uitsluitend voor onderzoeksdoeleinden

RepSox (E-616452) TGF-beta/Smad remmer

Name: RepSox (E-616452)
Brand: Selleck Chemicals
SKU: S7223
Rating: 5 (82 reviews)

Cat.Nr.S7223

RepSox (E-616452, SJN 2511, ALK5 Inhibitor II) is een potente en selectieve remmer van de TGFβR-1/ALK5 met een IC50 van 23 nM en 4 nM voor respectievelijk ATP-binding aan ALK5 en ALK5-autofosforylering in celvrije assays.

RepSox (E-616452) TGF-beta/Smad remmer Chemical Structure

Chemische structuur

Moleculair gewicht: 287.32

Ga naar

Kwaliteitscontrole

Batch: Zuiverheid: 99.92%

99.92

Gerelateerde doelwitten	PKC ROCK Bcr-Abl
Overige TGF-beta/Smad Inhibitoren	SB431542 Vactosertib (TEW-7197) LDN-193189 A-83-01 LDN-193189 Dihydrochloride Galunisertib (LY2157299) SRI-011381 (C381) LY2109761 SIS3 Hydrochloride SB-525334

Celkweek, behandeling & werkconcentratie

Cellijnen	Assaytype	Concentratie	Incubatietijd	Activiteitsbeschrijving	PMID
baculovirus/Sf9 cells	Function assay			Inhibition of recombinant Activin A receptor type II-like kinase (ALK5) expressed in baculovirus/Sf9 cells, IC50=4 nM	15317461
HepG2 cells	Function assay			Stimulation of Transforming growth factor beta receptor I kinase in HepG2 cells, IC50=10 nM	15317461
Sf9	Function assay			Inhibition of human ALK5 expressed in Sf9 insect cells using casein as substrate in presence of [gamma-33P]ATP, IC50 = 0.181 μM.	28135685
Sf9	Function assay			Inhibition of mouse ABL expressed in Sf9 insect cells using GGEAIYAAPFKK as substrate in presence of [gamma-33P]ATP, IC50 = 21 μM.	28135685
HeLa	Function assay	1 uM	30 mins	Inhibition of ALK5 in serum starved human HeLa cells assessed as reduction in TGF-beta-induced SMAD2/3 nuclear transaction at 1 uM pre-incubated for 30 mins before TGF-beta stimulation for 30 mins by immunofluorescence analysis	28135685
Klik om meer experimentele gegevens over de cellijn te bekijken

Chemische informatie, Opslag en Stabiliteit

Moleculair gewicht	287.32	Formule	C₁₇H₁₃N₅	Opslag (Vanaf de ontvangstdatum)	3 jaar-20°Cpoeder
CAS-nr.	446859-33-2	SDF downloaden		Opslag van stamoplossingen	1 jaar-80°Cin oplosmiddel 1 maand-20°Cin oplosmiddel
Synoniemen	SJN 2511,ALK5 Inhibitor II			Smiles	CC1=NC(=CC=C1)C2=C(C=NN2)C3=NC4=C(C=C3)N=CC=C4

Oplosbaarheid

In vitro
Batch:

DMSO : 57 mg/mL (198.38 mM)
(Met vocht verontreinigde DMSO kan de oplosbaarheid verminderen. Gebruik verse, watervrije DMSO.)

Water : Insoluble

Ethanol : Insoluble

Molariteitscalculator

Massa	Concentratie	Volume	Moleculair gewicht
=	×	×

Verdunningscalculator Moleculair gewicht calculator

In vivo Batch:
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.

In vivo Formuleringscalculator (Heldere oplossing)

Stap 1: Voer de onderstaande informatie in (Aanbevolen: Een extra dier voor het geval van verlies tijdens het experiment)

Dosering: mg/kg Gemiddeld gewicht van dieren: g Doseervolume per dier:μL Aantal dieren:

Stap 2: Voer de in vivo formulering in (Dit is alleen de calculator, geen formulering. Neem eerst contact met ons op als er geen in vivo formulering is in het gedeelte Oplosbaarheid.)

% DMSO + % + % Tween 80 + % ddH₂O

%DMSO+ %

Berekeningsresultaten:

Werkconcentratie: mg/ml;

Methode voor het bereiden van DMSO-mastervloeistof: mg geneesmiddel vooraf opgelost in μL DMSO ( Concentratie mastervloeistof mg/mL, Neem eerst contact met ons op als de concentratie de DMSO-oplosbaarheid van de partij geneesmiddel overschrijdt. )

Methode voor het bereiden van in vivo formulering: Neem μL DMSO mastervloeistof, voeg vervolgens toeμL PEG300, mengen en helder maken, voeg vervolgens toeμL Tween 80, mengen en helder maken, voeg vervolgens toe μL ddH₂O, mengen en helder maken.

Methode voor het bereiden van in vivo formulering: Neem μL DMSO mastervloeistof, voeg vervolgens toe μL Maïsolie, mengen en helder maken.

Opmerking: 1. Zorg ervoor dat de vloeistof helder is voordat u het volgende oplosmiddel toevoegt.
2. Zorg ervoor dat u het/de oplosmiddel(en) in de juiste volgorde toevoegt. U moet ervoor zorgen dat de verkregen oplossing, bij de vorige toevoeging, een heldere oplossing is voordat u verdergaat met het toevoegen van het volgende oplosmiddel. Fysische methoden zoals vortexen, echografie of een warmwaterbad kunnen worden gebruikt om het oplossen te bevorderen.

Werkingsmechanisme

Targets/IC₅₀/Ki	TGFβR1(ALK5) (Cell-free assay) 4 nM
In vitro	RepSox (E-616452) remt ATP-binding aan ALK5 en ALK5-autofosforylering met respectievelijk IC50 van 23 nM en 4 nM. Het remt ook TGF-β geïnduceerde cellulaire PAI-1 luciferase-activiteit met IC50 van 18 nM. Deze verbinding is in staat Sox2 succesvol te vervangen bij herprogrammering door de signalering van Transforming Growth Factor-β (Tgf-β) te remmen, wat op zijn beurt Nanog-expressie induceert. Het effect van RepSox dat herprogrammering induceert, vereist geen chromatine-remodellering. Het blijkt efficiënt te zijn in het genereren van iPSC's.
Kinase Assay	ALK5 fluorescentiepolarisatie bindingstest
Kinase Assay	Verbindingen die aan ALK5 binden, worden getest op gezuiverd recombinant GST-ALK5 (residuen 198-503). De verplaatsing van een met rhodamine groen fluorescent gelabelde ATP-competitieve remmer door verschillende concentraties testverbindingen wordt gebruikt om een bindings-pIC50 te berekenen. GST-ALK5 wordt toegevoegd aan een buffer die 62,5 mM Hepes, pH 7,5, 1 mM DTT, 12,5 mM MgCl₂, 1,25 mM CHAPS en 1 nM rhodamine groen-gelabelde ligand bevat, zodat de uiteindelijke ALK5-concentratie 10 nM is, gebaseerd op de actieve-plaats-titratie van het enzym. Veertig microliter van het enzym/ligand-reagens wordt toegevoegd aan 384-wells assayplaten die 1 μL van verschillende concentraties RepSox (E-616452) bevatten. De platen worden onmiddellijk afgelezen op een fluorescentielezer met excitatie-, emissie- en dichroïsche filters van respectievelijk 485, 530 en 505 nm. De fluorescentiepolarisatie voor elke well wordt berekend door de Acquest en wordt vervolgens geïmporteerd in curve fitting software voor de constructie van concentratie-responscurves.
In vivo	Bij injectie in blastocysten kan RepSox (E-616452) in vivo bijdragen aan de vorming van chimere embryo's. Een behandeling van één dag met deze verbinding is voldoende om transgeen Sox2 te vervangen.
Referenties	[1] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/15317461/ [2] http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC3335195/ [3] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/36207615/ [4] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/32066676/

Toepassingen

Methoden	Biomarkers	Afbeeldingen	PMID
Western blot	α-SMA / Calponin / Histone H3		30365043
Immunofluorescence	Smad2/3 / cytokeratin		28729719

Technische ondersteuning

Gebruiksaanwijzing

Tel: +1-832-582-8158 Ext:3

Als u nog andere vragen heeft, kunt u een bericht achterlaten.

C1=C0/X	C1:	LOG(C1):
C2=C1/X	C2:	LOG(C2):
C3=C2/X	C3:	LOG(C3):
C4=C3/X	C4:	LOG(C4):
C5=C4/X	C5:	LOG(C5):
C6=C5/X	C6:	LOG(C6):
C7=C6/X	C7:	LOG(C7):
C8=C7/X	C8:	LOG(C8):