TGF β Receptor II Antibody [J15L22]

Katalog-Nr. F2400

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Biologische Beschreibung

Spezifität

TGF β Receptor II Antibody [J15L22] detektiert endogene Spiegel des gesamten TGF-β-Rezeptor-II-Proteins.

Hintergrund Der TGF β Receptor II (Transformierender Wachstumsfaktor-β-Typ-II-Rezeptor, TβRII) ist ein Transmembran-Glykoprotein vom Typ I und eine konstitutiv aktive Serin/Threonin-Kinase, die die TGF-β-Signalübertragung initiiert. Er umfasst eine extrazelluläre ligandenbindende Ektodomäne mit einer Drei-Finger-Toxin-Faltung, die durch sechs Disulfidbrücken stabilisiert wird (vier konserviert unter Typ-II-Rezeptoren und zwei einzigartig für TβRII), ein einzelnes Transmembransegment und eine intrazelluläre Kinasedomäne. Die Ektodomäne enthält 12 Cysteine und weist einen verlängerten ersten „Finger“ im Vergleich zu verwandten Rezeptoren auf, was spezifische Ligandeninteraktionen ermöglicht. TβRII wird in vielen Geweben exprimiert und bindet TGF-β-Liganden, rekrutiert und phosphoryliert den Typ-I-Rezeptor (TβRI), um SMAD-abhängige und SMAD-unabhängige Signalwege zu aktivieren, einschließlich der Src-Kinase-Signalgebung. Durch diese Mechanismen reguliert TβRII Entwicklung, Gewebehomöostase, Immunantworten und pathologische Prozesse wie Krebs und Fibrose.

Nutzungsinformationen

Anwendung IHC, FCM Verdünnung
IHC
1:50 - 1:200
Reaktivität Human
Quelle Mouse Monoclonal Antibody MW
Lagerpuffer PBS, pH 7.2+50% Glycerol+0.05% BSA+0.01% NaN3
Lagerung
(Ab dem Datum des Erhalts)
-20°C (avoid freeze-thaw cycles), 2 years
IHC
Experimental Protocol:
 
Deparaffinization/Rehydration
1. Deparaffinize/hydrate sections:
2. Incubate sections in three washes of xylene for 5 min each.
3. Incubate sections in two washes of 100% ethanol for 10 min each.
4. Incubate sections in two washes of 95% ethanol for 10 min each.
5. Wash sections two times in dH2O for 5 min each.
6.Antigen retrieval: For Citrate: Heat slides in a microwave submersed in 1X citrate unmasking solution until boiling is initiated; continue with 10 min at a sub-boiling temperature (95°-98°C). Cool slides on bench top for 30 min.
 
Staining
1. Wash sections in dH2O three times for 5 min each.
2. Incubate sections in 3% hydrogen peroxide for 10 min.
3. Wash sections in dH2O two times for 5 min each.
4. Wash sections in wash buffer for 5 min.
5. Block each section with 100–400 µl of blocking solution for 1 hr at room temperature.
6. Remove blocking solution and add 100–400 µl primary antibody diluent in to each section. Incubate overnight at 4°C.
7. Remove antibody solution and wash sections with wash buffer three times for 5 min each.
8. Cover section with 1–3 drops HRPas needed. Incubate in a humidified chamber for 30 min at room temperature.
9. Wash sections three times with wash buffer for 5 min each.
10. Add DAB Chromogen Concentrate to DAB Diluent and mix well before use.
11. Apply 100–400 µl DAB to each section and monitor closely. 1–10 min generally provides an acceptable staining intensity.
12. Immerse slides in dH2O.
13. If desired, counterstain sections with hematoxylin.
14. Wash sections in dH2O two times for 5 min each.
15. Dehydrate sections: Incubate sections in 95% ethanol two times for 10 sec each; Repeat in 100% ethanol, incubating sections two times for 10 sec each; Repeat in xylene, incubating sections two times for 10 sec each.
16. Mount sections with coverslips and mounting medium.
 

Referenzen

  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/12121646/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/36378749/

Anwendungsdaten

IHC

Validiert von Selleck

  • F2400-IHC1
    Immunohistochemical analysis of formalin fixed paraffin embedded human placenta tissue with F2400 at 1:50 dilution.