Ustekinumab (anti-IL-12/IL-23)

Katalog-Nr.A2024 Batch: A202401

Technische Daten

CAS-Nr.	815610-63-0
Formel	PBS, PH7.2
Isotyp	Human IgG1
Quelle	Human
Lagerung (Ab dem Datum des Erhalts)	Store the undiluted solution at 4°C in the dark to avoid freeze-thaw cycles
Reinheit	99.12%
Proteinkonzentration:	5.00mg/ml
Endotoxinspiegel	≤1 EU/mg

Biologische Aktivität

Beschreibung	Ustekinumab (CNTO 1275) ist ein humaner monoklonaler Anti-IL-12/IL-23 IgG1κ-Antikörper, der zur Behandlung von Psoriasis eingesetzt wird. MW=145,6 kDa.
In vitro	Die Zugabe von Ustekinumab (UST) hemmt die Differenzierung von T-follikulären Helferzellen (TFH-Zellen) in vitro signifikant.
In vivo	Ustekinumab wird durch rekombinante humane IL-12-Immunisierung von humanen Ig (hu-Ig) transgenen Mäusen erzeugt. Ustekinumab bindet an die p40-Untereinheit, die sowohl IL-12 als auch IL-23 gemeinsam ist, und verhindert deren Interaktion mit der IL-12-Rezeptor-β1-Untereinheit der IL-12- und IL-23-Rezeptorkomplexe.

Protokoll (nur als Referenz)

Zell-Assay:	Ziel: TFH-Zell-Differenzierungsassay Zellen: naive CD4+-T-Zellen, T-follikuläre Helferzellen (TFH-Zellen), PBMCs Konzentrationen: 100 ng/mL Inkubationszeit: 24 h Methode: Der TFH-Zell-Differenzierungsassay wird mit frisch isolierten PBMCs von gesunden Spendern (n = 16) durchgeführt. Naive CD4+-T-Zellen werden unter Verwendung des humanen naiven CD4+-T-Zell-Isolierungskits II isoliert. Insgesamt 500.000 naive CD4+-T-Zellen werden in komplettem Medium in Gegenwart von 12,5 μL/mL anti-CD3/CD28 in einer Flachboden-48-Well-Platte kultiviert. Nach 24 Stunden Kultur werden Zytokine hinzugefügt und die Zellen für weitere 2,5 Tage inkubiert. Insgesamt 5 ng/mL IL-12 + 5 ng/mL TGFβ mit und ohne 100 ng/mL UST und 100 ng/mL UST allein werden verwendet. Referenz: https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/32679193 Ustekinumab kann auf humanisierte Mäuse, peripheres Blut und andere verwandte Assays angewendet werden (Nur als Referenz)

Zell-Assay:

Ziel: TFH-Zell-Differenzierungsassay
Zellen: naive CD4+-T-Zellen, T-follikuläre Helferzellen (TFH-Zellen), PBMCs
Konzentrationen: 100 ng/mL
Inkubationszeit: 24 h
Methode: Der TFH-Zell-Differenzierungsassay wird mit frisch isolierten PBMCs von gesunden Spendern (n = 16) durchgeführt. Naive CD4+-T-Zellen werden unter Verwendung des humanen naiven CD4+-T-Zell-Isolierungskits II isoliert. Insgesamt 500.000 naive CD4+-T-Zellen werden in komplettem Medium in Gegenwart von 12,5 μL/mL anti-CD3/CD28 in einer Flachboden-48-Well-Platte kultiviert. Nach 24 Stunden Kultur werden Zytokine hinzugefügt und die Zellen für weitere 2,5 Tage inkubiert. Insgesamt 5 ng/mL IL-12 + 5 ng/mL TGFβ mit und ohne 100 ng/mL UST und 100 ng/mL UST allein werden verwendet.
Referenz: https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/32679193

Ustekinumab kann auf humanisierte Mäuse, peripheres Blut und andere verwandte Assays angewendet werden (Nur als Referenz)

Referenzen	https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/32679193/ https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/22123062/

Referenzen

https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/32679193/
https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/22123062/

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