Verinurad (RDEA3170)

Verinurad (RDEA3170) hemmte die Transportaktivität des humanen URAT1 dosisabhängig mit hoher Wirksamkeit und einer IC50 von 25 nM. Es hemmte die verwandten URAT1-Homologen OAT4 und OAT1 mit einer etwa 200-fach geringeren Affinität im Vergleich zu URAT1 mit IC50-Werten von 5,9 μM bzw. 4,6 μM. Humanes URAT1 (IC50=0,025 μM) hat eine 1.640-fach höhere Affinität für diese Verbindung im Vergleich zu Ratten-URAT1 (IC50 = 41 μM). Es weist eine hohe Wirksamkeit für humanes URAT1 auf, und die Reste 35, 365 und 481 tragen alle zu seiner Affinität bei. Humanes URAT1, das eine chimäre Punktmutation an Position 365 trägt, bei der humanes Phe-365 durch Ratten-Tyr-365 ersetzt wird (humanes URAT1-F365Y oder h-F365Y), hat eine IC50 von 4,0 μM, eine signifikant 160-fach geringere Affinität relativ zu humanem URAT1. Währenddessen hatte Ratten-URAT1, das die entgegengesetzte Punktmutation trägt (Ratten-URAT1-Y365F oder r-Y365F), eine IC50 von 2,9 μM, eine signifikant 14-fach höhere Affinität im Vergleich zu Ratten-URAT1[1].

Beim Menschen ist die Absorption einer Einzeldosis von Verinurad (RDEA3170) schnell, und die Exposition (Cmax und AUC) nimmt mit der Dosis bis zur maximal getesteten Dosis zu. Die Cmax liegt 0,5-0,75 Stunden nach der Dosis im nüchternen Zustand und ist im gesättigten Zustand leicht auf 1,25 Stunden nach der Dosis verzögert. Die t1/2 beträgt über alle Dosen hinweg ungefähr 10-15 Stunden. Es wurde bei den untersuchten Dosen gut vertragen. Im systemischen Kreislauf schien diese Verbindung ein Medikament mit hoher Clearance zu sein (CL/F lag im Bereich von ~30-50 L/h) mit einer umfangreichen extravaskulären Verteilung. Die renale Ausscheidung ist auf nur ~2%–3% im Urin begrenzt, was darauf hindeutet, dass der Großteil wahrscheinlich in der Leber über Biotransformation zu Metaboliten ausgeschieden wird[2].

• Zelllinien

  HEK-293T cells

• Konzentrationen

  0.1 nM-1 mM

• Inkubationszeit

  5 min

• Methode

  URAT1 and OAT4 activity assays were performed in assay buffer con- sisting of 25 mM MES pH 5.5 (from a 1 M MES solution adjusted to pH 5.5 with sodium hydroxide), 125 mM sodium gluconate, 4.8 mM potassium gluconate, 1.2 mM monobasic potassium phosphate, 1.2 mM magnesium sulfate, 1.3 mM calcium gluconate and 5.6 mM glucose. Verinurad (RDEA3170) was serially diluted into assay buffer and added to the cells for 5 minutes prior to addition of substrate. URAT1-expressing cells were incubated with 100 μM 14C-uric acid for 10 minutes and OAT4-expressing cells were incubated with 20 μM carboxyfluorescein for 5 minutes. Cells were then washed three times in 25 mM MES pH 5.5/125 mM sodium gluconate, and solubilized in Ultima Gold prior to liquid scintillation counting. Each treatment is measured in triplicate.