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RepSox (E-616452) TGF-beta/Smad inhibiteur

Name: RepSox (E-616452)
Brand: Selleck Chemicals
SKU: S7223
Rating: 5 (82 reviews)

N° Cat.S7223

RepSox (E-616452, SJN 2511, ALK5 Inhibitor II) est un inhibiteur puissant et sélectif de la TGFβR-1/ALK5 avec un IC50 de 23 nM et 4 nM pour la liaison de l'ATP à ALK5 et l'autophosphorylation d'ALK5 dans des essais sans cellules, respectivement.

RepSox (E-616452) TGF-beta/Smad inhibiteur Chemical Structure

Structure chimique

Poids moléculaire: 287.32

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Contrôle qualité

Lot : Pureté : 99.92%

99.92

Cibles apparentées	PKC ROCK Bcr-Abl
Autre TGF-beta/Smad Inhibiteurs	SB431542 Vactosertib (TEW-7197) LDN-193189 A-83-01 LDN-193189 Dihydrochloride Galunisertib (LY2157299) SRI-011381 (C381) LY2109761 SIS3 Hydrochloride SB-525334

Culture cellulaire, traitement et concentration de travail

Lignées cellulaires	Type dessai	Concentration	Temps dincubation	Description de lactivité	PMID
baculovirus/Sf9 cells	Function assay			Inhibition of recombinant Activin A receptor type II-like kinase (ALK5) expressed in baculovirus/Sf9 cells, IC50=4 nM	15317461
HepG2 cells	Function assay			Stimulation of Transforming growth factor beta receptor I kinase in HepG2 cells, IC50=10 nM	15317461
Sf9	Function assay			Inhibition of human ALK5 expressed in Sf9 insect cells using casein as substrate in presence of [gamma-33P]ATP, IC50 = 0.181 μM.	28135685
Sf9	Function assay			Inhibition of mouse ABL expressed in Sf9 insect cells using GGEAIYAAPFKK as substrate in presence of [gamma-33P]ATP, IC50 = 21 μM.	28135685
HeLa	Function assay	1 uM	30 mins	Inhibition of ALK5 in serum starved human HeLa cells assessed as reduction in TGF-beta-induced SMAD2/3 nuclear transaction at 1 uM pre-incubated for 30 mins before TGF-beta stimulation for 30 mins by immunofluorescence analysis	28135685
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Informations chimiques, stockage et stabilité

Poids moléculaire	287.32	Formule	C₁₇H₁₃N₅	Stockage (À partir de la date de réception)	3 ans-20°Cpoudre
N° CAS	446859-33-2	Télécharger le SDF		Stockage des solutions mères	1 an-80°Cen solvant 1 mois-20°Cen solvant
Synonymes	SJN 2511,ALK5 Inhibitor II			Smiles	CC1=NC(=CC=C1)C2=C(C=NN2)C3=NC4=C(C=C3)N=CC=C4

Solubilité

In vitro
Lot:

DMSO : 57 mg/mL (198.38 mM)
(Le DMSO contaminé par lhumidité peut réduire la solubilité. Utiliser du DMSO frais et anhydre.)

Water : Insoluble

Ethanol : Insoluble

Calculateur de molarité

Masse	Concentration	Volume	Poids moléculaire
=	×	×

Calculateur de dilution Calculateur de poids moléculaire

In vivo Lot:
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.

Calculateur de formulation in vivo (Solution claire)

Étape 1 : Entrez les informations ci-dessous (Recommandé : Un animal supplémentaire pour tenir compte des pertes pendant lexpérience)

Dosage : mg/kg Poids moyen des animaux : g Volume de dosage par animal :μL Nombre danimaux :

Étape 2 : Entrez la formulation in vivo (Ceci nest que le calculateur, pas la formulation. Veuillez nous contacter dabord sil ny a pas de formulation in vivo dans la section Solubilité.)

% DMSO + % + % Tween 80 + % ddH₂O

%DMSO+ %

Résultats du calcul :

Concentration de travail : mg/ml;

Méthode de préparation du liquide maître DMSO : mg médicament prédissous dans μL DMSO ( Concentration du liquide maître mg/mL, Veuillez nous contacter dabord si la concentration dépasse la solubilité du DMSO du lot de médicament. )

Méthode de préparation de la formulation in vivo : Prendre μL DMSO liquide maître, ajouter ensuiteμL PEG300, mélanger et clarifier, ajouter ensuiteμL Tween 80, mélanger et clarifier, ajouter ensuite μL ddH₂O, mélanger et clarifier.

Méthode de préparation de la formulation in vivo : Prendre μL DMSO liquide maître, ajouter ensuite μL Huile de maïs, mélanger et clarifier.

Remarque : 1. Assurez-vous que le liquide est clair avant dajouter le solvant suivant.
2. Assurez-vous dajouter le(s) solvant(s) dans lordre. Vous devez vous assurer que la solution obtenue lors de lajout précédent est une solution claire avant de procéder à lajout du solvant suivant. Des méthodes physiques telles que le vortex, les ultrasons ou le bain-marie peuvent être utilisées pour faciliter la dissolution.

Mécanisme daction

Targets/IC₅₀/Ki	TGFβR1(ALK5) (Cell-free assay) 4 nM
In vitro	RepSox (E-616452) inhibe la liaison de l'ATP à ALK5 et l'autophosphorylation d'ALK5 avec des IC50 de 23 nM et 4 nM, respectivement. Il inhibe également l'activité luciférase PAI-1 cellulaire induite par le TGF-β avec un IC50 de 18 nM. Ce composé est capable de remplacer avec succès Sox2 dans la reprogrammation en inhibant la signalisation du facteur de croissance transformant-β (Tgf-β), ce qui, à son tour, induit l'expression de Nanog. L'effet de RepSox induisant la reprogrammation ne nécessite pas de remodelage de la chromatine. Il s'avère efficace pour générer des iPSCs.
Kinase Assay	Essai de liaison par polarisation de fluorescence de l'ALK5
Kinase Assay	La liaison du composé à l'ALK5 est testée sur du GST-ALK5 recombinant purifié (résidus 198-503). Le déplacement de l'inhibiteur compétitif de l'ATP marqué fluorescentement à la rhodamine verte par différentes concentrations de composés testés est utilisé pour calculer un pIC50 de liaison. Le GST-ALK5 est ajouté à un tampon contenant 62,5 mM d'Hepes, pH 7,5, 1 mM de DTT, 12,5 mM de MgCl₂, 1,25 mM de CHAPS et 1 nM de ligand marqué à la rhodamine verte, de sorte que la concentration finale d'ALK5 est de 10 nM, basée sur la titration du site actif de l'enzyme. Quarante microlitres du réactif enzyme/ligand sont ajoutés à des plaques d'essai de 384 puits contenant 1 μL de différentes concentrations de RepSox (E-616452). Les plaques sont lues immédiatement sur un lecteur de fluorescence avec des filtres d'excitation, d'émission et dichroïques de 485, 530 et 505 nm, respectivement. La polarisation de fluorescence pour chaque puits est calculée par Acquest et est ensuite importée dans un logiciel d'ajustement de courbes pour la construction des courbes de concentration-réponse.
In vivo	Lorsqu'il est injecté dans des blastocystes, RepSox (E-616452) est capable de contribuer à la formation d'embryons chimériques in vivo. Un traitement d'une journée avec ce composé est suffisant pour remplacer le Sox2 transgénique.
Références	[1] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/15317461/ [2] http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC3335195/ [3] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/36207615/ [4] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/32066676/

Applications

Méthodes	Biomarqueurs	Images	PMID
Western blot	α-SMA / Calponin / Histone H3		30365043
Immunofluorescence	Smad2/3 / cytokeratin		28729719

Support technique

Instructions de manipulation

Tel: +1-832-582-8158 Ext:3

Si vous avez dautres questions, veuillez laisser un message.

C1=C0/X	C1:	LOG(C1):
C2=C1/X	C2:	LOG(C2):
C3=C2/X	C3:	LOG(C3):
C4=C3/X	C4:	LOG(C4):
C5=C4/X	C5:	LOG(C5):
C6=C5/X	C6:	LOG(C6):
C7=C6/X	C7:	LOG(C7):
C8=C7/X	C8:	LOG(C8):