uitsluitend voor onderzoeksdoeleinden

D-Luciferin Dyes remmer

Cat.Nr.S7763

D-Luciferin is een populair bioluminescent substraat van luciferase in aanwezigheid van ATP, gebruikt in luciferase-gebaseerde bioluminescentie beeldvorming en cel-gebaseerde high-throughput screening toepassingen. In een immuuncompetent muismodel van eierstokkanker, behoudt het gebruik van deze verbinding en vuurvliegluciferase tumor-gastheer immuuninteracties, aangezien bioluminescentie beeldvorming een gevoeliger indicatie is van tumorgroei dan gewichtstoename.
D-Luciferin Dyes remmer Chemical Structure

Chemische structuur

Moleculair gewicht: 280.32

Ga naar

Kwaliteitscontrole

Batch: Zuiverheid: 99.48%
99.48

Celkweek, behandeling & werkconcentratie

Cellijnen Assaytype Concentratie Incubatietijd Formulering Activiteitsbeschrijving PMID
CHO cells Function assay Displacement of [3H]PSB-13253 from human recombinant GPR35 exprssed in CHO cells by liquid scintillation counting analysis, Ki=9.86 μM 23888932
HT29 cells  Function assay Agonist activity at human GPR35 expressed in human HT29 cells by DMR assay, EC50=12.9 μM 23888932
Klik om meer experimentele gegevens over de cellijn te bekijken

Chemische informatie, Opslag en Stabiliteit

Moleculair gewicht 280.32 Formule

C11H8N2O3S2

Opslag (Vanaf de ontvangstdatum) 3 years -20°C(in the dark) powder
CAS-nr. 2591-17-5 SDF downloaden Opslag van stamoplossingen

Synoniemen Firefly luciferin, Beetle Luciferin Smiles C1C(N=C(S1)C2=NC3=C(S2)C=C(C=C3)O)C(=O)O

Oplosbaarheid

In vitro
Batch:

DMSO : 26 mg/mL (92.75 mM)
(Met vocht verontreinigde DMSO kan de oplosbaarheid verminderen. Gebruik verse, watervrije DMSO.)

Water : Insoluble

Ethanol : Insoluble

Molariteitscalculator

Massa Concentratie Volume Moleculair gewicht
Verdunningscalculator Moleculair gewicht calculator

In vivo
Batch:

In vivo Formuleringscalculator (Heldere oplossing)

Stap 1: Voer de onderstaande informatie in (Aanbevolen: Een extra dier voor het geval van verlies tijdens het experiment)

mg/kg g μL

Stap 2: Voer de in vivo formulering in (Dit is alleen de calculator, geen formulering. Neem eerst contact met ons op als er geen in vivo formulering is in het gedeelte Oplosbaarheid.)

% DMSO % % Tween 80 % ddH2O
%DMSO %

Berekeningsresultaten:

Werkconcentratie: mg/ml;

Methode voor het bereiden van DMSO-mastervloeistof: mg geneesmiddel vooraf opgelost in μL DMSO ( Concentratie mastervloeistof mg/mL, Neem eerst contact met ons op als de concentratie de DMSO-oplosbaarheid van de partij geneesmiddel overschrijdt. )

Methode voor het bereiden van in vivo formulering: Neem μL DMSO mastervloeistof, voeg vervolgens toeμL PEG300, mengen en helder maken, voeg vervolgens toeμL Tween 80, mengen en helder maken, voeg vervolgens toe μL ddH2O, mengen en helder maken.

Methode voor het bereiden van in vivo formulering: Neem μL DMSO mastervloeistof, voeg vervolgens toe μL Maïsolie, mengen en helder maken.

Opmerking: 1. Zorg ervoor dat de vloeistof helder is voordat u het volgende oplosmiddel toevoegt.
2. Zorg ervoor dat u het/de oplosmiddel(en) in de juiste volgorde toevoegt. U moet ervoor zorgen dat de verkregen oplossing, bij de vorige toevoeging, een heldere oplossing is voordat u verdergaat met het toevoegen van het volgende oplosmiddel. Fysische methoden zoals vortexen, echografie of een warmwaterbad kunnen worden gebruikt om het oplossen te bevorderen.

Werkingsmechanisme

In vitro

1.Voorbeeldprotocol voor in vitro bioluminescente beeldvormingsassays
a) Bereid een 100 mM (100-200X) Luciferin stockoplossing in steriel water. Goed mengen. Onmiddellijk gebruiken, of aliquots voor eenmalig gebruik maken, en bewaren bij -20℃, vermijd vries-dooi cycli, vermijd blootstelling aan licht.
b) Bereid een 0,5-1 mM werkzame oplossing van D-Luciferin in voorverwarmd weefselkweekmedium.
c) Aspireer medium van gekweekte cellen.
d) Voeg deze verbinding werkzame oplossing toe aan cellen, en incubeer de cellen gedurende 5-10 minuten bij 37℃ vlak voor beeldvorming.
2.Voorbeeldprotocol voor in vivo bioluminescente beeldvormingsassays
a) Bereid een 15 mg/mL Luciferin stockoplossing in DPBS, zonder Mg2+ en Ca2+. Goed mengen.
b) Filtreer de oplossing steriel door een 0,2 μm filter. Onmiddellijk gebruiken, of aliquots voor eenmalig gebruik maken, en bewaren bij -20℃, vermijd vries-dooi cycli, vermijd blootstelling aan licht.
c) Injecteer de luciferin intraperitoneaal (i.p.) 10-15 minuten voor beeldvorming met 150 mg/kg (of 10 μL/g van deze chemische stockoplossing) van het lichaamsgewicht van het dier.
Opmerking: Een kinetische studie van luciferin moet worden uitgevoerd voor elk dierenmodel om de pieksignaaltijd te bepalen.
3.Voorbeeldprotocol voor luciferin reporterassays
a) Bereid een 100 mM Luciferin stockoplossing in steriel water. Onmiddellijk gebruiken, of aliquots voor eenmalig gebruik maken, en bewaren bij -20℃, vermijd vries-dooi cycli, vermijd blootstelling aan licht.
b) Bereid een 1 mM werkzame oplossing van dit verbinding met 3 mM ATP, 1 mM DTT en 15 mM MgSO4 in 25 mM tricine buffer pH 7,8.
c) Pipetteer 5-10 μL cellysaat in een microplaat. Gebruik lysisreagens of buffer zonder lysaat als blanco.
d) Prime luminometer met deze chemische werkzame oplossing.
e) Injecteer 200 μL van deze verbinding werkzame oplossing zonder vertraging en een integratietijd van 10 seconden.

In vivo

In een immuuncompetent muismodel van eierstokkanker, behoudt het gebruik van D-Luciferin substraat en vuurvliegluciferase tumor-gastheer immuuninteracties, aangezien bioluminescentiebeelden een gevoeligere indicatie zijn van tumorgroei dan gewichtstoename.

Referenties

Technische ondersteuning

Gebruiksaanwijzing

Tel: +1-832-582-8158 Ext:3

Als u nog andere vragen heeft, kunt u een bericht achterlaten.

Gelieve uw naam in te voeren.
Gelieve uw e-mailadres in te voeren. Voer een geldig e-mailadres in.
Schrijf alstublieft iets voor ons.