC50-Werten von 43 nM. [1] Bei höheren Konzentrationen kann es andere Resistenzmechanismen hemmen. 1 µM dieser Verbindung hebt die ABCG2 (BCRP)-vermittelte Resistenz gegen Camptothecine in vitro auf. [2] Es verstärkt die Zytotoxizität mehrerer Medikamente, einschließlich Doxorubicin; eine vollständige Umkehr der Resistenz wird in Gegenwart von 25-80 nM dieser Chemikalie erreicht. In MC26, einer murinen Kolonkarzinom-Zelllinie mit intrinsischer Chemoresistenz, ist die Doxorubicin-IC50 in Gegenwart von 0,1 µM dieser Verbindung fünfmal niedriger (36 vs. 7 nM). In murinen Mammakarzinom-, humanen kleinzelligen Lungenkarzinom- und humanen Ovarialkarzinom-Zelllinien mit erworbener Chemotherapieresistenz (EMT6/AR1.0, H69/LX4 und 2780 AD) ist die In-vitro-Doxorubicin-IC50 in Gegenwart von 0,1 µM dieser Chemikalie 22-150-fach niedriger. Die P-gp-Hemmung bleibt 23 Stunden nach der Entfernung aus dem Kultursystem bestehen. [3] Es stellte die Zytotoxizität von Doxorubicin im National Cancer Institute (NCI)/ADR^RES multizellulären Tumorsphäroidmodell wieder her, das von der MCF7^WT Brustkrebszelllinie abgeleitet wurde. [4]

Tariquidar (2-8 mg/kg p.o.) verstärkt nachweislich signifikant die Antitumoraktivität von Doxorubicin (5 mg/kg, i.v.) gegen MC26-Mauskolonkarzinome in vivo. In menschlichen Karzinom-Xenotransplantaten stellte die gleichzeitige Verabreichung dieser Verbindung (6-12 mg/kg p.o.) die Antitumoraktivität gegen zwei hochresistente MDR-menschliche Tumor-Xenotransplantate (2780AD, H69/LX4) in Nacktmäusen vollständig wieder her. [3]

• Steady-State-Arzneimittelakkumulationsassay

  Zellen werden in einem Reaktionsvolumen von 1 ml für 60 min bei 37 °C unter 5% CO₂ inkubiert, um den Steady-State zu erreichen. Die Wirkung der Modulatoren XR9576 auf die [³H]-Ligandenakkumulation wird im Konzentrationsbereich von 10^-9 - 10^-6 M untersucht. Diese Verbindung wird aus einer DMSO-Stammlösung zugegeben, die eine finale Lösungsmittelkonzentration von 0,2 % (v/v) ergibt. Nach der Zellernte wird die akkumulierte Substanz mittels Flüssigszintillationszählung gemessen und auf den Zellproteingehalt normalisiert. Diagramme der akkumulierten Menge als Funktion der Modulatorkonzentration werden mit der allgemeinen Dosis-Wirkungs-Gleichung angepasst: Y={(a-b)/(1+(X/c)^d)}+b, wobei: Y=Antwort; a=Anfangsantwort; b=Endantwort; c=EC50-Konzentration; d=Steigungswert; X=Arzneimittelkonzentration.

• Zelllinien

  Murine mammary carcinoma cell line MDR EMT6/AR1.0

• Konzentrationen

  ~100 nM Tariquidar

• Inkubationszeit

  4 days

• Methode

  Cells are seeded into 96-well plates at 800/well, in 100 μL of medium and incubated for 4 h at 37 ℃. Varying concentrations of this compound or solvent control (50 μL/well) are subsequently added and incubated for an additional 1 h before the addition of the cytotoxic drug. The cytotoxic drug (50 μL) is added to give a range of final concentrations in quadruplicate wells. After incubation for an additional 4 days, cell proliferation of adherent cells is assessed using the sulforhodamine B assay.

• Tiermodelle

  Murine colon carcinoma xenografts MC26

• Dosierungen

  8 mg/kg

• Verabreichung

  Coadministration of Tariquidar (p.o.) with doxorubicin (5 mg/kg, i.v.)