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Anti-DYKDDDDK Tag Affinity Gel

Anti-DYKDDDDK Tag Affinity Gel ist ein Protein A-gereinigter muriner IgG2b monoklonaler Antikörper, der kovalent an Sepharose 4B gebunden ist.

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Produktvergleich

Beschreibung

Anti-DYKDDDDK Tag Affinity Gel ist ein Protein A-gereinigter muriner IgG2b monoklonaler Antikörper, der kovalent an Sepharose 4B gebunden ist.

Eigenschaften

Antikörper-Klon	1E6
Antikörper-Isotyp	Maus IgG2b
Antikörperreinigung	Protein A gereinigt
Gebundener Antikörper	Nicht weniger als 7,5 Gramm Antikörper/Liter Gel
Anwendung	Proteinreinigung, Immunpräzipitation
Produktzusammensetzung	Dieses Produkt ist eine 50%ige Gelsuspension, hergestellt in einer Stammlösung aus 10 mM Na₃PO₄, 150 mM NaCl, 50% Glycerin, pH 7,4, enthaltend 0,02% (w/v) Natriumazid
Empfohlenes Volumen	IP: 5 μl Gel für 500 μl Rohproteinlösung
Bindungskapazität	Mindestens 1,1 mg eines DYKDDDDK Tag-Fusionsproteins pro ml gepacktem Harz eluiert
Bindungseigenschaften	Met-N-terminales DYKDDDDK Tag-Fusionsprotein: Met-DYKDDDDK Tag–Protein N-terminales DYKDDDDK Tag-Fusionsprotein: DYKDDDDK Tag–Protein C-terminales DYKDDDDK Tag-Fusionsprotein: Protein-DYKDDDDK Tag

Lagerung (ab dem Datum des Erhalts)

Das ungeöffnete Produkt ist bei -20°C 2 Jahre stabil. Nach Gebrauch sollte das Harz gereinigt und in 50% Glycerin mit 10 mM Natriumphosphat, 150 mM Natriumchlorid, pH 7,4, gelagert werden, das 0,02% Natriumazid enthält, um das Produkt zu schützen. Nicht in Abwesenheit von Glycerin einfrieren.

Protokoll

Dieses Beispielprotokoll wird für die Immunpräzipitation von DYKDDDDK-markierten (DYKDDDDK-tagged) Proteinen empfohlen.

Affinitätsgel-Herstellung	1. Das Anti-DYKDDDDK Tag Affinity Gel in der Durchstechflasche gründlich suspendieren, um eine gleichmäßige Suspension des Harzes zu erhalten. Schnell 10 μl der Gelsuspension (ca. 5 μl gepacktes Gelvolumen) in ein neues Röhrchen überführen. 2. 0,5 mL TBS hinzufügen. Das Anti-DYKDDDDK Tag Affinity Gel durch Pipettieren gründlich suspendieren. Das Harz 30 Sekunden lang bei 5000 U/min zentrifugieren und den Überstand vorsichtig entfernen. Sicherstellen, dass der gesamte Waschpuffer entfernt wird, ohne das Harz zu verwerfen. 3-4 Mal wiederholen. 3. 500 μl Zell-Periplasma-Extrakte zum gewaschenen Harz hinzufügen. 4. Proben 2 Stunden lang bei 4°C vorsichtig schütteln. 5. Das Harz 30 Sekunden lang bei 5000 U/min zentrifugieren. Die Überstände in ein neues Röhrchen überführen. 6. Das Harz mit 0,5 ml TBS waschen, bis die OD280 des Überstands < 0,05 beträgt. 7. Extreme pH-Bedingungen oder überschüssiges Poly-DYKDDDDK Tag-Peptid können auf das Harz aufgetragen werden, um das DYKDDDDK-markierte Protein zu eluieren. Wählen Sie die Elutionsmethoden entsprechend den Eigenschaften des Zielproteins und der nachgeschalteten Anwendung. 8. Zum direkten Nachweis des Zielproteins 2x SDS-PAGE-ProbenlPuffer im Verhältnis 1:1 zu 20 μl Gelsuspension geben. Die Probe 5 Minuten kochen. Bei 5000 U/min 30 Sekunden zentrifugieren. Den Überstand vorsichtig in ein neues Fläschchen für die SDS-PAGE überführen.
Probenbindung
Harzwaschung
Elution und Nachweis

Selleck Bietet Poly DYKDDDDK Tag Peptide lyophilized powder für die Elution von Proteinprodukten.

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Manual
SDS

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