Vedolizumab (anti-α4β7-integrin)

Katalog-Nr.A2045 Batch: A204502

Technische Daten

CAS-Nr.	943609-66-3
Formel	PBS Buffer, PH 7.4
Isotyp	Human IgG1
Anwendung	Vedolizumab (anti-α4β7-integrin)
Lagerung (Ab dem Datum des Erhalts)	Store the undiluted solution at 4°C in the dark to avoid freeze-thaw cycles.
Reinheit	98%
Proteinkonzentration:	5.72mg/ml
Endotoxinspiegel	＜1EU/mg

Biologische Aktivität

Beschreibung	Vedolizumab (anti-α4β7-integrin) ist ein humanisierter monoklonaler IgG1-Antikörper, der auf das α4β7 Integrin zur Behandlung von Colitis ulcerosa und Morbus Crohn abzielt.
In vitro	Vedolizumab (anti-α4β7-integrin) bindet an eine Untergruppe menschlicher peripherer Blut-Gedächtnis-CD4⁺-T-Lymphozyten, einschließlich Darm-homing-Interleukin-17-T-Helfer-Lymphozyten, am höchsten, bindet auch an Eosinophile auf hohem Niveau und an naive T-Helfer-Lymphozyten, naive und zytotoxische Gedächtnis-T-Lymphozyten, B-Lymphozyten, natürliche Killerzellen und Basophile auf niedrigerem Niveau; Vedolizumab bindet an Gedächtnis-CD4⁺-T- und B-Lymphozyten mit subnanomolarer Potenz mit einer EC50 von 0,3-0,4 nM.

Beschreibung

Vedolizumab (anti-α4β7-integrin) ist ein humanisierter monoklonaler IgG1-Antikörper, der auf das α4β7 Integrin zur Behandlung von Colitis ulcerosa und Morbus Crohn abzielt.

In vitro

Vedolizumab (anti-α4β7-integrin) bindet an eine Untergruppe menschlicher peripherer Blut-Gedächtnis-CD4⁺-T-Lymphozyten, einschließlich Darm-homing-Interleukin-17-T-Helfer-Lymphozyten, am höchsten, bindet auch an Eosinophile auf hohem Niveau und an naive T-Helfer-Lymphozyten, naive und zytotoxische Gedächtnis-T-Lymphozyten, B-Lymphozyten, natürliche Killerzellen und Basophile auf niedrigerem Niveau; Vedolizumab bindet an Gedächtnis-CD4⁺-T- und B-Lymphozyten mit subnanomolarer Potenz mit einer EC50 von 0,3-0,4 nM.

Protokoll (nur als Referenz)

Zell-Assay:	PBMCs wurden in Assay-Puffer für die intrazelluläre Färbung von CD4-Gedächtniszellen-Interleukin (IL) 17A resuspendiert. PBMCs wurden (oder nicht stimuliert, für die Kontrollproben) mit 50 ng/ml Phorbol-12-myristat-13-acetat und 1 µg/ml Ionomycin in Gegenwart von 3 µM Monensin für 5 h bei 37°C stimuliert. Nach dem Waschen wurden die Zellen mit fluoreszierend markierten Antikörpern gefärbt: Vedolizumab, Anti-α4 und Anti-β7, Anti-CD4 und Anti-CD45RO, wo zutreffend, bei 4°C für 30 min. Die Zellen wurden dann mit kaltem PBS gewaschen und in Fixier- und Permeabilisierungslösung-Färbepuffer bei 4°C für 30 min resuspendiert. Nach Fixierung und Permeabilisierung wurden die Zellen mit Permeabilisierungspuffer gewaschen und mit 10% normalem Rattenserum bei 4°C für 10 min blockiert. Nach dem Blockierungsschritt wurden die Zellen mit einem Fluorochrom-konjugierten Anti_x0002_IL17A-Antikörper bei 4°C für 30 min gefärbt. Schließlich wurden die Zellen mit Permeabilisierungspuffer gewaschen und analysiert.

Zell-Assay:

PBMCs wurden in Assay-Puffer für die intrazelluläre Färbung von CD4-Gedächtniszellen-Interleukin (IL) 17A resuspendiert. PBMCs wurden (oder nicht stimuliert, für die Kontrollproben) mit 50 ng/ml Phorbol-12-myristat-13-acetat und 1 µg/ml Ionomycin in Gegenwart von 3 µM Monensin für 5 h bei 37°C stimuliert. Nach dem Waschen wurden die Zellen mit fluoreszierend markierten Antikörpern gefärbt: Vedolizumab, Anti-α4 und Anti-β7, Anti-CD4 und Anti-CD45RO, wo zutreffend, bei 4°C für 30 min. Die Zellen wurden dann mit kaltem PBS gewaschen und in Fixier- und Permeabilisierungslösung-Färbepuffer bei 4°C für 30 min resuspendiert. Nach Fixierung und Permeabilisierung wurden die Zellen mit Permeabilisierungspuffer gewaschen und mit 10% normalem Rattenserum bei 4°C für 10 min blockiert. Nach dem Blockierungsschritt wurden die Zellen mit einem Fluorochrom-konjugierten Anti_x0002_IL17A-Antikörper bei 4°C für 30 min gefärbt. Schließlich wurden die Zellen mit Permeabilisierungspuffer gewaschen und analysiert.

Referenzen	https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/19509315/

Referenzen

https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/19509315/

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