Tofacitinib (CP-690550)

Katalog-Nr.S2789 Charge:S278908

Drucken

Technische Daten

Formel

C16H20N6O
Molekulargewicht 312.37 CAS-Nr. 477600-75-2
Löslichkeit (25°C)* In vitro DMSO 62 mg/mL (198.48 mM)
Water Insoluble
Ethanol Insoluble
In vivo (Lösungsmittel einzeln und der Reihe nach zum Produkt hinzufügen.)
Homogeneous suspension
CMC-NA
≥5mg/ml Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
* <1 mg/ml bedeutet schwer löslich oder unlöslich.
* Bitte beachten Sie, dass Selleck die Löslichkeit aller Verbindungen intern testet und die tatsächliche Löslichkeit geringfügig von veröffentlichten Werten abweichen kann. Dies ist normal und ist auf geringfügige Batch-zu-Batch-Variationen zurückzuführen.
* Versand bei Raumtemperatur (Stabilitätstests zeigen, dass dieses Produkt ohne Kühlmaßnahmen versendet werden kann.)

Vorbereitung von Stammlösungen

Biologische Aktivität

Beschreibung Tofacitinib ist ein neuartiger Inhibitor von JAK3 mit einer IC50 von 1 nM in zellfreien Assays, 20- bis 100-fach weniger potent gegen JAK2 und JAK1. Diese Verbindung hemmt die Expression von antiapoptotischem BCL-A1 und BCL-XL in menschlichen plasmazytoiden dendritischen Zellen (PDC) und induziert die PDC-Apoptose.
Ziele
JAK3
(Cell-free assay)		 JAK2
(Cell-free assay)		 JAK1
(Cell-free assay)
1 nM 20 nM 112 nM
In vitro CP-690550 ist ein spezifischer, oral verabreichter JAK3-Inhibitor, der 20- bis 100-fach weniger potent für JAK2 und JAK1 ist, mit IC50-Werten von 20 nM bzw. 112 nM. Diese Verbindung zeigt keine starke Aktivität gegen 30 andere Kinasen (alle medianen IC50 > 3000 nM). Sie hemmt die IL-2-induzierte Proliferation mit einer 30-fach höheren Potenz als ihre Wirkung auf die GM-CSF-induzierte Proliferation. Diese Chemikalie hemmt effektiv eine murine gemischte Lymphozytenreaktion (MLR) (IC50 = 91 nM). Sie hemmt potent die IL-4-induzierte Hochregulierung von CD23 (IC50=57 nM) und die Expression des Major Histocompatibility Complex Klasse II (MHCII) (IC50=71 nM) auf murinen B-Zellen. Eine aktuelle Studie zeigt, dass niedrige Dosen dieser Verbindung den Beginn der experimentellen autoimmunen Enzephalomyelitis beschleunigen, indem sie die Th17-Differenzierung potenzieren.
In vivo In einem murinen Modell der heterotopen Herztransplantation (DBA2 Spenderherz in C57/BL6 Empfänger) führt Tofacitinib zu einem dosisabhängigen Anstieg der Überlebensrate transplantierter Herzen. Die EC50 (Arzneimittelkonzentration im Blut, bei der 50 % der Mäuse ihr Transplantat länger als 28 Tage behalten) beträgt ~60 ng/mL. Diese Verbindung verhindert die Abstoßung allogener Nieren bei nicht-humanen Primaten (NHPs, Macaca fascicularis) (MST von 62 und 83 Tagen für die Gruppen mit 50 bis 100 ng/ml bzw. 200 bis 400 ng/ml). Mäuse, die chronisch mit dieser Verbindung (1,5-15 mg/kg/Tag) behandelt wurden, zeigen dosis- und zeitabhängige Veränderungen der Lymphozytensubpopulationen, wenn sie mittels Durchflusszytometrie untersucht werden. Die dramatischste beobachtete Veränderung ist eine 96%ige Reduktion der NK1.1+TCRb-Zellzahlen in der Milz nach 21-tägiger Behandlung. Delayed-type Hypersensitivity (DTH)-Reaktionen bei sensibilisierten Mäusen werden nach Behandlung mit dieser Chemikalie (1,87–30 mg/kg, s.c.) dosisabhängig reduziert. Ein verlängertes Überleben neonataler Balb/c-Herzen, die in die Ohrmuschel von MHC-inkompatiblen C3H/HEN-Mäusen implantiert wurden, wird bei Monotherapie mit dieser Verbindung (10–30 mg/kg/Tag) beobachtet, aber in Kombination mit Cyclosporin (10 mg/kg/Tag) verbessert.

Protokoll (aus Referenz)

Kinase-Assay:

[1]
  • JAK3 Kinase-Assay

    Ein Fragment, das die katalytische Domäne der humanen JAK3 (785aa bis 1125aa, JH1 katalytische Domäne) kodiert, wird mittels PCR aus der vollständigen cDNA amplifiziert und in die EcoRI-Stelle des Baculovirus-Transfervektors pVL1393 kloniert. Rekombinantes Baculovirus wird verwendet, um Sf9-Zellen (Spodoptera frugipedra) zu infizieren, und rekombinantes GSTJAK3-Fusionsprotein wird an Glutathion-Sepharose isoliert. Das Fusionsprotein wird mit reduziertem Glutathion eluiert und in einem Puffer gelagert, der 50 mM Tris, pH 7,5, 10 mM DTT und 10 % Glycerin enthält. Die JAK3-Kinaseaktivität wird mittels ELISA wie folgt gemessen: Platten werden über Nacht mit einem zufälligen L-Glutaminsäure- und Tyrosin-Copolymer (4:1) (100 ug/mL) beschichtet. Die Platten werden gewaschen und rekombinantes JAK3 JH1:GST (100 ng/Well) mit oder ohne Inhibitoren wird bei Raumtemperatur 30 Minuten lang inkubiert, wonach HRP-konjugierter PY20 Anti-Phosphotyrosin-Antikörper (ICN) hinzugefügt und mit TMB (3,3',5,5'-Tetramethylbenzidin) entwickelt wird. Andere Kinasen (Tabelle 1) werden in E. coli oder in Insektenzellen produziert, je nachdem, was für die gegebene Kinase optimal ist. Die katalytische Aktivität von Tyrosinkinasen wird mit dem oben genannten ELISA gemessen, während Serin/Threonin-Kinasen mittels radioaktiver Enzymassays untersucht werden.
Zell-Assay:

[1]
  • Zelllinien

    Human T blasts cell

  • Konzentrationen

    0-4000 nM

  • Inkubationszeit

    4 days

  • Methode

    To measure IL-2-dependent proliferation, isolated lymphocytes are resuspended to a cell density of 1-2 × 106/mL in complete RPMI medium (RPMI 1640 containing 10% (w/v) fetal calf serum (FCS), 1%(w/v) penicillin and treptomycin).Phytohemagluttinin (PHA) is added to a final concentration of 10mg/mL, and the culture incubated for 3 days at 37 °C in a humidified 5% (v/v) CO2 incubator to upregulate IL-2R and JAK3 expression. IL-2 (200U/mL), with or without this compound is then added and the cells are incubated for 72 hours at 37 °C in a humidified 5% (v/v) CO2 incubator, after which 50 mL of 3H-thymidine (5mCi/mL) is added. The plates are incubated for an additional 18 hours, harvested with a 96-well harvester, and counted on a scintillation counter. HUO3 cells are maintained in culture with granulocyte-macrophage colony stimulating factor and human foreskin fibroblasts are maintained in culture with 10% fetal calf serum. This compound is added to freshly plated cells and cultured for 4 days. 3Hthymidine is added during the last 18 hours of the culture period.
Tierstudie:

[1]
  • Tiermodelle

    DBA/2 and C57/BL6 mice

  • Dosierungen

    0-136 ng/mL

  • Verabreichung

    Administered via osmotic minipump infusion

Referenzen

  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/14593182/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/14678034/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/18242596/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/22252297/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/16378072/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/14678034/

Kundenproduktvalidierung

TRAP-positive multinucleated cell differentiation depends on JAK and is inhibited by tofacitinib in vitro. Effect of tofacitinib on the differentiation of TRAP-positive multi-nucleated cells in vitro (n =3 wells/experiment). Original magnification x 100.

Daten von [ Arthritis Rheumatol , 2014 , 66(1), 121-9 ]

Effect of a panel of IFN inhibitors on BUNΔNSs virus growth in A549 cells. The inhibitor panel consists of small molecules that target the IKK2 (TPCA-1) and TBK1 (BX795, MRT6884, MRT6707) components of the IFN induction pathway and JAK1 (Cyt387, AZD1480, Ruxolitinib, Tofacitinib) a component of the IFN signaling pathway. Effect of the inhibitors was compared with A549 cells constitutively expressing viral IFN antagonists that block IFN production (BVDV-Npro) or IFN signaling (PIV5-V). Effect of various inhibitor concentrations on plaque size formation. Plaques were visualized 2 days post-infection by crystal violet staining.

Daten von [ PLoS One , 2014 , 9(11), e112014 ]

Effects of CP-690550 on NKTCL cell lines. NK-S1, KHYG-1 cells were treated with CP-690550 for 48 hours, and the effect on STAT5 phosphorylation was evaluated by Western blotting.

Daten von [ Cancer Discov , 2012 , 2(7), 591-7 ]

AE cells were treated with vehicle control (DMSO), a MEK inhibitor (PD98059), a PI3K inhibitor (LY294002) or a JAK2 inhibitor (CP690550) at indicated concentrations for 24 hours, followed by lysis for immunoblotting.

Daten von [ Blood , 2012 , 120(4), 709-19 ]

Sellecks Tofacitinib (CP-690550) Wurde zitiert von 195 Publikationen

A patient-derived T cell lymphoma biorepository uncovers pathogenetic mechanisms and host-related therapeutic vulnerabilities [ Cell Rep Med, 2025, S2666-3791(25)00102-8] PubMed: 40147445
In silico modeling guides identification of novel JAK1 variants associated with immune dysregulation [ EMBO Mol Med, 2025, 10.1038/s44321-025-00317-0] PubMed: 41136770
Differential effects of tofacitinib on macrophage activation contribute to lack of response in ulcerative colitis patients [ J Crohns Colitis, 2025, 19(6)jjaf076] PubMed: 40320713
Keloids and inflammation: the crucial role of IL-33 in epidermal changes [ Front Immunol, 2025, 16:1514618] PubMed: 40230853
Rheumatoid arthritis associated cytokines and therapeutics modulate immune checkpoint receptor expression on T cells [ Front Immunol, 2025, 16:1534462] PubMed: 39981237
Polarization of Vδ2 T cells to a Th2-like phenotype promotes plasmablast differentiation and possesses pro-fibrotic properties in IgG4-related disease [ Front Immunol, 2025, 16:1550405] PubMed: 40213561
Membrane-bound IL-15 co-expression powers a potent and persistent CD70-targeted TRuC T-cell therapy [ Front Immunol, 2025, 16:1609658] PubMed: 40519930
Associations between ionomic profile and metabolic abnormalities in a murine model of sodium sulfide induced alopecia areata [ Front Pharmacol, 2025, 16:1507348] PubMed: 40438604
Targeting interferon responses in juvenile dermatomyositis: Siglec-1 as an in vitro biomarker for JAK inhibitor efficacy [ Rheumatology (Oxford), 2025, keaf227] PubMed: 40372702
Unidirectional Crosstalk Between NTRK1 and IGF2 Drives ER Stress in Chronic Pain [ Biomedicines, 2025, 13(7)1632] PubMed: 40722704

RÜCKGABERICHTLINIE
Die bedingungslose Rückgaberichtlinie von Selleck Chemical gewährleistet unseren Kunden ein reibungsloses Online-Einkaufserlebnis. Wenn Sie in irgendeiner Weise mit Ihrem Kauf unzufrieden sind, können Sie jeden Artikel innerhalb von 7 Tagen nach Erhalt zurückgeben. Im Falle von Produktqualitätsproblemen, sei es protokollbezogene oder produktbezogene Probleme, können Sie jeden Artikel innerhalb von 365 Tagen ab dem ursprünglichen Kaufdatum zurückgeben. Bitte befolgen Sie die nachstehenden Anweisungen, wenn Sie Produkte zurücksenden.

VERSAND UND LAGERUNG
Selleck-Produkte werden bei Raumtemperatur transportiert. Wenn Sie das Produkt bei Raumtemperatur erhalten, seien Sie versichert, dass die Qualitätskontrollabteilung von Selleck Experimente durchgeführt hat, um zu überprüfen, dass die normale Temperaturplatzierung von einem Monat die biologische Aktivität von Pulverprodukten nicht beeinträchtigt. Nach dem Sammeln lagern Sie das Produkt bitte gemäß den in der Datenblatt beschriebenen Anforderungen. Die meisten Selleck-Produkte sind unter den empfohlenen Bedingungen stabil.

NICHT FÜR DIE ANWENDUNG AM MENSCHEN, FÜR VETERINÄRMEDIZINISCHE DIAGNOSTIK ODER THERAPEUTISCHE ZWECKE.