Cetuximab (anti-EGFR)

Die Cetuximab-Behandlung erhöht das mitochondriale Priming von EGFR-exprimierenden HeLa-Zellen, nicht aber in EGFR-exprimierenden MDA-MD-231-Zellen.[2]

Zellen wurden bei einer Dichte von 1 x 10⁶/50 μL in Lysepuffer (0,25 M Tris-HCl, 2 % Natriumdodecylsulfat, 4 % β-Mercaptoethanol, 10 % Glycerin, 0,02 % Bromphenolblau) lysiert, der mit 1 X Protease/Phosphatase-Inhibitor-Cocktail ergänzt wurde. Zelllysate wurden dann auf Polyacrylamidgele mit Natriumdodecylsulfat geladen. Nach der Elektrophorese wurden Proteine auf Polyvinylidendifluorid (PVDF)-Membranen übertragen. Die transblottierten Membranen wurden 1 Stunde lang blockiert und dann über Nacht bei 4 °C mit geeigneten primären Antikörpern inkubiert. Am nächsten Tag wurden die Membranen dreimal für insgesamt 30 Minuten gewaschen und dann 1 Stunde lang in Dunkelheit bei Raumtemperatur mit IRDye 680RD Donkey anti-Rabbit IgG (H + L) oder IRDye 800CW Donkey anti-Mouse IgG (H + L) inkubiert. Nach weiteren drei Waschschritten wurden Immunoblot-Membranen gescannt und die Bandenintensität quantifiziert.

C225 verstärkte die Antitumoraktivität mehrerer Chemotherapeutika in Maus-Xenograftmodellen[1]. Cetuximab entfaltet seine Antitumorwirksamkeit durch multiple Mechanismen, zu denen die Hemmung des Zellzyklusfortschritts durch Arrest in der G1-Phase und eine verringerte Zellzahl in der S-Phase gehören. Der Zellzyklusarrest in der G1-Phase induziert auch Apoptose durch die Induktion und Aktivierung proapoptotischer Moleküle. Cetuximab allein und in Synergie mit Carboplatin führte zu einer Verringerung der Tumorgröße, der metastatischen Ausbreitung und der MVD in NCI-N87-Tumoren mit EGFR-Zelloberflächenexpression und dem Fehlen von Mutationen in BRAF und K-ras, während Cetuximab minimale In-vitro-Effekte und keine In-vivo-Behandlungswirksamkeit in Tumoren hatte, die von MKN-45 stammen, bei denen der Phänotyp ebenfalls BRAF und K-ras Wildtyp war, die aber nur eine schwache zytoplasmatische EGFR-Proteinexpression aufwiesen[3].

Ziel: Antitumoraktivität von Cetuximab in einem murinen Magenkrebsmodell
Tiermodelle: Nacktmausmodell für menschlichen Magenkrebs (CD-1/nu-nu Mäuse)
Formulierung: 0,9 % NaCl
Dosierungen: 1 mg/kg
Verabreichung: i.p.
Referenz: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/22011788

Ziel: Untersuchung des Zusammenhangs zwischen den EGFR-Spiegeln und dem Ansprechen auf Cetuximab-Behandlung in humanen Krebs-Xenograftmodellen
Tiermodelle: Weibliche athymische Nacktmäuse wurden s.c. mit ~1 mm3 großen Tumorfragmenten implantiert
Formulierung: PBS
Dosierungen: 0,25, 0,5 oder 1 mg/Maus
Verabreichung: i.p.
Referenz: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/27186886

Cetuximab kann bei Nacktmäusen, verschiedenen Krebszelllinien und anderen verwandten Assays angewendet werden (Nur als Referenz)