Vismodegib (GDC-0449)

Vismodegib (GDC-0449) zielt auf den Hedgehog-Signalweg ab, blockiert die Aktivitäten der Hedgehog-Liganden-Zelloberflächenrezeptoren PTCH und/oder SMO und unterdrückt die Hedgehog-Signalgebung. Diese Verbindung verhindert mehrere ABC Transporter und blockiert auch ABCG2, Pgp und MRP1 – wichtige ABC Transporter, die mit MDR assoziiert sind. Es ist ein potenter Inhibitor von ABC Transporter, ABCG2/BCRP und ABCB1/Pgp und ein milder Inhibitor von ABCC1/MRP1. In ABCG2-überexprimierenden HEK293-Zellen erhöht es die Retention des fluoreszierenden ABCG2-Substrats BODIPY und resensibilisiert diese Zellen. In Madin-Darby canine kidney II-Zellen, die zur Überexpression von Pgp oder MRP1 entwickelt wurden, erhöht es die Retention von Calcein-AM und resensibilisiert sie. Es resensibilisiert auch menschliche nicht-kleinzellige Lungenkarzinomzellen NCI-H460/par und NCI-H460/MX20, die ABCG2 als Reaktion auf SN-38 überexprimieren. Die IC50-Werte zur Verhinderung von ABCG2 und Pgp liegen bei etwa 1,4 μM bzw. 3,0 μM. [2] Zusätzlich verändert es die intrazelluläre Ca²⁺-Homöostase und hemmt das Zellwachstum in resistenten Lungenkrebszellen. [3]

Vismodegib (GDC-0449) wurde zur Behandlung von Medulloblastomen in Tiermodellen eingesetzt. [2] Es verhindert das Wachstum primärer Pankreas-Xenotransplantate, ohne die Pankreaszellproliferation unspezifisch zu hemmen. Orale Dosen dieser Verbindung verursachen Tumorregressionen im Ptch(+/-)-Allograftmodell des Medulloblastoms bei Dosen ≥25 mg/kg und eine Hemmung des Tumorwachstums bei Dosen bis zu 92 mg/kg, zweimal täglich verabreicht, in zwei Liganden-abhängigen Darmkrebsmodellen, D5123 und 1040830. Die Analyse der Hh-Signalwegaktivität und die PK/PD-Modellierung zeigen, dass es Gli1 mit einer ähnlichen IC50 in den Medulloblastom- und D5123-Modellen (0,165 μM bzw. 0,267 μM) hemmt. Die Signalwegmodulation ist mit der Wirksamkeit unter Verwendung eines integrierten PK/PD-Modells verbunden, das eine steile Beziehung aufzeigt, bei der > 50 % der Aktivität von GDC-0449 mit >80 %iger Repression des Hh-Signalwegs assoziiert sind. [4]

• Zelllinien

  MDCKII cells

• Konzentrationen

  20 μM

• Inkubationszeit

  2 hours

• Methode

  MDCKII cells are seeded into 24-well plates at a density of 3 × 10⁵ cells per well and are allowed to attach. Medium is then changed to that containing different drugs (50 μM VP, or 20 μM Vismodegib (GDC-0449) in DMSO or DMSO alone as control, and nonfluorescent calcein-AM is added to a final concentration of 1.0 μM and incubated at 37 °C for 2 hours. It is then used in subsequent steps. Cells are washed twice with Ca²⁺, Mg²⁺-containing Hank's balanced salt solution buffer and lysed by shaking in 0.01% Triton X-100 in PBS buffer for 1 hour at room temperature or overnight at 4 °C. The lysate is then transferred into 96-well plates, and the fluorescence signal caused by the cell-derived calcein is quantified spectrophotometrically with a SpectraMax M5 Multi-Detection Readerusing an excitation wavelength of 495 nm and an emission wavelength of 515 nm. All manipulations are performed in the dark. All readings are expressed as mean ?SEM normalized to the control.

• Tiermodelle

  Ptch(+/-) allograft model, D5123 and 1040830

• Dosierungen

  ~ 100 mg/kg

• Verabreichung

  Orally