Name: MK-5108
Brand: Selleck Chemicals
SKU: S2770
Rating: 5 (40 reviews)

Ga naar

Kwaliteitscontrole

Batch: Zuiverheid: 99.17%

99.17

Gerelateerde doelwitten	CDK HSP PD-1/PD-L1 ROCK Wee1 DNA/RNA Synthesis Microtubule Associated Ras KRas Casein Kinase
Overige Aurora Kinase Inhibitoren	Hesperadin Barasertib-HQPA (AZD2811) Alisertib (MLN8237) Tozasertib (VX-680) ZM 447439 MLN8054 Danusertib (PHA-739358) TCS7010 (Aurora A Inhibitor I) AMG-900 PHA-680632

Celkweek, behandeling & werkconcentratie

Cellijnen	Assaytype	Concentratie	Incubatietijd	Activiteitsbeschrijving	PMID
BL21 (DE3) Rosetta	Function assay		30 mins	Inhibition of His-tagged human Aurora A kinase (122 to 40 residues) expressed in Escherichia coli BL21 (DE3) Rosetta cells using biotinylated STK2 substrate incubated for 30 mins by HTRF assay, IC50 = 0.000064 μM.	27391133
HeLa Kyoto	Function assay		20 hrs	Inhibition of Aurora A kinase autophosphorylation at Thr288 in human HeLa Kyoto cells incubated for 20 hrs, IC50 = 0.3 μM.	27391133
HCC1143	Antiproliferation assay			Antiproliferation activity against human HCC1143 cells assessed as inhibition of cell proliferation, IC50 = 0.42 μM.	28918096
AU565	Antiproliferation assay			Antiproliferation activity against human AU565 cells assessed as inhibition of cell proliferation, IC50 = 0.45 μM.	28918096
MCF7	Antiproliferation assay			Antiproliferation activity against human MCF7 cells assessed as inhibition of cell proliferation, IC50 = 0.52 μM.	28918096
HCC1806	Antiproliferation assay			Antiproliferation activity against human HCC1806 cells assessed as inhibition of cell proliferation, IC50 = 0.56 μM.	28918096
CAL851	Antiproliferation assay			Antiproliferation activity against human CAL851 cells assessed as inhibition of cell proliferation, IC50 = 0.74 μM.	28918096
HeLa	Function assay	16 mg/kg	2 days	Plasma concentration in F344/N Jcl-rnu rat xenografted with luciferase expressing human HeLa cells at 16 mg/kg, po BID for 2 days, Cp = 1.7 μM.	28918096
HeLa	Function assay	32 mg/kg	2 days	Plasma concentration in F344/N Jcl-rnu rat xenografted with luciferase expressing human HeLa cells at 32 mg/kg, po BID for 2 days, Cp = 4.4 μM.	28918096
Saos-2	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for Saos-2 cells	29435139
MG 63 (6-TG R)	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for MG 63 (6-TG R) cells	29435139
OHS-50	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for OHS-50 cells	29435139
SK-N-MC	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for SK-N-MC cells	29435139
BL21-Codon-Plus(DE3)-RIL	Function assay		120 mins	Inhibition of human N-terminal His-tagged Aurora A expressed in Escherichia coli BL21-Codon-Plus(DE3)-RIL cells using 5-carboxy-fluorescein-y-aminobutyric acid-Ala-Leu-Arg-Arg-Ala-Ser-Leu-Gly-NH2 as substrate after 120 mins by fluorescence polarization as, IC50 = 0.00054 μM.	ChEMBL
HeLaS3	Cytotoxicity assay		3 days	Cytotoxicity against human HeLaS3 cells assessed as cell growth inhibition after 3 days by WST-8 assay, IC50 = 1.26 μM.	ChEMBL
Klik om meer experimentele gegevens over de cellijn te bekijken

Chemische informatie, Opslag en Stabiliteit

Moleculair gewicht	461.94	Formule	C₂₂H₂₁ClFN₃O₃S	Opslag (Vanaf de ontvangstdatum)	3 jaar-20°Cpoeder
CAS-nr.	1010085-13-8	SDF downloaden		Opslag van stamoplossingen	1 jaar-80°Cin oplosmiddel 1 maand-20°Cin oplosmiddel
Synoniemen	VX-689			Smiles	C1CC(CCC1OC2=C(C(=CC=C2)Cl)F)(CC3=NC(=CC=C3)NC4=NC=CS4)C(=O)O

Oplosbaarheid

In vitro
Batch:

DMSO : 92 mg/mL (199.16 mM)
(Met vocht verontreinigde DMSO kan de oplosbaarheid verminderen. Gebruik verse, watervrije DMSO.)

Water : Insoluble

Ethanol : Insoluble

Molariteitscalculator

Massa	Concentratie	Volume	Moleculair gewicht
=	×	×

Verdunningscalculator Moleculair gewicht calculator

In vivo Batch:
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Homogeneous suspension	0.5% methylcellulose 1 0.2% Tween 80 Gevalideerd door Selleck labs. Mocht u aanpassingen aan deze formulering nodig hebben, neem dan contact op met ons verkoopteam voor aangepaste tests.	10.000mg/ml (21.65mM)	Taking the 1 mL working solution as an example, take 10 mg of this product, add it to 1 ml of 0.5% methylcellulose+0.2% Tween 80 clear solution, and mix evenly to make it a uniform suspension. The mixed solution should be used immediately for optimal results.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.

In vivo Formuleringscalculator (Heldere oplossing)

Stap 1: Voer de onderstaande informatie in (Aanbevolen: Een extra dier voor het geval van verlies tijdens het experiment)

Dosering: mg/kg Gemiddeld gewicht van dieren: g Doseervolume per dier:μL Aantal dieren:

Stap 2: Voer de in vivo formulering in (Dit is alleen de calculator, geen formulering. Neem eerst contact met ons op als er geen in vivo formulering is in het gedeelte Oplosbaarheid.)

% DMSO + % + % Tween 80 + % ddH₂O

%DMSO+ %

Berekeningsresultaten:

Werkconcentratie: mg/ml;

Methode voor het bereiden van DMSO-mastervloeistof: mg geneesmiddel vooraf opgelost in μL DMSO ( Concentratie mastervloeistof mg/mL, Neem eerst contact met ons op als de concentratie de DMSO-oplosbaarheid van de partij geneesmiddel overschrijdt. )

Methode voor het bereiden van in vivo formulering: Neem μL DMSO mastervloeistof, voeg vervolgens toeμL PEG300, mengen en helder maken, voeg vervolgens toeμL Tween 80, mengen en helder maken, voeg vervolgens toe μL ddH₂O, mengen en helder maken.

Methode voor het bereiden van in vivo formulering: Neem μL DMSO mastervloeistof, voeg vervolgens toe μL Maïsolie, mengen en helder maken.

Opmerking: 1. Zorg ervoor dat de vloeistof helder is voordat u het volgende oplosmiddel toevoegt.
2. Zorg ervoor dat u het/de oplosmiddel(en) in de juiste volgorde toevoegt. U moet ervoor zorgen dat de verkregen oplossing, bij de vorige toevoeging, een heldere oplossing is voordat u verdergaat met het toevoegen van het volgende oplosmiddel. Fysische methoden zoals vortexen, echografie of een warmwaterbad kunnen worden gebruikt om het oplossen te bevorderen.

Werkingsmechanisme

Targets/IC₅₀/Ki	Aurora A (Cell-free assay) 0.064 nM
In vitro	MK-5108 remt de Aurora-A-activiteit op een ATP-competitieve manier. Deze verbinding vertoont een robuuste selectiviteit tegenover de andere familiekinasen Aurora-B (220-voudig) en Aurora-C (190-voudig) in de biochemische test. Het vertoont ook een hoge selectiviteit voor Aurora-A ten opzichte van andere proteïnekinasen. De verbinding remt slechts één kinase (TrkA) met een selectiviteit van <100-voudig. Het kan selectiever zijn voor Aurora-A dan MLN8054. In overeenstemming met de inductie van pHH3-positieve cellen, induceert deze chemische stof accumulatie van cellen in de G2-M-fase. Het remt de proliferatie van tumorcellen, waaronder HCC1143, AU565, MCF-7, HCC1806 en CAL85-1 met een IC50 van respectievelijk 0,42 M, 0,45 M, 0,52 M, 0,56 M en 0,74 M. Deze verbinding vermindert de cellevensvatbaarheid op een dosisafhankelijke manier in alle drie de cellijnen, inclusief LEIO285, LEIO505 en SK-LSM1-cellen met een IC50 van ongeveer 100 nM. Incubatie ermee in LEIO285 verhoogt het aandeel cellen in G2/M na 48 en 72 uur na behandeling. De verbinding verhoogt de Caspase 3/7-activiteit significant in vergelijking met met DMSO behandelde controleculturen op beide tijdstippen. In LEIO505-cellen leidt het tot meer cellen die zich accumuleren in G2/M-fasen na 24 uur, maar niet na 48 uur of 72 uur.
Kinase Assay	Biochemische kinase assays
Kinase Assay	Recombinant His-gelabeld humaan Aurora-A-eiwit wordt tot expressie gebracht in Escherichia coli en gezuiverd met een HisTrap HP-kolom. Gezuiverd recombinant humaan Aurora-B- en Aurora-C-eiwit worden aangekocht. Experimenten worden in vijfvoud uitgevoerd in 96-well platen. De Aurora-A-assayreactie wordt uitgevoerd in aanwezigheid van 20 μM ATP, 25 μM Tetra-Kemptide [RRR(GLRRASLG)₄R-NH₂], 1,0 μCi per well [γ-³³P]-ATP, 0,1 ng per well Aurora-A in 50 mM Tris-HCl (pH 7.4), 15 mM Mg(OAc)₂, en 0,2 mM EDTA bij 30°C gedurende 40 minuten. Om de remmingswijze van MK-5108 voor Aurora-A te onderzoeken, worden de IC50-waarden van deze verbinding bepaald in aanwezigheid van verschillende concentraties ATP. Vervolgens wordt de IC50-waarde uitgezet als functie van de ATP-concentratie om het effect van de ATP-concentratie op de IC50-waarde van deze chemische stof te analyseren. De Aurora-B-assayreactie wordt uitgevoerd in aanwezigheid van 15 μM ATP, 100 μM Kemptide (GLRRASLG-NH₂), 1,0 μCi per well [γ-³³P]-ATP, 5,0 ng per well Aurora-B in 50 mM Tris-HCl (pH 7.4), 15 mM Mg(OAc)₂, en 0,2 mM EDTA bij 30 °C gedurende 20 minuten. De Aurora-C-assayreactie wordt uitgevoerd in aanwezigheid van 40 μM ATP, 100 μM Kemptide, 1,0 μCi per well [γ-³³P]-ATP, 15 ng per well Aurora-C in 10 mM MOPS-NaOH (pH 7.4), 5 mM Mg(OAc)₂, 1 mM (±) DTT, en 1 mM EGTA bij 30°C gedurende 20 minuten. Nadat de kinase-reacties zijn beëindigd door toevoeging van 2,0% fosforzuur, wordt Tetra-Kemptide of Kemptide op de MultiScreen-PH-plaat gevangen. Wells worden vijf keer gewassen met 0,64% fosforzuur en vervolgens gecontroleerd op radioactiviteit in een vloeistofscintillatieteller.
In vivo	MK-5108 induceert pHH3-positieve cellen bij doses van 16 mg/kg en 32 mg/kg. De plasmaconcentratie van deze verbinding bij 8 mg/kg en 16 mg/kg bedraagt respectievelijk 1,7 M en 4,4 M. Deze behandeling met de verbinding resulteert in de inductie van pHH3 in tumor- en huidweefsels, die begint na 2 uur en een maximum bereikt na 4 uur. Deze chemische behandelingen bij 15 mg/kg en 30 mg/kg resulteren in een significante remming van de tumorgroei met de verandering in het gemiddelde tumorvolume voor de behandelingsgroep als percentage van de gemiddelde verandering in de controlegroep (%T/C) van 10% en 6% op dag 11, en 17% en 5% op dag 18, respectievelijk. Het wordt goed verdragen bij beide doses, met minimale vermindering van het lichaamsgewicht. Deze verbinding vertoont ook een significante antitumoractiviteit door intermitterende dosering bij naaktratten met SW48-tumoren; bij 15 mg/kg en 45 mg/kg veroorzaakt het dosisafhankelijke remming van de tumorgroei met een %T/C van 35% en 7% op dag 10, en 58% en 32% op dag 27, respectievelijk.
Referenties	[1] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/20053775/ [2] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/22535157/

Toepassingen

Methoden	Biomarkers	Afbeeldingen	PMID
Western blot	p-Aurora A / Aurora-A / N-MYC		29262328
Growth inhibition assay	Cell viability		24756365

Technische ondersteuning

Gebruiksaanwijzing

Tel: +1-832-582-8158 Ext:3

Als u nog andere vragen heeft, kunt u een bericht achterlaten.

C1=C0/X	C1:	LOG(C1):
C2=C1/X	C2:	LOG(C2):
C3=C2/X	C3:	LOG(C3):
C4=C3/X	C4:	LOG(C4):
C5=C4/X	C5:	LOG(C5):
C6=C5/X	C6:	LOG(C6):
C7=C6/X	C7:	LOG(C7):
C8=C7/X	C8:	LOG(C8):

MK-5108 Aurora Kinase remmer

Chemische structuur

Moleculair gewicht: 461.94