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D-Luciferin Potassium Salt Dyes inhibiteur

N° Cat.S6580

La D-luciférine est le substrat naturel de l'enzyme luciférase (Luc) qui catalyse la production de la lumière jaune-verte typique des lucioles. La chimiluminescence à 560 nm de cette réaction atteint son maximum en quelques secondes, avec une émission lumineuse proportionnelle à la concentration de luciférase lorsque le substrat luciférine est présent en excès. Le gène de la luciférase (luc) est un gène rapporteur populaire pour la recherche et le criblage d'agents. Les techniques chimiluminescentes sont pratiquement sans bruit de fond, ce qui rend le gène rapporteur luc idéal pour détecter une faible expression génique. En plus de son rôle de rapporteur de l'expression génique, la luciférase est couramment utilisée dans un essai extrêmement sensible pour l'ATP.
D-Luciferin Potassium Salt Dyes inhibiteur Chemical Structure

Structure chimique

Poids moléculaire: 318.41

Aller à

Contrôle qualité

Lot : Pureté : 99.97%
99.97

Informations chimiques, stockage et stabilité

Poids moléculaire 318.41 Formule

C11H7KN2O3S2

Stockage (À partir de la date de réception) 3 years -20°C(in the dark) powder
N° CAS 115144-35-9 -- Stockage des solutions mères

Synonymes N/A Smiles C1C(N=C(S1)C2=NC3=C(S2)C=C(C=C3)O)C(=O)[O-].[K+]

Solubilité

In vitro
Lot:

Water : 39 mg/mL

DMSO : 5 mg/mL (15.7 mM)
(Le DMSO contaminé par lhumidité peut réduire la solubilité. Utiliser du DMSO frais et anhydre.)

Ethanol : Insoluble

Calculateur de molarité

Masse Concentration Volume Poids moléculaire
Calculateur de dilution Calculateur de poids moléculaire

In vivo
Lot:

Calculateur de formulation in vivo (Solution claire)

Étape 1 : Entrez les informations ci-dessous (Recommandé : Un animal supplémentaire pour tenir compte des pertes pendant lexpérience)

mg/kg g μL

Étape 2 : Entrez la formulation in vivo (Ceci nest que le calculateur, pas la formulation. Veuillez nous contacter dabord sil ny a pas de formulation in vivo dans la section Solubilité.)

% DMSO % % Tween 80 % ddH2O
%DMSO %

Résultats du calcul :

Concentration de travail : mg/ml;

Méthode de préparation du liquide maître DMSO : mg médicament prédissous dans μL DMSO ( Concentration du liquide maître mg/mL, Veuillez nous contacter dabord si la concentration dépasse la solubilité du DMSO du lot de médicament. )

Méthode de préparation de la formulation in vivo : Prendre μL DMSO liquide maître, ajouter ensuiteμL PEG300, mélanger et clarifier, ajouter ensuiteμL Tween 80, mélanger et clarifier, ajouter ensuite μL ddH2O, mélanger et clarifier.

Méthode de préparation de la formulation in vivo : Prendre μL DMSO liquide maître, ajouter ensuite μL Huile de maïs, mélanger et clarifier.

Remarque : 1. Assurez-vous que le liquide est clair avant dajouter le solvant suivant.
2. Assurez-vous dajouter le(s) solvant(s) dans lordre. Vous devez vous assurer que la solution obtenue lors de lajout précédent est une solution claire avant de procéder à lajout du solvant suivant. Des méthodes physiques telles que le vortex, les ultrasons ou le bain-marie peuvent être utilisées pour faciliter la dissolution.

Mécanisme daction

In vitro

1.Exemple de protocole pour les essais d'imagerie bioluminescente in vitro
a) Préparer une solution mère de Luciferin à 100 mM (100-200X) dans de l'eau stérile. Bien mélanger. Utiliser immédiatement, ou faire des aliquotes à usage unique, et stocker à -20℃, éviter les cycles de congélation-décongélation, éviter l'exposition à la lumière.
b) Préparer une solution de travail de D-Luciferin à 0,5-1 mM dans un milieu de culture tissulaire préchauffé.
c) Aspirer le milieu des cellules cultivées.
d) Ajouter la solution de travail de Luciferin aux cellules, et incuber les cellules pendant 5-10 minutes à 37℃ juste avant l'imagerie.
2.Exemple de protocole pour les essais d'imagerie bioluminescente in vivo
a) Préparer une solution mère de Luciferin à 15 mg/mL dans du DPBS, sans Mg2+ et Ca2+. Bien mélanger.
b) Filtrer stérilement la solution à travers un filtre de 0,2 m. Utiliser immédiatement, ou faire des aliquotes à usage unique, et stocker à -20℃, éviter les cycles de congélation-décongélation, éviter l'exposition à la lumière.
c) Injecter la luciférine par voie intrapéritonéale (i.p.) 10-15 minutes avant l'imagerie à 150 mg/kg (ou 10 L/g de solution mère de luciférine) du poids corporel de l'animal.
Note: Une étude cinétique de la luciférine doit être réalisée pour chaque modèle animal afin de déterminer le temps de signal maximal.
3.Exemple de protocole pour les essais rapporteurs à la luciférine
a) Préparer une solution mère de Luciferin à 100 mM dans de l'eau stérile. Utiliser immédiatement, ou faire des aliquotes à usage unique, et stocker à -20℃, éviter les cycles de congélation-décongélation, éviter l'exposition à la lumière.
b) Préparer une solution de travail de D-Luciferin à 1 mM avec 3 mM ATP, 1 mM DTT et 15 mM MgSO4 dans un tampon tricine 25 mM pH 7.8.
c) Pipeter 5-10 L de lysat cellulaire dans une microplaque. Utiliser un réactif de lyse ou un tampon sans lysat comme blanc.
d) Amorcer le luminomètre avec la solution de travail de luciférine.
e) Injecter 200 L de solution de travail de luciférine sans délai et un temps d'intégration de 10 secondes.

Références

Support technique

Instructions de manipulation

Tel: +1-832-582-8158 Ext:3

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